豬O 型口蹄疫一免與二免抗體水平監測對比試驗報告

劉根林，趙德豐，胡錦義，漆亞芝

（廣西省興安縣動物疫病預防控制中心，廣西 興安 541300）

口蹄疫（foot and mouth disease, FMD）是一種由口蹄疫病毒（FMDV）引起偶蹄哺乳動物發病的重要傳染病。常見血清型有亞洲I 型、A型、C 型、O 型、SAT1、SAT2、SAT3[1]。豬最易感染O 型口蹄疫病毒，病畜體溫升高，口、鼻、蹄等部位出現水皰，哺乳仔豬及保育仔豬患病后因心肌炎和腸炎死亡率可達到50%以上，一旦發病，會造成嚴重經濟損失[2]。口蹄疫是國家實行強制免疫的一類動物疫病，農村散養戶及中小型養豬場大多只接種一次疫苗，而大型養豬企業，均采取二次加強免疫接種，科學的免疫程序，才能對豬群起到更好的保護[3]。本文對12 個豬場商品豬一次及二次接種口蹄疫疫苗后進行抗體水平監測對比，現報告如下。

1 免疫監測試驗設計

2022 年上半年，在本轄區選定的大中小豬場12 個共11 056 頭，利用豬口蹄疫O 型滅活疫苗（金宇保靈生物藥品有限公司，規格100 mL/瓶，生產批號21360401）免疫注射，50 日齡1 mL/頭首免，80 日齡2 mL/頭二免，每個豬場于首免及二免后25 日，隨機抽20 頭豬只采血檢測，統計各場免疫后抗體平均水平及抗體合格率。

2 實驗室檢測

試驗項目：液相阻斷－酶聯免疫吸咐試驗。

2.1 材料準備

采血后2～8 ℃ 保存2 h 內送至實驗室離心制備血清樣本（表 1）。口蹄疫病毒 O 型（FMDV-O）抗體檢測試劑盒（北京萬博百測生物科技有限公司，生產批號1FMDO22038）。

表1 血樣來源豬場情況簡介

2.2 檢測

（1）包被板每孔在對應孔加入80 μL 樣品稀釋液、20 μL 陰陽對照及樣品，蓋上封板模25 ℃孵育60 min。（2）每孔300 μL 洗滌液洗板3次，吸水紙拍干。（3）每孔加入100 μL 酶標抗體蓋上封板模25 ℃ 孵育60 min。（4）每孔300 μL洗滌液洗板3 次，吸水拍干后每孔加入TMB 底物反應液100 μL，25 ℃ 暗處放置15 min。（5）每孔加入 50 μL 終止液溫和震蕩，在酶標儀450 nm 波長處讀數。（6）結果判定。實驗有效性判定：陰性對照平均OD 值>0.7，陽性對照平均OD 值<0.25；S/N=樣品OD 值/陰性平均OD 值，S/N 值≤0.6 判為陽性，S/N 值>0.6 判為陰性。

3 結果

表1 試驗結果統計表

通過以上數據對比，一次免疫抗體水平低于二次免疫抗體水平，一次免疫樣品仍有部分陰性，二免樣品比一次免疫抗體合格率高。

4 數據分析與探討

（1）本次實驗共12 個大中小規模豬場參與，各豬場管理、飼養水平及操作人員不同，使用同一廠家和同一批次的疫苗進行免疫，初免、二免的日齡相同，采血日期距注射間隔時間相同，每個豬場隨機抽樣20 頭豬進行檢測，可以真實地反應出免疫效果。（2）實驗共免疫注射11 056 頭，隨機抽檢采血240 頭份樣本檢測，首免陽性樣本214 份，陰性樣本26 份，首次免疫接種抗體合格率89.2%，二免后陽性樣本240份，抗體合格率100%。（3）12 個豬場首免樣品平均OD 值為0.5123，平均S/N 值0.284。二免樣品平均OD 值0.163，平均S/N 值0.0903。二免平均S/N 值明顯低于首免，二免后抗體水平及抗體合格率更高，免疫效果更好。