水產品中丁香酚檢測方法研究進展

◎ 王安偉，吳禮麗，劉天密，林 毅，賴長勝，李秋月，張 燕

（1.海南省水產品質量安全檢測中心，海南 海口 570100；2. 海南省技師學院食品系，海南 海口 570100）

隨著人們生活水平的日益提高，消費者對于自身的健康問題越來越重視，對蛋白質等營養價值也越來越關注，水產品是人類重要的蛋白質來源，和畜類產品比較具有高蛋白、低脂肪的優點。伴隨對水產品需求的不斷增大，我國漁業近年發展迅速，根據《2021年全國漁業經濟統計公報》，漁業經濟總產值達到29 689.73 億元，全國水產品總量達到6 690.29 萬t，全國水產品人均占有量為47.36 kg[1]。

丁香酚主要用于抗菌、降血壓，鎮痛[2-4]，對羅非魚、鱸魚、虹彩鯊、泛海蝦等[5]鮮活水產品具有良好的麻醉效果，普遍應用于水產品運輸環節中。然而，過量使用會對人類有急性毒性、致癌性、致突性等風險，危害人們身體健康,美國將其列入第3 類致癌物[6]。

1 檢測方法

近年，為了滿足丁香酚藥物殘留的檢測需要，研究人員研究出多種方法，主要有GC、GC-MS/MS、HPLC[7]、HPLC-MS/MS[8]等。

1.1 高效液相色譜法

高效液相色譜法具有分析速度快，分離效能高、高靈敏度等優點。禤開智等[9]建立了以200 nm 和290 nm 雙波長檢測水產品中丁香酚的含量，加標回收率為75.2%～98.6%，方法定量限為20 μg/kg。該方法操作簡潔，有較高的靈敏度，對于水產品中丁香酚含量的檢測具有較強的實用價值。

1.2 高效液相色譜-串聯質譜法

高效液相色譜-串聯質譜法是一種集高效分離和多組分定性、定量于一體的方法，該方法具有前處理方法相對簡單，基質干擾小，方法靈敏度高等優點。倪崢飛[10]等以正己烷為溶劑，HLB 固相萃取小柱凈化，外標法測定水產品中丁香酚殘留量，結果表明，該方法定量限為2.5 μg /kg。加標回收率在77.6%～111.4%。錢振杰等以乙腈為提取劑，HLB固相萃取小柱凈化，6 種丁香酚類化合物回收率為72.6%～109.2%，方法定量限為0.02 mg/kg。該方法滿足水產品中丁香酚殘留量的定性、定量檢測要求。

1.3 氣相色譜法

氣相色譜法是利用氣體做流動相，各組分從固定相中流出的時間不同，組分彼此分離，具有高效能、高靈敏度、高選擇性、應用廣泛、易操作等優點。顧倩[11]等建立了氣相色譜法測定復方薄荷柳酯搽劑中麝香草酚和丁香酚的含量，回收率為99.75%，該方法具有良好的準確度和重復性，操作簡單。

1.4 氣相色譜-串聯質譜法

氣相色譜-串聯質譜法是以氣相色譜作為試樣分離，將質譜作為在線檢測手段進行定性、定量分析的技術，該技術具有非常高的靈敏度。翟文靜[12]等以正己烷為提取劑，硅膠柱凈化，內標法定量。結果表明，檢出限為 2. 0 μg /kg，定量限為 5. 0 μg /kg，具有靈敏度高的特點，能滿足水產品中丁香酚殘留量的檢測要求。陸添文等建立了養殖水產品中丁香酚的殘留測定方法。該方法丁香酚檢測限為 0. 05 μg /L，定量限為 0. 17 μg /L，回收率為98.5% ～101.6%，能夠滿足養殖水產品中丁香酚檢測的需要。

1.5 化學發光酶聯免疫分析法

王強[13]等通過偶聯載體蛋白并免疫動物后獲取丁香酚多克隆抗體。結果表明，該方法的半抑制濃度為1. 28 μg/L，檢出限為0.11 μg /L。樣品中丁香酚的加標回收率為76.6%～108%，與液相色譜－串聯質譜法相比較，結果基本一致。

1.6 四極桿-飛行時間質譜法

四極桿-飛行時間質譜法是近年新興的一種檢測方法，主要是對動植物、食品、儀器設備等散發的揮發性有機物進行實時在線定性和定量分析，王強[14]等采用MSE 模式測定養殖水產品中丁香酚含量，回收率為83.2%～102%，檢出限為 0.02 μg/L，定量限為 0.05 μg/L。該方法適用于養殖水產品中丁香酚含量的快速測定。鄧穎等建立了分散固相萃取-氣相色譜-四極桿-飛行時間質譜法，測定鮮魚中 5 種酚類麻醉劑，方法檢出限為 3.58～8.96 μg/kg, 定量限為8.46～19.85 μg/kg。該方法的回收率、靈敏度、重復性都可以滿足水產品中丁香酚快速測定的要求。

2 結語

丁香酚對人體有急性毒性、致癌性風險，建立快捷、準確的分析方法測定水產品中的丁香酚具有十分重要的意義。近年，國內外在丁香酚的檢測技術研發方面不斷進步，檢測方法不斷優化，涌現了化學發光酶聯免疫分析法、高效液相色譜法、高效液相色譜-串聯質譜法、氣相色譜-串聯質譜法等技術。目前，氣相色譜-串聯質譜法是比較成熟的檢測方法，具有檢測限低、抗基質干擾、準確性和穩定性高的特點，較好地滿足了水產品中丁香酚的檢測要求。然而，因為儀器價格昂貴，基層的應用普及程度不高，不適合在縣、鄉檢測機構推廣應用。化學發光酶聯免疫分析法因其檢測速度快、成本低、儀器簡單易攜、靈敏度高、選擇性強等優點，是未來縣、鄉2 級實驗室常用的檢測方法。四極桿-飛行時間質譜法操作簡單、回收率好、靈敏度高、重復性好，是未來養殖水產品中丁香酚含量測定的一個重要的發展方向。