H-FABP在早期心肌梗死中的診斷價值的臨床觀察

單 霞，余劍波，苑 姍，吳 燕

（1.北京大學人民醫院青島醫院急診內科，山東 青島 266111；2.北京大學人民醫院急診內科，北京 100044；3.青島市第三人民醫院心內科，山東 青島 266000）

H-FABP具有15KD的低分子量，是廣泛存在于心肌細胞的細胞質中的脂肪酸攜帶蛋白。研究表明，它能夠調節心臟細胞中的線粒體β-氧化系統，約為心肌細胞胞質蛋白的10%，并可以在心臟損傷時被迅速釋放出來。H-FABP通常被認為是AMI早期診斷，急性心肌損傷和不良臨床事件的一個有前途的預測因子[1]。與其他心臟標志物例如cTnI或者CK-MB比較，H-FABP指標可以在心臟損傷后一個小時后被檢測出表達水平，這為用作最早的血漿生物標志物提供了很大的潛力。此外，H-FABP被研究發現具有較高的免疫特異性，其在心肌中的表達顯著多于在其他組織中[2]。有研究[3]表明，對于患者的ACS的診斷，H-FABP是比MYO和cTn更可靠的生物標志物，使得這一塊的研究不再空白，然而，由于高靈敏度的肌鈣蛋白（high sensitive troponin，hs TnT）檢測是可行的，因此H-FABP作為心肌梗死的診斷工具是否仍有價值是值得懷疑的[4]。本研究探究H-FABP水平與常見心肌受損指標MYO，CK-MB，cTnI相關性，及其作為診斷早期AMI中的臨床應用價值，旨在為AMI患者的早期診斷與治療及預后能夠提供一個良好參考。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取由于突然發作且持續胸悶、胸痛大于20 min未得到緩解并診斷為心肌梗死的患者合計70例為心肌梗死組，其中男39例，女31例，年齡42～83歲，平均（58.16±6.95）歲；另外選擇同期體檢者的健康63例納入為健康對照組，其中男31例，女32例，年齡45～79歲，平均（58.98± 6.40）歲。1）納入標準：所有患者均符合急性心肌梗死的診斷標準[5]；年齡＜85歲。2）排除標準：存在免疫系統疾病；伴隨重度心律失常或心功能不全患者；并發其他惡性腫瘤患者；存在嚴重感染者以及收集的臨床資料不全面患者。2組的性別、年齡、心率、血壓、飲酒史、吸煙史及基礎疾病（包括高血壓、代謝病、高血脂）等一般資料比較，差異無統計學意義（P＞0.05）。具有可比性。醫院醫學倫理委員會已對本研究進行審核且本研究已獲得批準（倫理批號：QFELL-YJ-2023-171）。所有患者家屬均自愿參與配合本研究所有數據統計，并簽署知情同意書。

1.2 研究方法

1.2.1 樣本采集 采集患者入院即刻的靜脈血，每次采集分別為凝血管與生化管2管血液，待其凝固后，使用提前預冷4 ℃的離心機，以每分鐘3 000轉的轉速離心5～10 min，使得血清分離，小心吸取上層血清并保存于-80℃冰箱且嚴格控溫避免反復凍融，待檢。

1.2.2 H-FABP、MYO、CK-MB、cTnI表達水平檢測 1）對于血清H-FABP，采用南京嵐煜生物科技有限公司的LS-2100型干式熒光免疫分析儀，檢測方法為免疫熒光雙抗體夾心法定量檢測 H-FABP 的含量。以 2株高特異性、高敏感性的單克隆抗體，其中H-FABP鼠單抗1為捕獲抗體，包被于硝酸纖維膜上測試區，H-FABP鼠單抗2標記成熒光微球，固定于結合墊。樣本中的抗原與結合墊中的H-FABP鼠單抗2標記的熒光微球結合，復合物隨后被固定在測試區上的H-FABP鼠單抗1捕獲，形成熒光微球三明治結構；結合墊中雞IgY標記的熒光顆粒復合物與固定在硝酸纖維素膜質控區上的羊抗雞IgY結合，形成質控區。通過配套儀器對該復合物進行測量和分析，可定量檢測人血中H-FABP的含量；對于血清MYO水平，使用山東濟南童鑫生物科技有限公司的全自動生化分析儀，采用免疫散射比濁法的原理進行測定；對于血清CK-MB水平，使用南京貝登醫療股份有限公司的半自動生化儀，采用肌酸顯色法的原理進行檢測；對于血清cTnl檢測，則采用微粒化學發光免疫測定法檢測原理檢測，其線性范圍是0.01～100 ng·mL-1，臨界值是0.04 ng·mL-1。以上試劑盒均購于上海斐凡信息技術有限公司，所有操作均按照各個試劑盒說明書嚴格在對應溫度要求下執行。

1.3 統計學方法

使用美國SPSS公司的IBM SPSS.19軟件進行數據結果處理，而統計圖繪制則通過美國GraphPad Software公司的GraphPad Prism 8.0軟件進行。所有符合正態分布存在正態性的數據以均數±標準差（±s）表示，2組間比較采用t檢驗。當數據單位以例、率（%）表示時，數據采用χ2進行檢驗。采用皮爾遜相關分析（Pearson correlation analysis）心肌梗死患者H-FABP的表達與MYO、CK-MB、cTnI表達的相關性。采用工作特征曲線（ROC）工具[6]解析所有納入患者的血清中的H-FABP水平對AMI患者早期診斷的預測價值，以P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 2組血清MYO、CK-MB、cTnI水平比較

見表1。

表1 2組血清MYO、CK-MB、cTnI水平比較（±s）ng·mL-1

表1 2組血清MYO、CK-MB、cTnI水平比較（±s）ng·mL-1

注：與健康對照組比較，# P＜0.05

組別例數MYO水平CK-MB水平cTnI水平心肌梗死組7068.46±6.84#14.93±4.64#6.27±1.55#健康對照組6324.19±7.31 5.38±1.871.42±0.97

2.2 2組血清H-FABP表達水平比較

見表2。

表2 2組血清H-FABP表達水平比較（±s ） ng·mL-1

表2 2組血清H-FABP表達水平比較（±s ） ng·mL-1

注：與健康對照組比較，### P＜0.001

組別例數H-FABP水平心肌梗死組70 54.13±5.61###健康對照組63 2.23±0.63

表3 心肌梗死組血清H-FABP表達水平與MYO、CK-MB、cTnI的相關性

2.3 心肌梗死組血清H-FABP表達水平與MYO、CK-MB、cTnI的相關性

通過Shapiro-Wilk法進行各標記物表達水平的正態檢驗后得到所有標記物表達均符合正態性，通過Pearson分析來統計血液中H-FABP表達水平與MYO、CK-MB、cTnI的相關性。皮爾遜的分析的數據結果如表4顯示，AMI患者血清H-FABP表達水平與MYO、CK-MB、cTnI水平之間顯現出正相關性（P＜0.05）。

2.4 血清H-FABP在早期心肌梗死中的診斷價值

臨床診斷結果繪制ROC曲線結果如圖1所示，分析得出血清H-FABP、cTnI、MYO、CK-MB診斷的曲線下面積（Area Under Curve，AUC）分別為0.904（95%CI：0.844-0.964）、0.839（95%CI：0.763-0.916）、0.842（95%CI：0.766-0.919）、0.728（95%CI：0.631-0.826），其中H-FABP相較下利用它的水平在早期AMI診斷中，其靈敏度、特異度均高于其他任意單個生物標志物。

圖1 H-FABP、MYO、CK-MB以及cTnI在早期心肌梗死中的診斷價值ROC曲線

3 討論

根據醫學技術水平以及醫療裝置配備的不斷快速變遷發展，不同的血液生物標記被認為是方便經濟客觀的結果預測工具[7]。心肌肌鈣蛋白的主要亞型之一的cTnI的半壽期大約為2 h，并且損傷發生時，cTnI在血液中的水平能夠保持較長時間的處于升高狀態，因此以其具有診斷窗口期長的優勢作為AMI的診斷標志物之一[8]。在心肌組織和亞細胞中有大量的CK-MB，近似于占血清中肌酸磷酸激酶（creatine kinase，CK）總量的5%以下，通常在cTnI升高后升高，特異度相對較高[9]。僅存在于心肌/橫紋肌/骨骼肌內的MYO正常人含量很少，其具有儲備和運轉肌細胞的作用，而當心肌存在障礙時，細胞中的MYO會彌漫出來進入血液循環，因此當患者發生AMI時，血清中便會檢測出MYO指標變化[10]。基于以上背景，本研究檢測了患者的這幾大特征性重要指標，發現以上幾種主要標志物的表達在心肌梗死患者血液中顯著上升（P＜0.05），但近年來研究發現，這些指標在其他疾病患者中也會增高。因此，尋找更加具體的標志物來聯合評估AMI病人的預后具有重要意義。

目前，H-FABP的表達是檢測早期和/或亞臨床心臟缺血以及炎癥水平的一個可能應用。血清H-FABP水平與ST段抬高AMI患者的梗死面積密切相關，由于這個原因它已潛在被視為心肌損傷加重的早期診斷生物標志物[11]。H-FABP的測量可以使血運重建手術及時進行，由于H-FABP和cTnI顯示不同的釋放動力學[12]，使得急診科對H-FABP的應用補充了cTnI在排除早期胸痛患者的ACS中的使用[13]。H-FABP的表達由微小RNA miR-1調節[14]。在健康個體中，H-FABP的血清水平在個位數（ng·mL-1）的范圍內[15]。在發生心肌損傷時，肌細胞里小分子量的H-FABP能夠精準定位游離的細胞質，并且利用最快的速度將自己釋放到體循環中，引起短暫的肌膜通透性增加，并發揮其關鍵作用，具備顯著的特異性。H-FABP在腎臟進行消化代謝以至最終徹底清除，這解釋了腎功能正常的患者的診斷窗較短[16]，正如KLEINE等[17]報道，在AMI患者出現癥狀后20 h內，H-FABP血漿水平恢復到基線水平，因此從長遠來看，其表達甚至可以對患有其他疾病（如心力衰竭和急性肺栓塞）的患者進行風險分層。本研究檢測結果顯示，H-FABP水平與MYO，CK-MB，cTnI呈現正相關性（P＜0.05），能夠作為一個可行的標志物為臨床早期診斷與治療提供切實有效的支持依據。