高效液相色譜法快速測定保健品中6 種人參皂苷的含量

居廣琳

（福建省產品質量檢驗研究院，福建福州 350002）

人參皂苷是人參、西洋參等人參屬植物中被證實具有增強體質、調節神經、延緩衰老及抗腫瘤等功效的有效成分[1-2]。其中人參皂苷Rg1具有調節神經系統、保護神經元細胞的作用[3]；人參皂苷Rb1具有促進神經修復，減少神經元損傷的作用[4]；人參皂苷Re 具有抑制胰島素抵抗、調節脂質代謝、抗炎的作用[5]；人參皂苷Rd 有抗氧化作用[3]；人參皂苷Rb2具有降脂降糖、調節心血管系統、維持心臟和血管正常生理功能的作用[6]；人參皂苷Rc 有抗氧化和抗炎作用[7]。本實驗以3 種保健品基質為研究對象，參照《保健食品理化及衛生指標檢驗與評價技術指導原則（2020 年版）》應用高效液相色譜法建立了快速穩定高效檢測以非人參及其加工品為主要原料的保健品中6 種人參皂苷Rb1、Rb2、Rc、Rd、Re 和Rg1含量的方法[8]。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

唐傳牌阿拉伯糖粉、力保健牛磺酸功能飲料、湯臣倍健蜂膠軟膠囊，購自市場。

人參皂苷Rb2（批號CCPE900007，純度96.0%）、人參皂苷Rc（批號CCPE900217，純度95.6%）、人參皂苷Rd（批號CCPE900216，純度95.3%）、人參皂苷Re（批號CCPE901307，純度98.7%）和人參皂苷Rg1（批號CCPE900 214，純度94.9%），均購自廣州佳途科技股份有限公司；人參皂苷Rb1（批號1ST400 41，純度98.7%），購自天津阿爾塔科技有限公司；甲醇（分析純）、乙腈（色譜純），購自山東禹王化學試劑有限公司；水為自制超純水。

1.2 儀器與設備

D3200 高效液相色譜儀，大連依利特分析儀器有限公司；KQ-500DE 數控超聲波清洗器，昆山市超聲儀器有限公司；ME204 電子天平，梅特勒托利多儀器有限公司；超純水機，美國密理博公司；多位平行濃縮儀，睿科集團（廈門）股份有限公司。

1.3 實驗方法

1.3.1 溶液的制備

標準品儲備溶液的配制：稱取人參皂苷Rb1、Rb2、Rc、Rd、Re 和Rg1標準品于同一容量瓶中，用甲醇配制成各組分濃度為9.92 mg·mL-1、10.3 mg·mL-1、9.54 mg·mL-1、9.59 mg·mL-1、9.84 mg·mL-1和9.94 mg·mL-1的標準品儲備溶液。

標準系列溶液配制：精密量取標準品儲備液1.0 mL、2.0 mL、2.0 mL、2.0 mL 和1.0 mL，置于100 mL、100 mL、50 mL、25 mL 和10 mL 容量瓶中，用甲醇稀釋并定容至刻度，搖勻，即配成人參皂苷標準系列溶液。人參皂苷標準系列溶液配制濃度如表1 所示。

表1 人參皂苷標準系列溶液配制

唐傳牌阿拉伯糖粉和力保健牛磺酸功能飲料樣品溶液的制備：稱取樣品5 g，置于50 mL 容量瓶中，加入20 mL 水溶解，超聲提取15 min 后，加20 mL甲醇繼續超聲提取15 min，放冷，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，離心，取10 mL 上清液，氮吹濃縮至1 mL 即得樣品溶液。

蜂膠軟膠囊樣品溶液的制備：按上述方法取內容物進行供試品溶液的制備。

1.3.2 色譜系統條件

色譜柱：依利特Hypersil 300? C18（250 mm×4.6 mm，5 μm）；流動相：乙腈-水，洗脫程序見表2；檢測波長：203 nm；柱溫：35 ℃；流速：1.0 mL·min-1；進樣量：10 μL。

表2 梯度洗脫程序

2 結果與分析

2.1 液相色譜圖

按1.3.2 色譜系統條件分析人參皂苷Rb1、Rb2、Rc、Rd、Re 和Rg1濃度為992.0 μg·mL-1、1 030.0 μg·mL-1、954.0 μg·mL-1、959.0 μg·mL-1、984.0 μg·mL-1和994.0 μg·mL-1時的標準溶液，基線分離較好。液相色譜圖見圖1。

圖1 標準品溶液液相色譜圖

2.2 人參皂苷Rb1、Rb2、Rc、Rd、Re 和Rg1 的線性范圍

取1.3.1 配制的人參皂苷標準系列溶液10 μL 進高效液相色譜分析，以人參皂苷濃度（μg·mL-1）為橫坐標，峰面積為縱坐標繪制標準曲線，結果見表3。

表3 人參皂苷Rb1、Rb2、Rc、Rd、Re 和Rg1 標準曲線

2.3 人參皂苷Rb1、Rb2、Rc、Rd、Re 和Rg1 的回收率

稱取供試樣品各2 份，按1.3.1 方法制備樣品溶液測定6 種人參皂苷含量，結果表明阿拉伯糖粉、力保健牛磺酸功能飲料及蜂膠軟膠囊均不含被測組分。稱取5.031 2 g、5.041 2 g、5.036 4 g、5.112 4 g、5.095 4 g、5.038 7 g、5.098 3 g、5.064 4 g 和5.046 1 g 共9 份阿拉伯糖粉，稱取5.112 4 g、5.064 2 g、5.310 2 g、5.142 1 g、5.010 6 g、5.065 4 g、5.041 5 g、5.210 4 g 和5.009 4 g 共9 份力保健牛磺酸功能飲料，稱取5.048 9 g、5.210 5 g、5.131 5 g、5.198 2 g、5.176 6 g、5.077 8 g、5.210 6 g、5.116 2 g 和5.130 2 g共9 份蜂膠軟膠囊內容物，分成3 組分別加入標準品儲備溶液30 μL、80 μL、200 μL，按1.3.1 方法制備樣品溶液，按1.3.2色譜條件進行測定，結果見表4～表6。結果表明該實驗方法有較好的回收率和精密度，回收率為82.9%～109.2%，精密度為4.0%～8.3%。

表4 測定阿拉伯糖粉中人參皂苷的回收率和精密度

表5 測定力保健牛磺酸功能飲料中人參皂苷的回收率和精密度

表6 測定蜂膠膠囊中人參皂苷的回收率和精密度

3 結論

越來越多的年輕人開始重視中醫理療養生，關注養生，因此向保健品中添加人參提取物成為趨勢。本實驗采用高效液相色譜法測定了保健品中6 種人參皂苷Rb1、Rb2、Rc、Rd、Re 和Rg1的含量，為保健品質量檢測提供了方法參考。