富硒恩施堇葉碎米薺對(duì)斷奶仔豬生長性能、血清抗氧化及免疫功能的影響

許 嘯， 王國貴， 陳瀟飛， 李 蓉， 謝駿輝，明佳佳， 殷紅清， 向極釬， 朱云芬

（1.恩施土家族苗族自治州農(nóng)業(yè)科學(xué)院，湖北 恩施 445000；2.武漢輕工大學(xué)動(dòng)物科學(xué)與營養(yǎng)工程學(xué)院，動(dòng)物營養(yǎng)與飼料科學(xué)湖北省重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，湖北 武漢 430023）

仔豬早期斷奶常常會(huì)受到日糧中抗?fàn)I養(yǎng)因子、心理壓力以及環(huán)境改變等一系列應(yīng)激，導(dǎo)致仔豬生長遲緩、 腹瀉、 機(jī)體抗氧化和免疫功能下降等， 給養(yǎng)豬業(yè)造成巨大損失 （Upadhaya 和Kim，2021）。 硒作為動(dòng)物必需微量元素之一，對(duì)機(jī)體多種生理代謝過程發(fā)揮著重要作用， 包括提高機(jī)體抗氧化能力、免疫能力以及促生長等（Meplan 和Hughes，2020）。谷物飼料原料中硒的含量很低，必須通過外源添加含硒飼料添加劑來滿足動(dòng)物對(duì)硒的需要（Suchy 等，2014）。 NRC（2012）和中國豬飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn) （2004） 推薦需要在仔豬飼糧中添加0.3 mg/kg 的硒。 當(dāng)今飼料工業(yè)中常用的硒源主要有亞硒酸鈉為代表的無機(jī)硒和酵母硒為代表的有機(jī)硒。 近些年有研究報(bào)道有機(jī)硒比無機(jī)硒有著更高的吸收率和生物活性， 可更好地提高動(dòng)物生長性能和抗氧化水平， 并可降低硒的排放從而減少環(huán)境污染（羅霄等，2015；Yang 等，2010）。

恩施堇葉碎米薺 （又稱壺瓶碎米薺，Cardamine enshiensis，或Cardamine violifolia，以下簡(jiǎn)稱碎米薺） 是一種在湖北省恩施土家族苗族自治州發(fā)現(xiàn)的具有超強(qiáng)富硒能力的十字花科植物（Yuan 等，2013）。 碎米薺可以將土壤中的無機(jī)硒轉(zhuǎn)化為有機(jī)硒，研究發(fā)現(xiàn)碎米薺硒含量可達(dá)1400 mg/kg 干物質(zhì)（Rao 等，2021）。 碎米薺的硒主要以硒代半胱氨酸 （SeCys2）、 甲基硒代半胱氨酸（MeSeCys）和蛋氨酸硒（SeMet）等有機(jī)形式存在（Both 等，2018）。 因此，碎米薺是一種很有潛力的優(yōu)質(zhì)硒源， 但是其在動(dòng)物上的應(yīng)用研究還鮮有報(bào)道。本試驗(yàn)通過比較亞硒酸鈉、酵母硒和碎米薺硒日糧對(duì)斷奶仔豬生長性能和健康水平的影響，為評(píng)價(jià)和開發(fā)新型有機(jī)硒飼料添加劑提供基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料 本試驗(yàn)使用的富硒恩施堇葉碎米薺由恩施土家族苗族自治州農(nóng)業(yè)科學(xué)院提供，硒含量為1400 mg/kg，硒形態(tài)主要以蛋氨酸硒、硒代半胱氨酸和甲基硒代半胱氨酸等有機(jī)形態(tài)存在；亞硒酸鈉購自Sigma 公司，純度＞99.9%；酵母硒購自安琪酵母股份有限公司，硒含量為2000 mg/kg。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì) 試驗(yàn)選用28 d 斷奶的杜×長×大三元雜交健康斷奶仔豬864 頭， 初始平均體重為（8.03±1.24）kg，公母各半。按照體重和性別采用完全隨機(jī)區(qū)組分為4 個(gè)處理， 每個(gè)處理12 個(gè)重復(fù)（公母各半），每個(gè)重復(fù)18 頭豬。 日糧處理組分別為：（1）對(duì)照組，無硒源添加劑的基礎(chǔ)日糧；（2）亞硒酸鈉組，0.3 mg/kg 硒來源于亞硒酸鈉+基礎(chǔ)日糧；（3） 酵母硒組，0.3 mg/kg 硒來源于酵母硒+基礎(chǔ)日糧；（4）碎米薺硒組，0.3 mg/kg 硒來源于碎米薺+基礎(chǔ)日糧。 基礎(chǔ)日糧參照NRC（2012）和中國豬飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)（2004）配制，日糧組成和營養(yǎng)水平見表1。

表1 試驗(yàn)日糧組成及營養(yǎng)水平（風(fēng)干基礎(chǔ)）

1.3 飼養(yǎng)管理 飼養(yǎng)試驗(yàn)在湖北武漢一家商業(yè)豬場(chǎng)進(jìn)行， 試驗(yàn)共28 d，1 ～14 d 為試驗(yàn)前期，15 ～28 d 為試驗(yàn)后期。 試驗(yàn)采用全進(jìn)全出飼養(yǎng)管理模式。 試驗(yàn)期控制室內(nèi)溫度在24 ～26 ℃，試驗(yàn)仔豬分欄飼養(yǎng)，飼養(yǎng)于2.5 m × 3.0 m 的圈內(nèi)，漏縫噴塑地板，不銹鋼可調(diào)式料槽，乳頭式飲水器。 顆粒料飼喂，自由采食和飲水。

1.4 測(cè)定指標(biāo)和方法

1.4.1 生長性能和腹瀉率 仔豬絕食12 h 后，于試驗(yàn)第0、14、28 天， 分別稱量仔豬個(gè)體重和每個(gè)重復(fù)的飼料重量，計(jì)算平均日增重、平均日采食量和料重比。 每天進(jìn)行糞便觀察并做好記錄。 腹瀉率計(jì)算公式如下：

1.4.2 血清抗氧化與免疫功能指標(biāo) 試驗(yàn)第14天和28 天，每欄選取1 頭體重接近該欄平均體重的仔豬，通過前腔靜脈采血，分離血清后-20 ℃保存。 檢測(cè)血清中總抗氧化能力（T-AOC）、谷胱甘肽過氧化物酶 （GSH-Px） 和超氧化物歧化酶（SOD）活性、丙二醛（MDA）水平，及免疫球蛋白A（IgA）、免疫球蛋白G（IgG）和免疫球蛋白M（IgM）的含量， 試劑盒均購于南京建成生物工程研究所（南京，中國）。

1.5 統(tǒng)計(jì)分析 以重復(fù)為統(tǒng)計(jì)單位， 采用SAS 9.3 統(tǒng)計(jì)軟件中單因素方差分析及Duncan’s 多重比較方法進(jìn)行生長性能等連續(xù)型數(shù)據(jù)資料分析，腹瀉率等百分?jǐn)?shù)資料采用卡方檢驗(yàn)，P＜0.05 表示差異顯著。

2 試驗(yàn)結(jié)果與分析

2.1 生長性能和腹瀉率 不同硒源日糧對(duì)斷奶仔豬生長性能和腹瀉率影響的結(jié)果見表2。 在試驗(yàn)前期， 各處理組仔豬的平均日增重和平均日采食量無顯著差異（P＞0.05），但碎米薺硒組仔豬的料重比顯著低于對(duì)照組和酵母硒組仔豬， 降低比例分別為8.33%和7.74%（P＜0.05）。 在試驗(yàn)后期， 碎米薺硒組仔豬的平均日增重顯著高于對(duì)照組仔豬15.97%（P＜0.05），同時(shí)，其料重比顯著低于對(duì)照組和酵母硒組仔豬， 降低比例分別為7.65%和5.59%（P＜0.05）。綜合全期來看，各處理組仔豬的平均日增重和平均日采食量無顯著差異（P＞0.05），但碎米薺硒組仔豬的料重比顯著低于對(duì)照組和酵母硒組仔豬， 降低比例分別為7.56%和5.92%（P＜0.05）。 對(duì)于仔豬腹瀉率的影響，在試驗(yàn)前期和后期， 碎米薺硒組仔豬的腹瀉率顯著低于對(duì)照組和亞硒酸鈉組（P＜0.05），而綜合全期來看，碎米薺硒組仔豬的腹瀉率顯著低于對(duì)照組、亞硒酸鈉組和酵母硒組（P＜0.05）。硒元素是動(dòng)物必需微量元素之一， 其是多種抗氧化酶和功能蛋白的活性中心，參與多種生理代謝活動(dòng)（戴五洲和鄭云林，2015）。本研究結(jié)果顯示，不同硒源日糧均可提高斷奶仔豬的生長性能和降低腹瀉率， 此結(jié)果證明了斷奶仔豬日糧中必須額外添加硒添加劑，才能滿足動(dòng)物的營養(yǎng)需要，這與前人研究結(jié)果相一致（郭永清等，2019）。此外，本研究顯示，碎米薺硒對(duì)提高生產(chǎn)性能的效果比亞硒酸鈉、 酵母硒的效果更好， 前期有研究發(fā)現(xiàn)， 日糧中添加碎米薺，可提高1 ～21 d 肉仔雞的平均日增重和降低料重比（Xu 等，2022），本研究結(jié)果與之相一致。可能的原因是碎米薺中含有的硒均以有機(jī)硒形式存在，并且與酵母硒相比，植物源的有機(jī)硒更有利于動(dòng)物吸收利用（Wu 等，2020）。

表2 不同硒源日糧對(duì)斷奶仔豬生長性能和腹瀉率的影響

2.2 血清抗氧化功能指標(biāo) 不同硒源日糧對(duì)斷奶仔豬血清抗氧化功能指標(biāo)影響的結(jié)果見表3。在試驗(yàn)第14 天，三種不同硒源處理組的仔豬血清T-AOC 和SOD 活性均顯著高于對(duì)照組仔豬（P＜0.05）；碎米薺組仔豬血清GSH-Px 活性顯著高于亞硒酸鈉組和酵母硒組仔豬， 提高比例分別為7.45%和10.18%（P＜0.05）；同時(shí)，其血清MDA 水平也顯著低于亞硒酸鈉組和酵母硒組仔豬， 降低比例分別為29.52%和31.50%（P＜0.05）。 在試驗(yàn)第28 天，碎米薺硒組仔豬血清T-AOC 顯著高于亞硒酸鈉組和對(duì)照組仔豬， 提高比例分別為64.61%和23.06%（P＜0.05）；同時(shí)，其血清GSHPx 活性顯著高于亞硒酸鈉和酵母硒組仔豬，提高比例分別為13.32%和11.29%（P＜0.05）；三種不同硒源組仔豬的血清SOD 活性顯著高于對(duì)照組（P＜0.05）； 并且， 三種不同硒源組仔豬的血清MDA 水平顯著低于對(duì)照組仔豬（P＜0.05）。 硒元素具有很強(qiáng)的生物抗氧化活性，已經(jīng)得到學(xué)術(shù)界的共識(shí)（董改香等，2019），但是碎米薺硒是否同樣可提高仔豬的抗氧化功能還鮮見報(bào)道。本研究結(jié)果顯示碎米薺硒可顯著提高斷奶仔豬血清抗氧化酶GSH-Px 活性，并可同樣降低MDA 含量。這與前人研究相一致，Zhang 等（2022）研究發(fā)現(xiàn)，碎米薺硒可提高小鼠體內(nèi)的抗氧化能力，Wei 等 （2022）報(bào)道，碎米薺硒可提高免疫應(yīng)激條件下肉雞的抗氧化性能并降低MDA 水平。 說明恩施堇葉碎米薺中的有機(jī)硒同樣可以被仔豬吸收利用，并可通過提高機(jī)體抗氧化酶活性， 來增強(qiáng)機(jī)體抗氧化和抗應(yīng)激能力，從而提高仔豬的生長性能（Zhu 等，2021）。

表3 不同硒源日糧對(duì)斷奶仔豬血清抗氧化功能的影響

2.3 血清免疫功能指標(biāo) 不同硒源日糧對(duì)斷奶仔豬血清免疫功能指標(biāo)影響的結(jié)果見表4。 在試驗(yàn)第14 天和28 天， 碎米薺硒組仔豬血清IgG 的含量均顯著高于其他三組（P＜0.05），在第14 天提高的比例分別為87.87%、50.00%和42.54%，在第28 天提高的比例分別為50.13%、37.41%和27.51%。 但各組仔豬血清IgA 和IgM 的含量差異不顯著（P＞0.05）。仔豬在斷奶后無法通過母乳獲得母源抗體， 只能通過自身的免疫系統(tǒng)獲得主動(dòng)免疫， 血清中免疫球蛋白水平可反映機(jī)體免疫水平（孟冬霞等，2020）。 IgG 是機(jī)體最主要的抗體，占總免疫球蛋白的75%以上。 本研究顯示碎米薺硒日糧可提高斷奶仔豬血清IgG 水平， 說明碎米薺可提高斷奶仔豬的免疫功能。 這與前期研究結(jié)果相一致，唐萬貴等（2018）研究發(fā)現(xiàn)，碎米薺有調(diào)節(jié)小鼠免疫力的效果。也有研究發(fā)現(xiàn)碎米薺可具有提高幼魚免疫水平的功能（張辰等，2022）。 可能的原因是碎米薺硒提高了斷奶仔豬的抗氧化功能，從而提高了仔豬的免疫力；另外，也有可能是碎米薺中還含有微量的促進(jìn)免疫功能的營養(yǎng)成分，如植物多糖、多酚、維生素等（石愛華等，2014）。

表4 不同硒源日糧對(duì)斷奶仔豬血清免疫球蛋白水平的影響g/L

3 結(jié)論

與亞硒酸鈉和酵母硒相比， 日糧中添加恩施富硒堇葉碎米薺可通過增強(qiáng)斷奶仔豬抗氧化和免疫功能，緩解腹瀉，從而提高生長性能。