醋白芍配方顆粒的制備及工藝優(yōu)化研究

白而力

(山西藥科職業(yè)學(xué)院,山西 太原 030031)

白芍是毛茛科芍藥的干根,主要分布在浙江,安徽和四川一帶,具有活血通絡(luò)、斂陰、柔肝、鎮(zhèn)靜、降肝陽明等功效,常用于治療“血虛、色黃、少汗、多汗、胸悶、腹部疼痛、肢體抽搐、頭疼頭暈”等疾病[1]。芍藥苷、芍藥內(nèi)脂、氧化芍藥苷、苯甲酰芍藥苷等統(tǒng)稱為芍藥總苷(TGP),占芍藥苷總量的70%,在臨床使用和藥理實驗的過程中發(fā)現(xiàn),顆粒劑的臨床療效和藥理反應(yīng)與傳統(tǒng)水煎劑的有效成分、臨床療效和藥理反應(yīng)基本一致,還能夠?qū)崿F(xiàn)自動化批量生產(chǎn),并且還具備了尺寸小,方便攜帶和保存,質(zhì)量穩(wěn)定、可控等優(yōu)勢[2-3]。

為了更好地對白芍進(jìn)行開發(fā),并使其更好地被應(yīng)用于臨床,研究故以現(xiàn)代工業(yè)和方法為基礎(chǔ)制備白芍配方顆粒,在對各個工序進(jìn)行篩選、優(yōu)化,并與實際的生產(chǎn)流程相結(jié)合,對其進(jìn)行最佳的生產(chǎn)工藝參數(shù),從而使其達(dá)到了產(chǎn)品的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn),從而為實現(xiàn)白芍的資源的綜合利用,為中藥顆粒制備的研究提供依據(jù)。

1 材資料與方法

1.1 儀器

凱特 TG16B臺式高速離心機(jī)(鹽城市凱特實驗儀器有限公司);Select 120型超聲清洗器(德國Elmasonic);電加熱低溫真空干燥箱(南京宇盼機(jī)械科技有限公司 );高效液相色譜儀,包括G1311A四元泵、Rev.A;0501化學(xué)工作站(賽默飛世爾科技公司)。

1.2 試藥

白芍藥片(天津中藥飲片廠,批號:030630-05);芍藥苷對照品(天津市藥品檢驗所,批號:004917);甲醇為色譜純,水為重蒸餾水,乙醇、交聯(lián)淀粉等其它試劑均為分析純。

2 白芍配方顆粒制備工藝優(yōu)化

2.1 試驗因素水平

水提正交試驗的開展因素設(shè)定為:提取次數(shù)(E)、提取時間(W)、加水量(Q)。選用L9(34)正交表,考察各參數(shù),水平結(jié)果見表1。

表1 試驗因素水平

2.2 芍藥苷提取率考察

2.2.1 供試品溶液的制備

按照正交試驗的方法,將20g的芍藥分成九組,分別加入20g的清水,用3000 r·min-1進(jìn)行回流萃取,離心5分鐘后,用布氏漏斗過濾掉上層的液體,將過濾后的液體注入到1000mL的水中,然后將過濾后的液體倒入水中,然后搖勻。用0.22μm的微孔濾膜準(zhǔn)確地提取5 mL,并將其過濾后得到的濾液。

取適量的白芍飲片,搗碎之后,稱取粉末0.1g,置于準(zhǔn)備好的50mL量瓶中,選取烯酒精35mL,置入裝有白芍飲片的量瓶中,超聲30min,放置冷卻,搖晃均勻后取濾液,可得白芍供試品溶液。

2.2.2 對照品溶液的制備

稱取芍藥苷對照品6.4mg,置入100mL量瓶中,用甲醇定容至刻度,搖勻,即得(每1mL溶液含芍藥苷0.064mg)。

2.2.3 色譜條件

色譜柱為CrosmosilC18(250mm×4.6mm,5μm),流動相為乙腈-0.1磷酸(14:86),檢測波長230nm,柱溫25℃,進(jìn)樣量10μL。

2.2.4 結(jié)果與分析

HPCL法測定9次試驗提取液和白芍飲片中藥藥苷含量,計算提取率,見表2。提取時間無明顯影響。見表3。

表2 正交試驗結(jié)果

表3 方差分析結(jié)果

2.3 得膏率考察

將九次正交實驗中得到的每一種萃取物5 mL,在60℃下進(jìn)行水浴揮發(fā),然后在60℃下進(jìn)行負(fù)壓干燥,直到重量為恒定,從而計算出得膏得率。不同的萃取條件下,萃取效率受不同的萃取頻率所影響,而不同的萃取溫度、萃取時間、添加量對萃取效率的影響不大。見表2、3。

2.4 萃取過程的優(yōu)化條件

在生產(chǎn)過程中,提取的時間是一個很重要的影響因素,通過直觀的歸納,可以得到3次的時間是最好的。添加量及萃取時間對萃取效果無明顯影響,并通過可視化歸納及費用分析,選用了A3B2。因此,以A3B2B3為最佳的萃取條件,以12倍的用量進(jìn)行萃取,每一次萃取1小時,萃取3次。

2.5 優(yōu)選提取工藝的驗證試驗

根據(jù)所述最佳方法進(jìn)行了3次檢驗,測定出的最佳方法的平均提取率和平均油膏得收率分別為86.8%和35.5%,證實了最佳方法是可信的。

2.6 白芍配方顆粒的制備

在優(yōu)化提取工藝的基礎(chǔ)上,取白芍飲片500 g,以12倍的加水量進(jìn)行微沸,回流3次,每次回流提取1h,將提取液降壓濃縮后,放置干燥可得干燥膏。將干燥后的提取液與交聯(lián)淀粉按1:1的配比添加添加劑,并以75%酒精為用量配制成軟木材。粗制藥材經(jīng)14目篩后,于60℃下真空下烘干24小時后,以1、5雙篩分取,制得白芍配方顆粒。

3 含量測定

3.1 色譜條件及系統(tǒng)適用性試驗

色譜條件:色譜柱為CrosmosilC18(250mm×4.6mm,5μm),流動相為乙腈-0.1磷酸(14:86),檢測波長230nm,柱溫25℃,進(jìn)樣量10μL。芍藥苷分離色譜見圖1。

圖1 高效液相色譜

3.2 對照品溶液的制備

選用100mL的量瓶備用,并取芍藥苷對照品6.4mg置入量瓶中,用甲醇定容至刻度,搖勻,得對照品溶液(每1mL溶液含芍藥苷0.064mg)。

3.3 供試品溶液的制備

白芍配方顆粒研磨成粉,稱取0.2g,選取25mL量瓶,將白芍配方顆粒置入,并加入乙醇30%,超聲30min后,等待冷卻,與乙醇30%定容后,均勻搖晃后進(jìn)行過濾,取過濾液,可得。

3.4 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制

將芍藥苷對照品溶液分別吸取2、4、6、8、10μL,均吸取三次,并置入液相色譜儀,經(jīng)測定橫坐標(biāo)(X)為芍藥苷的含量,繪制曲線圖,可得出芍藥苷的取值范圍在0.128—0.640μg,含量與峰值呈線性關(guān)系,回歸方程為Y=798153x-620.8(r=0.9998)。

3.5 精密度試驗

取對照品溶液,進(jìn)樣5μL,分別測定進(jìn)樣5次,記錄峰面積。結(jié)果,相對標(biāo)準(zhǔn)差(RSD)為0.036%(n=5)。

3.6 加樣回收率試驗

以“3.3”的供試品溶液制備方法為準(zhǔn),樣品中芍藥苷的含量從高到低依次是:120%、100%、100%、80%、80%,依次將配置好的標(biāo)準(zhǔn)品溶液加入其中,定容后檢測芍藥苷的含量。見表4。

表4 加樣回收率試驗結(jié)果

3.7 樣品含量測定

稱白芍配方顆粒0.2g,分為3批次,分析芍藥苷含量。結(jié)果見表5。

表5 樣品含量測定結(jié)果

4 討論

多數(shù)文獻(xiàn)采用的提取溶劑大都是濃度不同的乙醇,進(jìn)而優(yōu)化白芍的提取,而且芍藥苷的提取率也很高[4]。但是,鑒于顆粒是一種與傳統(tǒng)湯藥相比而開發(fā)的新型制劑,因此,作者采用了水為提取溶劑,其中的芍藥苷的提取率超過85%,得膏率超過35%。這樣不僅可以在保持處方微粒中有效成分的前提下,最大限度地保存其他可溶于水的組分,是一種較為適宜的提取工藝[5]。

在很多正交實驗中,如果存在兩個評價目標(biāo),通常采用兩個目標(biāo)權(quán)重打分的方式來選擇最優(yōu)的生產(chǎn)過程,這種方式在兩個目標(biāo)的變動趨勢不相同時,更加顯示出其優(yōu)勢[6-7]。然而,由于《中國藥典》[8]所載中藥有效組分與整體浸出液(膏劑)在中藥功效上的差異,二者在中藥功效上的優(yōu)劣并無統(tǒng)一的依據(jù),因此,其在中藥功效上的優(yōu)劣還有待進(jìn)一步研究[9]。結(jié)果顯示:芍藥方?jīng)_劑是一種穩(wěn)定可行的制劑,其評價指標(biāo)是合理可靠的,可為臨床應(yīng)用奠定基礎(chǔ)。

相較于傳統(tǒng)中藥制劑,中藥配方顆粒的特點在于質(zhì)量佳、攜帶便利、給藥快,因此臨床應(yīng)用價值更高。白芍屬于臨床常用的一味中藥,本次研究故對針對白芍配方顆粒的制備及優(yōu)化進(jìn)行探究,通過白芍配方顆粒制備工藝優(yōu)化、含量測定等方式,白芍配方顆粒與4%的水混合,壓力位10MPa,轉(zhuǎn)速為120r/min,可制備出白芍配方顆粒[10-11]。

通過分析我們發(fā)現(xiàn),在干法制粒的工藝中,對成品有很大的影響的是原料的水分含量,也就是說,如果水分含量太高,就很可能會產(chǎn)生粘結(jié)輥的現(xiàn)象,從而會對制粒機(jī)的壓胚片的均勻性造成一定的影響,還會導(dǎo)致顆粒的硬度不均勻,從而對最后的顆粒得率造成一定的影響。在擠出的過程中,如果壓力過低,那么很可能會造成胚體易松散,制造成細(xì)粉過多等現(xiàn)象的出現(xiàn)。如果壓力過大,那么就會造成胚體硬度過高,不容易被打破,但是顆粒過大,很難達(dá)到18～40目的要求,對顆粒得率產(chǎn)生影響[12]。擠出的速度指的是混合粉末在兩個輥子中被壓縮的時間,太少的話,很可能會使種子變得疏松,太多的話,就會使種子變得堅硬,從而影響到最后的產(chǎn)量[13-14]。

通過本項目的研究,獲得了高粒度、高品質(zhì)、低含水量的配方顆粒,為工業(yè)規(guī)模化生產(chǎn)提供依據(jù)。優(yōu)選提取工藝:A3B2B3,加水量為12倍,1h提取1次,共提取3次,采用此方法所得到的白芍配方顆粒含量高,粒形良好,對芍藥活性物質(zhì)的影響小,且技術(shù)穩(wěn)定,切實可行,為其產(chǎn)業(yè)化應(yīng)用奠定基礎(chǔ)。