獸用化學藥品注冊檢驗中常見問題分析

張秀英,彭文繡,馬秋冉,戴 青,趙富華,王 雷,張存帥

(中國獸醫(yī)藥品監(jiān)察所,北京 100081)

申請新獸藥注冊應當進行復核檢驗,包括樣品檢驗和獸藥質量標準復核[1],這是新獸藥注冊過程中的一個重要環(huán)節(jié)。新獸藥通過初審,認為建立的質量控制方法可行,方法學驗證資料完整可靠后,申請人應向中國獸醫(yī)藥品監(jiān)察所提供獸藥復核檢驗所需要的有關資料和樣品進行復核檢驗。但是由于標準制定不完善或者樣品存在問題,常導致復核檢驗無法進行或檢驗不合格,因此即使通過了資料審查的注冊申請最終也只能退審。這里針對化學藥品注冊檢驗中一些常見問題進行分析,以期對注冊申請有所幫助,更好地保證注冊檢驗的質量。

1 命名問題

新獸藥一般來說均應按照藥品通用名稱來進行命名,但還是有不少申報單位按照俗稱來進行命名,造成獸藥通用名稱與國際上的藥物名稱不一致。如獸藥促黃體素釋放激素A2和促黃體素釋放激素A3,在國際上分別稱為醋酸丙氨瑞林和醋酸曲普瑞林,這樣命名后造成長期以來獸藥名稱與國際不同步,也容易引起誤解,一旦既成事實,很難一下糾正過來。藥物存在不同異構體,在名稱上也應該明確標示出來,如甲氧普烯,實際使用的活性成分為S-甲氧普烯,命名和質量標準中應注意寫明,而不是簡單命名為甲氧普烯。對于有些藥物帶有鹽基,命名中也應明確體現(xiàn),如鹽酸四環(huán)素,如果命名為四環(huán)素就不合適,也無法在標準中規(guī)定需進行鹽基的鑒別。

2 外觀性狀的描述問題

原料藥的外觀性狀應注意是結晶還是粉末,這需要在標準中明確體現(xiàn)出來。如果該原料藥有引濕性,申報單位應按“獸藥引濕性試驗指導原則”進行試驗后,按實際測定結果在標準中寫明。需要注意的是,由于每家企業(yè)原料藥的生產(chǎn)工藝和結晶工藝并不相同,申報單位不能盲目照抄同品種標準引濕性的規(guī)定。對于原料的溶解性,不建議設置很多溶劑的規(guī)定,建議使用生產(chǎn)和檢驗中常用的3～4種溶劑即可,且應避免使用毒性較大的試劑進行溶解性測定。溶解性的規(guī)定還應結合其他因素,如激素類產(chǎn)品,考慮到價格昂貴、不易獲得,考察2個溶劑的溶解性也是可以的。考察盡可能多的溶劑雖然可以更好地反映出藥物的性質,但有時并無必要,反而可能會造成檢驗不合格。對于在不同溫度下有多種物理形態(tài)的藥物,一定要對其各種形態(tài)的顏色、晶型等分別說明,而不能只描述出一種形態(tài),而對其他物理形態(tài)不予表述,可能會造成在不同溫度下由于未描述全面而導致檢驗不合格。

制劑的顏色應結合生產(chǎn)工藝中所用的原輔料的顏色、生產(chǎn)工藝對顏色的影響和貯存過程中顏色的變化來確定,不能僅根據(jù)出廠時特定條件下樣品的顏色來制定。如某溶液產(chǎn)品標準中規(guī)定為淡藍色澄清液體,第一次送樣檢測時為淡藍色,第二次再檢又成了粉紫色,查找原因是處方中添加了顯色劑,放置過程中隨著pH的變化,顏色隨之發(fā)生改變,這就需要結合工藝驗證和持續(xù)穩(wěn)定性考察情況來確定合適的標準。

3 紅外鑒別問題

對于純度達到90%以上的組分單一、結構明確的化合物設置紅外鑒別才有意義,如果是多組分化合物,不建議采用該項鑒別。紅外鑒別可采用與對照圖譜或對照品圖譜進行比較的方法。采用與對照品圖譜比較時,對照品應與申報成分性質相同,不能簡單采用含量測定的標準物質。如泰地羅新,含量測定應采用穩(wěn)定的晶型化合物,但由于該申報產(chǎn)品是無定形粉末,那紅外測定就必須采用與申報成分一樣的無定形對照品。對于具有同質異晶現(xiàn)象的藥品,應選用有效晶型的圖譜;晶型不一致需要轉晶的,應規(guī)定轉晶條件。檢驗時會核對樣品與對照品圖譜或對照圖譜的區(qū)別,有時會出現(xiàn)特征峰相同,但一些非特征峰不一致的情形,此時建議申報單位應用相同的條件精制后再進行測定。

4 X射線衍射法鑒別問題

由于儀器的限制,該方法目前在質量控制中還不常用,但對于存在不同晶型的藥物還是有必要進行該項鑒別。X射線衍射法包括單晶X射線衍射法和粉末X射線衍射法兩種,目前常采用后者。粉末X-射線衍射法適用于對晶態(tài)物質或非晶態(tài)物質的定性鑒別與定量分析,常用于固體物質的結晶度定性檢查、多晶型種類和晶型純度分析。每種化學物質,當其化學成分與固體物質狀態(tài)(晶型)確定時,應該具有獨立的特征X射線衍射圖譜和數(shù)據(jù),衍射圖譜信息包括衍射峰數(shù)量、衍射峰位置(2θ或d值)、特征峰強度 (相對強度、絕對強度)、衍射峰幾何拓撲(不同衍射峰間的比例)等[2]。在測定方法中應規(guī)定樣品制備方法、X射線測定條件、定性分析時應明確特征峰位置要求(如衍射角2θ分別約為5.8°、19.8°)。但企業(yè)在申報時常與紅外鑒別一樣表述,寫成供試品與對照品的圖譜應一致,這樣可能導致由于對照品與供試品圖譜除特征峰一致外,還存在其他差異,從而造成結果無法判定。

5 多組分控制問題

抗生素產(chǎn)品常為多組分,如慶大霉素、替米考星、伊維菌素等,對于多組分產(chǎn)品均應設置組分檢查項,如《中國獸藥典》中替米考星組分檢查項規(guī)定為:在含量測定項下記錄的供試品溶液色譜圖中,替米考星順式異構體峰面積與替米考星反式異構體峰面積分別應為替米考星順式異構體與反式異構體峰面積和的82.0%～88.0%與12.0%～18.0%。這樣規(guī)定就對每個組分的質量控制非常明確,但是在同樣為多組分的泰拉菌素申報資料中,卻對多組分控制方法在標準中寫的五花八門,有的不控制組分,有的只在含量測定項下寫了2個組分的比例要求,但計算方法又不寫明確,不能確定是按峰面積歸一化法計算,還是按外標法計算,導致注冊檢驗無法進行下去。

6 有關物質問題

該項檢查問題最多。如雜質代號混亂,標準中雜質采用企業(yè)的代碼,而不是按標準制定要求依次規(guī)范為雜質A、B、C……;在標準中研究資料不充分的前提下盲目規(guī)定保留時間或相對保留時間,導致更換高效液相色譜儀、色譜柱或者在不同時間測定,保留時間或相對保留時間不能與標準中規(guī)定的一致;有些進口注冊標準羅列了很多雜質,不僅明確了各雜質相對于主峰的保留時間,而且相對保留時間規(guī)定至小數(shù)點后兩位,實際測定時色譜峰無法與標準規(guī)定一一對應,因此檢測中由于雜質峰相對保留時間偏離而認定為其他不需控制的雜質,對各個特定雜質控制標準形同虛設。其他常見問題還有對分離度不進行控制或要求過高、計算方法同時寫外標法和自身對照法、計算公式畫蛇添足盲目寫上后出現(xiàn)的與操作不對應、采用自身對照法時搞不清樣品是否需要精密稱定、質量標準中不寫明需要扣除輔料峰或溶劑峰等問題,導致無法按標準進行檢驗。由于藥物中的有關物質是與生產(chǎn)工藝緊密相關的,生產(chǎn)工藝不同,同一品種藥物的有關物質也可能會不一樣,因此有關物質檢查方法不能千篇一律照搬國外標準或國內(nèi)已有的標準,必須根據(jù)自身生產(chǎn)工藝確定測定方法和控制的已知雜質。

7 無菌檢查和微生物限度檢查問題

經(jīng)常出現(xiàn)在標準中只寫按附錄方法進行測定,但不明確寫明供試品處理方法和測定方法的情形。由于樣品性質不同、處理方法不同,附錄中測定方法也有多種,如直接加入法、薄膜過濾法等,因此申報的質量標準中需要根據(jù)自身的方法學驗證結果明確必要的操作和要求,而不能只表述一句話“按附錄方法進行測定”,導致復核檢驗時無法操作。無菌檢查時對于供試品的數(shù)量和取樣量在獸藥典附錄中有明確的規(guī)定,標準中不需要再寫出數(shù)量,除非另有特殊要求,否則有時反而會造成規(guī)定的供試品的數(shù)量等不能滿足附錄的相關規(guī)定。微生物限度檢查中供試品的最大稀釋倍數(shù)不能超過相應規(guī)定,如規(guī)定需氧菌不得過102cfu時,如果供試品溶液稀釋了1000倍,則超過了檢測限,這是申報中常見的問題,造成結果為假合格。此外,有一些申報標準中對控制菌檢查不做預培養(yǎng),這樣由于控制菌本身就數(shù)量極少,在貯存或生產(chǎn)過程中有可能已經(jīng)受到損傷,如果不進行預培養(yǎng)使細菌充分恢復但不增殖,那控制菌就無法有效檢出,這些問題將導致檢驗出現(xiàn)假結果。

8 質量標準的規(guī)范性問題

這是申報注冊標準中存在的普遍問題。申報要求注冊檢驗標準應按《中國獸藥典》格式進行規(guī)范表述,因此每一個標準均應體現(xiàn)質量標準的整體性、嚴謹性、科學性和簡潔性,一個好的質量標準應能充分地反映產(chǎn)品的特性、工藝生產(chǎn)水平、產(chǎn)品特點,直接體現(xiàn)研發(fā)企業(yè)的質量控制水平。中國獸藥典委員會編制了《中國獸藥典工作手冊》,對每個檢查項均有相應例子參考,質量標準的編寫也可參考獸藥典上的具體標準,總體要求從檢測項目的排序、內(nèi)容的完整性、語言表述的規(guī)范性等均需與獸藥典表述一致。實現(xiàn)標準的規(guī)范性需要標準起草人員付出大量努力,并在理解每一項檢驗操作的基礎上進行編寫,體現(xiàn)了標準起草人員的業(yè)務水平、文字規(guī)范水平和細心耐心程度。上述問題也是標準不規(guī)范的體現(xiàn),這里不一一贅述。質量標準起草不好,即使方法研究做好了,但由于表述問題常導致標準內(nèi)容無法理解而使檢驗無法進行。除上述問題外,在殘留溶劑、含量測定等方面也常常會出現(xiàn)一些其他問題。

綜上所述,申報單位提交的用于注冊檢驗的質量標準存在的問題很多,可以概述為以下三個方面:一是研究不充分,制定的方法和標準限度不適宜;二是對方法的理解不到位,制定的標準不適用;三是標準起草水平不足,標準執(zhí)行性差。此外,還有一些其他不該出現(xiàn)的問題,如提交的樣品不穩(wěn)定、起草標準馬虎、描述內(nèi)容不完整等。對于申報單位來說,前三點可能是水平問題可以理解,后面的其他問題完全是可以通過努力避免的,希望申報單位在提交標準時一定要反復核對,避免出現(xiàn)此類不必要的問題,給注冊帶來困擾。