血清TBIL、CCL18與非小細胞肺癌臨床病理特征的相關性

徐道輝 林靚宇

1 邵武市立醫院病理科,福建省邵武市 354000; 2 浙江鼎晶醫學檢驗有限公司

肺癌是起源于肺部支氣管上皮細胞和肺泡細胞的惡性腫瘤,近年來,肺癌的發病率和死亡率居高不下,已對人們的生命安全構成巨大威脅。其中非小細胞肺癌(NSCLC)占80%～85%。NSCLC患者的5年生存率僅為17%[1]。NSCLC患者早期癥狀不明顯,導致許多患者發現腫瘤時已發展為中晚期,因此,NSCLC的早期診斷對于治療方案的選擇具有重要價值。血清膽紅素(TBIL)作為血紅素分解途徑最終產物,臨床多用其濃度水平來判斷肝臟疾病的發生與發展。膽紅素已經被證實了能夠誘導細胞凋亡,阻止腫瘤細胞生長[2],但其是否與非小細胞肺癌的病理特征相關尚無確切定論。CC家族趨化因子配體18(CCL18)作為CC家族趨化因子配體成員之一,其CC家族趨化因子配體多個成員被證明與非小細胞肺癌相關,例如CC家族趨化因子配體3、20、5等[3]。但臨床上關于CC家族趨化因子配體18與NSCLC關系的研究相對較少。因此,為了豐富NSCLC的發生、發展、遷移的生物學指標,本研究探討了TBIL、CCL18與NSCLC臨床病理特征的相關性,具體報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取我院2020年2月—2022年12月收治的86例NSCLC患者作為研究對象,將其作為惡性組,選取同期來我院治療的良性肺腫瘤患者86例作為良性組,另選取同期來我院體檢的86名健康者作為對照組。三組受檢者一般資料對比無明顯差異(P>0.05),具有可比性,見表1。本研究經我院倫理委員會批準。

表1 三組一般資料比較

1.2 選擇標準 (1)納入標準:①所有患者經病理學診斷確診為NSCLC[4],且均為初診患者;②年齡≥18歲;③臨床資料完整;④對本研究知情并簽署同意書。(2)排除標準:①合并其他惡性腫瘤患者;②心電圖檢查異常患者;③臨床資料不全者;④合并嚴重心臟病及糖尿病史;⑤合并腹腔積液或水腫者;⑥預計生存期<3個月者。

1.3 方法 TBIL檢測方法:采取患者清晨空腹靜脈血3ml,以3 000r/min的速度離心15min后收集上層清液冷凍保存,應用全自動生化分析儀(生產企業:南京建成生物工程研究所;型號:Beckman Coulter AU5821)及配套試劑檢測TBIL表達水平,檢測步驟嚴格依照試劑盒(生產企業:北京雙鶴生物科技有限公司)說明書進行。CCL18檢測方法:應用免疫組化監測NSCLC患者的腫瘤組織、良性腫瘤患者的腫瘤組織以及健康者的肺組織中CCL18表達水平,具體方法為:主要應用免疫組織化學原理,免疫組織化學主要是應用抗體特異性與抗原結合原理,利用化學反應標記抗體顯色劑顯色之后確定組織細胞之內的抗原,并對其進行定量、定性和定位研究。CCL18免疫組織的評價標準應用強陽性=3,中等強度陽性=2,弱陽性=1,陰性=0;而陽性細胞百分比>89%=3,60%～89%=2,30%～59%=1,<29%=0,最后MARCKS和HER2>4為陽性,MARCKS和HER2≤4為陰性。

1.4 觀察指標 收集所有入選者一般臨床資料和病理特征,其中包括性別、年齡、TNM分期、淋巴結浸潤、遠處轉移、腫瘤大小、組織分化程度。

2 結果

2.1 三組受檢者TBIL、CCL18表達水平對比 三組受檢者TBIL、CCL18水平對比差異顯著,惡性組患者CCL18陽性率高于良性組和對照組,TBIL表達水平明顯低于良性組和對照組(P<0.05),見表2。

表2 三組受檢者TBIL、CCL18表達水平對比

2.2 不同臨床病理特征NSCLC患者TBIL水平、CCL18陽性率對比 TBIL、CCL18在不同性別、不同年齡、不同腫瘤直徑患者中表達無明顯差異(P>0.05),TBIL表達水平在TNM分期為Ⅲ～Ⅳ期、有淋巴結浸潤、有遠處轉移、低分化的NSCLC患者中表達水平分別低于TNM分期為Ⅰ～Ⅱ期、無淋巴結浸潤、無遠處轉移、中/高分化的患者(P<0.05);CCL18在TNM分期為Ⅲ～Ⅳ期、有淋巴結浸潤、有遠處轉移的NSCLC患者中陽性率分別高于TNM分期為Ⅰ～Ⅱ期、無淋巴結浸潤、無遠處轉移的患者(P<0.05)。見表3。

表3 不同臨床病理特征NSCLC患者TBIL水平、CCL18陽性率對比(n=86)

2.3 TBIL、CCL18與NSCLC患者病理特征的相關性分析 Spearman相關分析顯示,性別、年齡、腫瘤直徑與TBIL和CCL18不相關(P>0.05),TNM分期、淋巴結浸潤、遠處轉移與TBIL呈顯著負相關,組織分化程度與TBIL呈顯著正相關(P<0.05),TNM分期、淋巴結浸潤、遠處轉移與CCL18呈顯著正相關(P<0.05),見表4。

表4 TBIL、CCL18與NSCLC患者病理特征的相關性分析

3 討論

本研究結果顯示,惡性組患者CCL18陽性率高于良性組和對照組,TBIL表達水平明顯低于良性組和對照組(P<0.05)。膽紅素屬于強氧化劑,在人體內無法長存,在短時間內就會被機體消耗。因此,膽紅素水平也是影響肺癌發生的重要因素之一,較低水平的膽紅素可能會增加肺癌發生率,對于肺癌患者的病情也具有重要影響。另外,膽紅素和氧自由基結合不如未結合膽紅素緊密,其抗氧化性作用顯著低于未結合膽紅素[5]。因此膽紅素在肺癌發生過程發揮重要抗氧化作用,但是其對于白細胞所產生的抗氧化作用需要在濃度較高的水平下才能夠完成,因而肺部惡性腫瘤患者機體TBIL水平明顯低于良性患者及健康人群。而CCL18作為人類骨髓細胞產生的趨化因子之一,也是炎癥過程和免疫學重要的分子組分,參與腫瘤微環境重塑,因此惡性組患者CCL18陽性率明顯高于其他組患者[6]。

本研究結果表明,TBIL表達水平在TNM分期為Ⅲ～Ⅳ期、有淋巴結浸潤、有遠處轉移、低分化的NSCLC患者中表達水平分別低于TNM分期為Ⅰ～Ⅱ期、無淋巴結浸潤、無遠處轉移、中/高分化的患者(P<0.05);CCL18在TNM分期為Ⅲ～Ⅳ期、有淋巴結浸潤、有遠處轉移的NSCLC患者中陽性率分別高于TNM分期為Ⅰ～Ⅱ期、無淋巴結浸潤、無遠處轉移的患者(P<0.05),Spearman相關分析顯示,性別、年齡、腫瘤直徑與TBIL和CCL18不相關(P>0.05),TNM分期、淋巴結浸潤、遠處轉移與TBIL呈顯著負相關,組織分化程度與TBIL呈顯著正相關(P<0.05),TNM分期、淋巴結浸潤、遠處轉移與CCL18呈顯著正相關(P<0.05)。有研究發現[7],腫瘤細胞中過氧化氫酶的活性和數量對氧化劑清除作用具有明顯影響,同時過氧化氫酶活性減弱和數量減少還會導致機體內氧自由基的增加。因此血清過氧化氫酶活性對腫瘤分期具有一定預測價值,可間接作為腫瘤檢測的一個標志物類型[8]。然而未結合膽紅素氧自由基清除能力較強,多項研究發現,在惡性腫瘤中膽紅素對于其轉移具有抑制作用[9]。膽紅素可通過清除體內自由基來發揮出抗氧化作用,其機制為在血紅素加氧酶作用下膽紅素變位為膽綠素,隨后通過還原酶作用提供2個氫原子,轉化為白蛋白,結合膽紅素后完成抗氧化作用。因此,血清膽紅素與惡性腫瘤的發生與轉移可能具有一定相關性,也包括非小細胞肺癌。這主要是因為,腫瘤本質上屬于基因異常所引起的疾病之一,由于環境及各種遺傳致癌因素協同或者序貫所導致的DNA突變,激活滅活抑癌因子和原癌基因,再加上調節細胞凋亡基因與DNA修復基因的變化,引起基因表達水平異常,其中包括相關蛋白和RNA的表達異常,促使細胞發生轉化[10]。而被轉化的細胞呈現出多克隆增生性質,依照腫瘤生物特征,經過多個階段演化,可能伴隨進一步突變,轉化為永生化細胞,獲得轉移和浸潤生長的能力,最終形成惡性腫瘤[11]。NSCLC的發生也不例外,屬于多基因改變的結果,在這個過程中也包括基因的表達通路和表達量的改變。而CCL18主要由樹狀細胞、巨噬細胞或單核細胞分泌,位于CC-chemokine 基因簇染色體 17q11.2 位點。多項研究發現[12],許多腫瘤細胞獲得轉移和浸潤生長能力之后,CCL18表達會呈現明顯變化,其中包括前列腺癌、乳腺癌等疾病。因此本研究結果也與其他研究具有一定相似性。

綜上所述,非小細胞肺癌患者中TBIL多呈低水平、CCL18多呈陽性表達,且與患者TNM分期、淋巴結浸潤、遠處轉移、組織分化程度病理特征存在明顯相關性。