G4-RKD患者血清sFLC、LAMP-2及NGAL表達水平與病程發展及腎功能的相關性

喬玲

（新鄉和平醫院檢驗科，河南 新鄉 453002）

IgG4相關性疾病（IgG4-RD）是一種以纖維炎性病變為主的系統性自身免疫性疾病，可累及全身多處組織及器官[1]。IgG4相關性腎病指的是IgG4-RD累及腎臟，可分為IgG4相關的小管間質性腎炎（IgG4-TIN）和IgG4相關的膜性腎病（IgG4-MN）兩類，以IgG4-TIN最為常見。IgG4-TIN的發病機制尚未完全明確[2]。

臨床主要以免疫球蛋白增高、外周血嗜酸性粒細胞增多及低補體血癥等實驗室檢查結果對IgG4-TIN進行診斷。血清游離輕鏈（sFLC）的代謝主要依靠腎臟，其表達水平會隨著腎功能的改變而改變[3]。溶酶體相關膜蛋白2（LAMP-2）是一種主要表達與中性粒細胞和內皮細胞之中的糖蛋白，在血管炎的活動中起著極為重要的作用。LAMP-2水平在腎小球腎炎患者中顯著升高。中性粒細胞明膠酶相關脂質運載蛋白（NGAL）是一種急性腎損傷標志物，可有效反映患者的腎功能損傷程度[4]。

現階段關于sFLC、LAMP-2及NGAL的研究大多集中于分析其與腎功能改變的聯系，鮮少研究其與腎功能指標及病情發展的相關性。

基于此，本研究分析sFLC、LAMP-2及NGAL在IgG4-RKD 患者血清中的表達水平，探究其與病程發展和腎功能的相關性。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2019年2月～2021年2月我院收治的94例IgG4-RKD患者（κ型51例，λ型43例）設為觀察組。選擇50例同期于我院行健康體檢者作為對照組。

其中，觀察組中男性53例，女性41例，平均年齡為（62.18±14.09）歲；對照組中男性28例，女性22例，平均年齡為（61.89±13.74）歲。兩組的一般資料無統計學差異（P＞0.05）。

均知曉該研究方案且簽署同意書，我院倫理委員會已批準本研究開展。

納入標準：均符合2015年中國中西醫結合學會腎臟疾病專業委員會匯編的《IgG4相關小管間質性腎炎的篩選及診斷標準的分析》[5]中關于IgG4-RKD的相關診斷標準；均伴有不同程度尿液或腎功能檢查異常；未服用影響腎功能指標的相關藥物；患者及其家屬均簽署知情同意書。

排除標準：排除合并神經系統疾病；排除伴有肝、腎功能不全；合并其他惡性腫瘤；臨床資料不全；無法配合研究。

1.2 方法

1.2.1 血清指標檢測

采集5 mL肘靜脈血，離心后分離血清，采用免疫散射比濁法檢測血清游離羥鏈（sFLC），檢測儀器采用IMMAGE800全自動免疫散射濁度儀，由美國Beckman公司生產。SFLCκ、λ檢測試劑盒由美國The Binding Stie公司（Freelite TM）提供。通過酶聯免疫法（ELISA）檢測溶酶體相關膜蛋白2（LAMP-2）、中性粒細胞明膠酶相關脂質運載蛋白（NGAL）水平。LAMP-2試劑盒購自南京凱基生物科技有限公司，NGAL檢測試劑盒由美國R&D公司提供。所有檢測操作均嚴格按照說明書執行。

1.2.2 腎功能檢測

應用美國雅培Gi6200全自動生化分析儀測定血肌酐（Scr）、血尿素氮（BUN）水平，并評估24h尿蛋白定量。所有檢測操作均嚴格按照說明書執行。

1.3 統計學方法

本采用spss19.0進行數據分析，以[n(%)]表示計數資料，行χ2檢驗，以（±SD）表示計量資料，行t檢驗，采用person相關性分析法分析偏態分布資料及等級資料相關性，P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 各組血清游離輕鏈（SFLCκ、λ）結果及比值比較

κ型IgG4-RKD患者sFLCκ水平和SFLCκ/λ比值均顯著高于對照組，λ型IgG4-RKD患者sFLCκ、sFLCλ水平較對照組明顯偏高，SFLCκ/λ比值顯著低于對照組，詳見表2。

表1 不同型別IgG4-RKD患者sFLC檢測結果比較（±SD）

表1 不同型別IgG4-RKD患者sFLC檢測結果比較（±SD）

分組 例數 sFLCκ(mg·L-1) sFLCλ(mg·L-1) SFLCκ/λ IgG4-RKDκ型 51 134.03±87.12 13.72±3.65 8.11±6.79 IgG4-RKDλ型 43 25.87±12.98 159.33±76.53 0.11±0.34對照組 50 7.44±9.34 14.01±12.87 0.26±1.13 F 84.238 176.602 61.396 P 0.000 0.000 0.000

表2 兩組血清LAMP-2及NGAL表達水平比較（±SD）

表2 兩組血清LAMP-2及NGAL表達水平比較（±SD）

分組 例數 NCAL(μg·L-1) LAMP-2(μg·L-1)對照組 50 97.48±14.21 6.93±1.34觀察組 94 169.26±20.78 29.78±5.47 t 21.843 29.034 P 0.000 0.000

2.2 血清LAMP-2及NGAL水平比較

觀察組血清LAMP-2及NCAL水平均顯著高于對照組（P＜0.05）。詳見表3。

表3 不同程度腎功能損傷者血清sFLC、NACL、LAMP-2水平及腎功能指標比較（±SD）

表3 不同程度腎功能損傷者血清sFLC、NACL、LAMP-2水平及腎功能指標比較（±SD）

指標 輕度(n=28) 中度(n=47) 重度(n=19) F P sFLCκ(mg·L-1) 18.92±5.13 69.12±11.09 1877.41±237.44 2256.694 0.000 sFLCλ(mg·L-1) 16.53±5.12 38.98±6,73 22.54±4.17 144.053 0.000 sFLCκ/λ 1.83±0.25 1.97±0.18 1.85±0.21 4.737 0.011 NCAL(μg·L-1) 135.47±17.33 159.23±18.18 184.29±20.14 44.662 0.000 LAMP-2(μg·L-1) 7.18±1.27 15.22±3.48 44.73±5.86 640.57 0.000 Scr(μmol·L-1) 150.48±12.24 173.45±27.47 196.49±30.12 20.162 0.000 BUN(μmol·L-1) 17.48±3.13 22.11±3.06 27.84±3.17 63.331 0.000 24 h尿蛋白定量(g·24h-1) 153.24±13.17 176.38±28.15 194.76±31.08 15.909 0.000

2.3 不同程度腎功能受損患者血清sFLC、NACL、LAMP-2水平及腎功能對比

不同程度腎功能受損患者血清sFLC、NACL、LAMP-2水平及腎功能指標水平之間均存在顯著差異（P＜0.05）；重度腎功能損傷患者血清sFLCκ、NCAL、LAMP-2、Scr、BUN及24 h尿蛋白定量水平均較輕度、中度腎功能損傷患者偏高（P＜0.05）；中度腎功能損傷患者sFLCλ水平及sFLC κ/λ比值均高于輕、重度患者（P＜0.05）。詳見表4。

表4 IgG4-RKD患者病程發展的多因素分析

2.4 各指標間相關性分析

IgG4-RKD患者中，sFLCκ、sFLCλ、sFLCκ/λ與eGFR呈負相關；與Scr、BUN之間無相關性；LAMP-2與IgG4-RKD患者Scr、BUN水平及24 h尿蛋白呈正相關；NGAL水平與Scr、BUN、24 h尿蛋白水平均呈正相關。

2.5 影響IgG4-RKD患者病程發展的相關因素分析

logistic多元回歸分析顯示，LAMP-2及NGAL均是影響IgG4-RKD患者病程發展及腎功能損傷的獨立危險因素，sFLCκ/λ是風險因素但無法作為獨立預測參考指標。

見表5。

3 討論

IgG4-RD是近年來新發現的一種病因不詳的慢性免疫疾病。IgG4-RD累及腎臟器官引發相關的腎臟病變被統稱為IgG4-RKD。IgG4-RKD的發病機制尚未完全明確，臨床研究已證實IgG4-RKD治療的開始時間與療效優劣有著緊密的聯系[1,2]。由此可見，積極探索特異性、敏感性更高的診斷指標對改善疾病的預后有著積極的意義。

免疫球蛋白重鏈類型可分為IgA、IgE、IgM、IgD、IgG型，輕鏈只有κ和λ型[1,2]。正常的狀態下，人體血清中κ/λ通常保持在2；1，正常人尿液中也不會存在過多輕鏈，一旦出現過量uFLC，則表明腎小管重吸收功能下降或受損[1,2]。

本研究結果顯示，重度腎功能損傷患者血清sFLCκ水平均較輕度、中度腎功能損傷患者偏高，中度腎功能損傷患者sFLCλ水平及sFLCκ/λ比值均高于輕、重度患者。結合兩種類型患者sFLC κ/λ水平與對照組患者之間的關系，推測κ型IgG4-RKD患者κ型輕鏈增生明顯，λ型IgG4-RKD患者存在兩種輕鏈增生，且λ型增生幅度更大。相關性分析結果顯示，sFLCκ、sFLCλ、sFLCκ/λ與eGFR呈負相關，與Scr、BUN之間無相關性。sFLCκ/λ是風險因素但無法作為獨立的預測參考指標。

LAMP-2在慢性腎小球腎炎患者血清和尿液中的表達水平顯著升高，且血液和尿液中的LAMP-2是抗中性粒細胞胞質抗體（ANCA）相關性腎炎的高危因素[3]。本研究結果顯示，觀察組血清LAMP-2及NCAL水平均顯著高于對照組，且隨著腎功能受損程度的加重，表達水平升高。相關性分析結果顯示，LAMP-2與IgG4-RKD患者Scr、BUN水平及24 h尿蛋白呈正相關，LAMP-2是影響IgG4-RKD患者病程發展及腎功能損傷的獨立危險因素[3]。

尿NGAL濃度的升高可有效反映腎間質早期的結構變化[4]。NGAL常用于預測腎臟早期受損情況。本研究發現，觀察組血清NCAL水平顯著高于對照組，且會隨著腎功能損傷加重而表達增高。相關性分析結果顯示，NGAL水平與Scr、BUN、24 h尿蛋白水平均呈正相關，NGAL均是影響IgG4-RKD患者病程發展及腎功能損傷的獨立危險因素[4,6]。

綜上所述，IgG4-RKD患者在疾病發展及腎功能受損過程中的血清sFLC、ADP、LAMP-2及NGAL水平均會出現一定程度的改變，均表現為濃度升高。可考慮檢測三項因子水平結合常規腎功能檢查來共同診斷IgG4-RKD的發生或用于評估此類患者的腎功能損傷程度。