IL-6、IL-10及相關炎癥指標在川崎病冠狀動脈損傷中的作用

周玉杰 陳杰 譚超超 曹友德 袁華敏

川崎病（kawasaki disease，KD）是一種被稱為皮膚黏膜淋巴結綜合征的自身免疫性疾病，以發熱、結膜充血、皮疹及淋巴結腫大等為主要臨床癥狀，川崎病的心血管損傷程度與疾病發展程度和預后影響有關，冠狀動脈病變是KD 常見的并發癥之一[1]。KD 為出疹疾病，可活化機體炎癥細胞，其產生的炎癥因子可侵犯全身的小血管，進一步導致冠狀動脈發生狹窄、瘤變、擴張等病變[2]。關于川崎病的發病機制目前尚未完全明確，認為可能與鏈球菌感染有關。另外，還有一些研究表明，川崎病的表現與一種動物間致病的耶爾森菌中的假結核型株感染所引起的黏膜皮膚淋巴結綜合征相似[3-4]。亦有相關研究表明，KD 合并CALs與機體的免疫炎癥反應及血液高凝狀態相關[5]。但是目前尚未找到確切的證據來證明。本研究擬通過測定KD 患兒血清中的白介素-6（interleukin-6，IL-6）、白介素-10（interleukin-10，IL-10）以及臨床常見的相關炎癥指標，研究這些炎癥指標在川崎病患兒病情進展過程中的變化情況及其相互關系，以確定它們是否可以作為川崎病早期診斷的標志物，以及預測冠狀動脈病變發生的能力。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取湖南省職業病防治院和湖南省人民醫院2022 年1—12 月臨床診斷為KD 的40 例患兒作為KD 組。納入標準：（1）均符合KD 相關診斷標準[6]。（2）持續發熱≥3 d，伴有頸部淋巴結腫大、皮疹等癥狀。（3）臨床相關資料齊全。（4）入院前未經大劑量丙種球蛋白治療及阿司匹林等相關治療史。排除標準：（1）合并腫瘤、感染性等疾病者。（2）伴凝血功能嚴重障礙者。（3）繼發性細菌感染者。（4）伴先天性心臟病患兒。收集KD 患兒住院時的急性期（病程不超過2 周，未經阿司匹林及大劑量丙種球蛋白治療）血清及全血標本，另通過隨機化原則選取湖南省職業病防治院或湖南省人民醫院健康體檢中心的年齡相近的40 名正常健康體檢者作為健康對照組，且健康對照組需近3 個月內無使用激素、發生感染和炎癥。KD 組男童15 例，女童25 例；年齡1～9 歲，平均（4.15±0.15）歲；體質量9.1～37.2 kg，平均（23.34±1.02）kg；健康對照組男童20 名，女童20 名；年齡2～11 歲，平均（5.21±0.12）歲；體質量8.9～38.2 kg，平均（24.45±2.11）kg。兩組性別、年齡、體質量比較，差異無統計學意義（P＞0.05），具有可比性。本研究經醫院倫理委員會批準。

1.2 主要實驗儀器及試劑

儀器采用上海科華公司的ST-360 型酶標儀，試劑采用購自上海凡科維公司的ELISA 試劑盒。

1.3 觀察指標

收集兩組炎癥指標，包括C-反應蛋白（C-reactive protein，CRP）、血小板（platelet，PLT）、紅細胞沉降率（erythrocyte sedimentation rate，ESR）、降 鈣 素 原（procalcitonin，PCT）。采用酶聯免疫吸附試驗（enzyme linked immunosorbent assay，ELISA）檢測血清IL-10、IL-6 濃度。

1.4 統計學方法

所有實驗數據都采用SPSS 21.0 統計學軟件進行分析。計量資料以 （±s）表示，采用t檢驗；計數資料以n（%）表示，采用χ2檢驗。采用Logistic 回歸分析冠狀動脈損傷的危險因素。P＜0.05 為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 健康對照組和KD 組炎癥指標比較

與健康對照組比較，KD 組急性期PCT、ESR、CRP、PLT 明顯升高，差異有統計學意義（P＜0.05）；兩組抗炎因子IL-10 比較，差異有統計學意義（P＜0.05）；兩組促炎因子IL-6 比較，差異無統計學意義（P＞0.05）。見表1。

表1 健康對照組和KD 組急性期炎癥指標比較（±s）

表1 健康對照組和KD 組急性期炎癥指標比較（±s）

組別 例數 PCT（μg/L） ESR（mm/H） CRP（mg/L） PLT（×109/L） IL-10（pg/mL） IL-6（pg/mL）健康對照組 40 0.37±0.03 10.33±4.36 8.01±0.92 210.00±106.44 743.46±62.94 28.93±6.20 KD 組 40 1.36±0.12 53.31±27.01 79.90±12.76 503.18±150.32 801.36±90.15 40.19±6.22 t 值 - 2.095 2.607 3.617 -10.067 -3.331 -0.788 P 值 - 0.001 0.031 0.020 0.021 0.006 0.073

2.2 CALs 組與NCALs 組炎癥指標比較

KD 組急性期根據是否出現冠狀動脈病變又劃分為CALs 組（n＝9）與非冠狀動脈病變（non-coron aryartery lesions，NCALs）組（n＝31）。兩組PCT、ESR、CRP 比較，差異無統計學意義（P＞0.05）；兩組PLT 以及抗炎因子IL-10 比較，差異有統計學意義（P＜0.05）；兩組促炎因子IL-6 比較，差異無統計學意義（P＞0.05）。見表2。

表2 CALs 組與NCALs 組炎癥指標比較（±s）

表2 CALs 組與NCALs 組炎癥指標比較（±s）

組別 例數 PCT（μg/L） ESR（mm/H） CRP（mg/L） PLT（×109/L） IL-10（pg/mL） IL-6（pg/mL）CALs 組 9 1.48±0.64 55.29±32.05 89.20±12.43 508.17±163.60 850.15±32.11 41.96±9.92 NCALs 組 31 1.35±0.34 52.57±30.38 68.65±11.07 368.61±117.40 769.95±63.00 36.76±4.54 t 值 - 0.123 0.234 0.958 2.874 5.149 1.527 P 值 - 0.061 0.074 0.065 0.023 0.005 0.071

2.3 Logistic 回歸分析冠狀動脈損傷的危險因素

Logistic 回歸分析顯示，PLT 的OR 值為1.898，患兒PLT 每增加100×109/L，其發生冠狀動脈損傷的風險增加1.898 倍；PLT 是KD 患兒發生冠狀動脈病變的獨立影響因素。見表3。

表3 冠狀動脈損傷危險因素分析

3 討論

KD 的發病機制一直是研究熱點，KD 病因尚未明確。目前主要考慮以下幾種病因：（1）感染因素，現已知KD與多種病原體有關，這些病原體包括肺炎支原體、細菌和病毒等。另外，流行病學調查結果顯示，感染也與KD 的發病有關[7]。（2）遺傳易感因素，有研究揭示了多個基因中的單核苷酸多態性（single nucleotide polymorphism，SNP）與KD 以及冠狀動脈瘤的發生發展有關。這些發現突顯了遺傳因素在KD 的發病機制中的重要地位，并且正在成為研究關注的熱點。（3）環境因素，川崎病發病存在季節性差異，春夏季節發病率較高，冬季發病率較低[7]。此外，如果兒童長時間暴露在陽光下，可提高發生KD 的風險性。在委內瑞拉KD 發病率最高的地區是蟲媒病毒感染最嚴重的地區。同時，國外的相關研究也發現，KD 的暴發與蟲媒病毒感染的季節性高峰有所重疊，這些病原體可能可以導致KD 的發生[7]。（4）免疫炎癥因素，目前認為，引起KD免疫異常活化的主要原因有兩種學說，即細胞超抗原學說和普通抗原學說。免疫系統失調和T 細胞功能紊亂在KD 的發生與發展中扮演了關鍵的角色。KD 患兒的主要病理生理特征表現為免疫系統的失控和T 細胞功能的紊亂。當T 細胞被激活后，它會引發強烈的免疫應答反應；同時，T 細胞的激活還會引發細胞因子級聯放大反應，這種級聯放大反應在KD 中同樣出現了異常，導致血管炎的進一步加重和免疫系統的異常活化[7]。T 細胞在KD 的發病過程中可以誘導B 淋巴細胞發生凋亡減少和多克隆活化，釋放大量細胞因子，包括IL-6、IL-10 等。這些細胞因子和抗體可以促進炎癥反應，使得免疫應答更加劇烈和持久。同時，在這些因子的刺激作用下，可以促使血管內皮細胞表達一些相關黏附分子，導致血管壁進一步受損。此外，血管內皮生長因子也在這個過程中發揮了一定的作用，它可以進一步加重血管壁的損傷。本研究致力于深入探索KD 的發病與進展過程，特別關注免疫系統在這一過程中的角色。

常見的臨床檢測指標通常包括PCT、PLT、CRP、ESR等，這些指標目前已廣泛應用于大量炎癥疾病的診斷和治療中，缺點是這些炎癥指標的特異性都較低。已有研究證實，與KD 的炎癥程度呈正相關的指標包括PCT、PLT、CRP、ESR 等[8-9]。本研究結果發現，健康對照組炎癥指標明顯低于KD 組急性期，CALs 組患兒CRP、PCT、ESR 水平均高于NCALs 組，KD 組急性期與健康對照組比較，這4 項指標均差異有統計學意義（P＜0.05）。表明KD 急性期時這些炎癥因子可作為評估指標，同時也可作為診斷時的篩查指標，但因為特異性偏低，必須具備典型的臨床癥狀并且結合其他相應的臨床指標才能確診KD。比較CALs 組與NCALs 組的PLT，其差異有統計學意義（P＜0.05）。說明在冠狀動脈病變的過程中血小板可能發揮了作用。大量的血小板可通過KD 激活免疫細胞，增強免疫應答，進而損傷血管內皮，膠原蛋白暴露的方式刺激產生，KD 患兒通常可出現PLT 的異常增高，疾病早期，在血小板生成素、IL-6、IL-8 和IL-11 的介導作用下，血小板數量開始升高，最終導致血小板聚集形成[10-11]。聚集的血小板和受損的血管內皮之間的相互作用更容易導致黏附，進而激活凝血系統，引發一系列連續的反應，血液因此處于高度凝結的狀態，增加了心肌梗死的可能性，以及冠狀動脈瘤血栓形成和患兒死亡的風險。KD 患兒的血液高凝狀態與血管炎病變的活動性和嚴重性密切相關。隨著血管炎癥病變的加劇，血液高凝狀態也逐漸加重。患兒處于高凝狀態和血管炎癥同時存在的情況下，極易出現冠狀動脈擴張病變，以及由于冠狀動脈瘤內形成的血栓而導致的心肌梗死[12]。ZHOU 等[13]通過研究也證實了KD 患兒的冠狀動脈病變與PLT 有著緊密的聯系。本研究通過Logistic 回歸分析，提示KD 患兒發生冠狀動脈病變的獨立影響因素是PLT，PLT 的OR 值為1.898，表明患兒PLT 每增加100×109/L，其發生冠狀動脈損傷的風險增加1.898 倍，提示當PLT 異常升高時，KD 患兒發生CALs 的風險較高，需盡早使用抗血小板聚集、抑制血小板產生的相關性藥物。IL-6 是一種促炎因子，KD 發生后可導致體內單核巨噬細胞和T 細胞過度活化，IL-6 大量合成與分泌，血管內皮出現損傷等一系列炎癥反應。LI等[14]研究發現，急性KD 患兒血清中IL-6 活性均升高，但是疾病恢復期患兒和對照組血清中IL-6 活性均未檢測到或較低。提示IL-6 可能參與了KD 的發病，并且IL-6 的水平在有無冠狀動脈瘤患兒之間比較差異有統計學意義（P＜0.05）。IL-10 作為一種與炎癥以及自身免疫疾病的發病機制有關的一種有效抗炎因子，可通過抑制先天性和獲得性免疫系統從而導致不同水平的免疫反應來發揮作用。本研究結果顯示，比較KD 組急性期與健康對照組間的IL-10，其差異有統計學意義（P＜0.05）。那么在IL-10 異常升高時，需要關注患兒有無相關臨床表現，提高警惕，盡早對其進行診斷和治療。文章中體現了《川崎病診斷指南第6 次修訂版》[15]中的臨床參考或執行標準。

綜上所述，PLT 在預測川崎病的發生以及評估冠狀動脈損傷的風險方面具有重要的臨床價值，緊密觀察相關指標的變化有利于預判病情的發生和發展。