CD8+ T淋巴細(xì)胞水平對(duì)晚期肝細(xì)胞癌患者免疫治療療效的評(píng)估價(jià)值

張翔 李瑩瑩 湯青 李偉 孫立柱

早期肝細(xì)胞癌往往沒有典型癥狀,因此很難被及時(shí)發(fā)現(xiàn),大多數(shù)患者在確診時(shí)已經(jīng)處于晚期或進(jìn)展期,錯(cuò)過了最佳的手術(shù)治療時(shí)機(jī),只有極少數(shù)患者能夠接受肝移植等治療方式[1-2]。程序性死亡受體1(PD-1)及其配體(PD-L1)抑制劑在腫瘤治療中表現(xiàn)出確切的療效,已廣泛應(yīng)用于黑色素瘤、非小細(xì)胞肺癌等多種惡性腫瘤。隨著研究的不斷深入和發(fā)展,這種抗腫瘤藥物也逐漸在肝細(xì)胞癌治療中得到廣泛應(yīng)用,肝癌治療逐漸進(jìn)入了免疫治療時(shí)代[3]。然而在臨床實(shí)際使用中,PD-1/PD-L1抑制劑用于治療實(shí)體瘤患者整體客觀緩解率(ORR)不甚理想,且約有30%的患者會(huì)出現(xiàn)肝炎等免疫相關(guān)性毒副反應(yīng)[4]。另外,PD-1/PD-L1抑制劑價(jià)格昂貴,很多患者難以承受高額的治療費(fèi)用。通過有效的生物學(xué)指標(biāo)來辨別最有可能對(duì)免疫治療產(chǎn)生客觀反應(yīng)的患者,一方面可減少治療費(fèi)用及降低免疫相關(guān)性毒副反應(yīng)的發(fā)生風(fēng)險(xiǎn),另一方面可提升晚期肝細(xì)胞癌患者的免疫治療效果,從而達(dá)到腫瘤個(gè)體的精準(zhǔn)免疫治療目標(biāo)。Sendi等[5]研究認(rèn)為,高CD8+T淋巴細(xì)胞水平與原發(fā)性肝癌的低復(fù)發(fā)性密切相關(guān)。另有研究表明,CD8+T淋巴細(xì)胞水平在評(píng)估晚期肺癌患者免疫治療效果中具有重要價(jià)值[6],但其是否能夠用于預(yù)測晚期肝細(xì)胞癌患者免疫治療療效尚不可知,鑒于此,本研究選取89例晚期肝細(xì)胞癌患者進(jìn)行分析,現(xiàn)報(bào)道如下。

資料與方法

一、 一般資料

選擇2019年3月—2022年7月就診于徐州醫(yī)科大學(xué)附屬沭陽醫(yī)院的晚期肝細(xì)胞癌患者89例,年齡22～83歲,平均(53.67±11.39)歲;女性37例,男性52例。納入標(biāo)準(zhǔn):①臨床診斷為肝細(xì)胞癌[7];②均簽署知情同意書;③臨床分期Ⅲ～Ⅳ期;④均采用免疫治療。排除標(biāo)準(zhǔn):①非原發(fā)性肝癌;②伴有其他原發(fā)性惡性腫瘤;③嚴(yán)重肝腎功能不全;④處于妊娠期或哺乳期;⑤凝血功能障礙。

二、研究方法

(一)治療方法 89例患者均采用免疫治療。取卡瑞利珠單抗(蘇州盛迪亞生物醫(yī)藥有限公司,國藥準(zhǔn)字S20190027)200 mg加入至250 mL生理鹽水(國藥準(zhǔn)字H20013250,上海百特醫(yī)療用品有限公司)中,靜脈滴注,21 d為1個(gè)療程,所有患者均治療至疾病進(jìn)展或無法耐受。

(二)檢測CD8+T淋巴細(xì)胞水平步驟 所有患者均于治療前采集3 mL空腹靜脈血,通過流式細(xì)胞儀測定CD8+T淋巴細(xì)胞水平,儀器型號(hào):ACEA NovoCyte型,儀器由ACEA Biosciences公司提供。

(三)療效評(píng)估 參照文獻(xiàn)[8]對(duì)患者臨床療效進(jìn)行評(píng)估,包括疾病穩(wěn)定(SD)、部分緩解(PR)、疾病進(jìn)展(PD)及完全緩解(CR)。PR與CR占比之和為客觀緩解率(ORR)。PD+SD記為無效組,PR+CR記為有效組。

(四)收集資料 包括體力狀態(tài)(ECOG)評(píng)分、有無肝硬化、肝炎病毒感染、巴塞羅那分期(BCLC)、腫瘤分化程度、腫瘤數(shù)量、Child-Pugh分級(jí)、腫瘤大小、有無腫瘤包膜、有無血管侵犯、有無肝外轉(zhuǎn)移、治療前相關(guān)實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)[總膽紅素、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)、甲胎蛋白(AFP)、天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)]等。

三、統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 23.0軟件處理數(shù)據(jù),用表示計(jì)量資料,用t檢驗(yàn);用例數(shù)(%)表示計(jì)數(shù)資料,用檢驗(yàn)。多因素logistic回歸分析模型篩選影響因素。制作受試者工作特征曲線(ROC),采用曲線下面積(AUC)分析預(yù)測價(jià)值。P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

結(jié) 果

一、 患者臨床療效統(tǒng)計(jì)

治療后,89例患者中CR 0例,PR 57例、PD 24例、SD 8例,ORR為64.04%(57/89),有效組57例,無效組32例。

二、2組CD8+ T淋巴細(xì)胞水平對(duì)比

有效組CD8+T淋巴細(xì)胞水平為(27.85±5.32)%,比無效組[(21.06±4.13)%]高(t=6.236,P<0.001)。

三、2組臨床資料對(duì)比

無效組ECOG評(píng)分>0分、低分化、肝外轉(zhuǎn)移、Child-Pugh分級(jí)為B級(jí)、BCLC分期為終末期、AFP≥20 ng/mL的比例較有效組高(P<0.05)。見表1。

表1 對(duì)比2組臨床資料

四、分析晚期肝細(xì)胞癌患者免疫治療無效的影響因素

以BCLC分期、分化程度、Child-Pugh分級(jí)、ECOG評(píng)分、AFP、CD8+T淋巴細(xì)胞水平、有無肝外轉(zhuǎn)移為自變量(賦值情況:ECOG評(píng)分,>0分=1,0分=0;BCLC分期,晚期=0,終末期=1;腫瘤分化程度,低分化=1,中高分化=0;肝外轉(zhuǎn)移,有=1,無=0;AFP,≥20 ng/mL=1,<20 ng/mL=0;Child-Pugh分級(jí),A級(jí)=0,B級(jí)=1;AFP、CD8+T淋巴細(xì)胞水平均為連續(xù)變量),以晚期肝細(xì)胞癌患者免疫治療療效為因變量(賦值情況:無效=1,有效=0)進(jìn)行多因素logistic回歸分析,結(jié)果表明,BCLC分期為終末期、Child-Pugh分級(jí)為B級(jí)、AFP、CD8+T淋巴細(xì)胞水平為晚期肝細(xì)胞癌患者免疫治療無效的影響因素(P<0.05)。見表2。

表2 晚期肝細(xì)胞癌患者免疫治療無效的影響因素分析

五、CD8+ T淋巴細(xì)胞水平對(duì)晚期肝細(xì)胞癌患者免疫治療無效的預(yù)測價(jià)值分析

CD8+T淋巴細(xì)胞水平預(yù)測晚期肝細(xì)胞癌患者免疫治療無效的AUC值為0.781(P<0.01,見圖1)。

圖1 CD8+ T淋巴細(xì)胞水平預(yù)測晚期肝細(xì)胞癌患者

討 論

肝細(xì)胞癌早期常無典型癥狀,隨病情惡化,患者可能出現(xiàn)下肢水腫等癥狀,威脅生命安全[9]。Guo與Kudo 等[10-11]研究表明,PD-1/PD-L1抑制劑治療晚期肝細(xì)胞癌總體耐受性良好,療效顯著,但少數(shù)患者仍會(huì)出現(xiàn)免疫相關(guān)性毒副反應(yīng)。相關(guān)研究指出,腫瘤突變負(fù)荷、PD-L1、腸道微生物等與實(shí)體瘤免疫治療療效關(guān)系密切,然而其特異性、敏感性不高,臨床應(yīng)用受限[12-13]。因此,尋求一種有效的指標(biāo)用于預(yù)測晚期肝細(xì)胞癌患者免疫治療療效具有重要的臨床意義。

本研究中,89例晚期肝細(xì)胞癌治療后的ORR為64.04%,與既往報(bào)道相符[14]。本研究中,Child-Pugh分級(jí)為B級(jí)、BCLC分期為終末期、AFP水平為晚期肝細(xì)胞癌患者免疫治療無效的影響因素。孫小虎等[15]研究表明,BCLC分期、Child-Pugh分級(jí)與晚期肝癌的無進(jìn)展生存期密切相關(guān),且Child-Pugh分級(jí)越高,BCLC分期越晚,患者預(yù)后不良的風(fēng)險(xiǎn)越高,與本研究報(bào)道類似。AFP是一種單鏈糖蛋白,其可用于評(píng)估肝癌預(yù)后,曹銀彪等[16]研究結(jié)果顯示,血清AFP水平>20 μg/L的晚期肝細(xì)胞癌患者免疫聯(lián)合靶向序貫外科手術(shù)后復(fù)發(fā)風(fēng)險(xiǎn)更大,與本研究結(jié)果相符。Gopalakrishnan等[17]研究指出,免疫治療有效患者的基線循環(huán)CD4+ T淋巴細(xì)胞、循環(huán)CD8+T淋巴細(xì)胞及腫瘤浸潤C(jī)D8+T淋巴細(xì)胞的密度更高。Tang等[18]研究指出,腫瘤浸潤性CD8+T淋巴細(xì)胞水平升高與晚期肺癌預(yù)后關(guān)系密切。Chen等[19]采用白蛋白紫杉醇聯(lián)合阿替利珠單抗治療不可手術(shù)或轉(zhuǎn)移性局部晚期三陰性乳腺癌,結(jié)果顯示,相比于CD8+T淋巴細(xì)胞水平低表達(dá)者,CD8+T淋巴細(xì)胞水平高表達(dá)者無總生存期及進(jìn)展生存期更優(yōu)。免疫微環(huán)境常用于預(yù)測PD-1/PD-L1療效,但有關(guān)基線外周血免疫功能與免疫療效的相關(guān)性研究報(bào)道尚少,本研究通過比較有效組與無效組CD8+T淋巴細(xì)胞水平,結(jié)果顯示,CD8+T淋巴細(xì)胞水平降低為晚期肝細(xì)胞癌患者免疫治療無效的影響因素,提示CD8+T淋巴細(xì)胞水平較低的晚期肝細(xì)胞癌患者需謹(jǐn)慎使用免疫治療。本研究ROC曲線結(jié)果顯示,CD8+T淋巴細(xì)胞水平預(yù)測的AUC值為0.781,提示CD8+T淋巴細(xì)胞水平在預(yù)測晚期肝細(xì)胞癌患者免疫治療療效中具有確切價(jià)值。

綜上所述,CD8+T淋巴細(xì)胞水平可用于預(yù)測晚期肝細(xì)胞癌患者免疫治療療效,且CD8+T淋巴細(xì)胞水平較低的患者治療無效的風(fēng)險(xiǎn)更大。

利益沖突聲明：所有作者均聲明不存在利益沖突。