野生紫平菌絲生長營養(yǎng)物質(zhì)優(yōu)化研究

摘 要:采用單因素試驗方法，研究野生紫平菌絲在不同營養(yǎng)條件下的生長狀況。結(jié)果表明: 培養(yǎng)基中適宜菌絲生長的碳源是麥芽糖，其次是蔗糖和淀粉;氮源是蛋白胨，其次是酵母浸粉;適宜的碳氮比是25∶1;母種培養(yǎng)基中需添加復(fù)合維生素B 10～15 mg/L，硫酸鎂3.0～4.5 g/L。最適培養(yǎng)基配方為:麥芽糖20.36 g，蛋白胨2.64 g，硫酸鎂4 g，復(fù)合維生素B 15 mg，瓊脂20 g，加水至1 000 ml。

關(guān)鍵詞:平菇;野生紫平;菌絲生長;營養(yǎng)物質(zhì);優(yōu)化

中圖分類號:S646.1+4 文獻(xiàn)標(biāo)識號:A 文章編號:1001-4942(2010)05-0075-03

作者于2005年7月，在山東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院植物保護(hù)研究所溫室內(nèi)枸樹下采集到一株旺盛生長的野生紫色平菇狀真菌子實體。采集地環(huán)境空氣溫度28℃左右，當(dāng)天平均氣溫27℃，晝夜溫差為9℃，可見其適合在高溫環(huán)境中生長。目前，國內(nèi)尚未有類似特性食用菌品種報道。經(jīng)初步鑒定，該菌屬真菌門、擔(dān)子菌綱、傘菌目、側(cè)耳科、側(cè)耳屬平菇(Pleurotus ostreatus)，暫定名為紫平[1]。菌絲分離培養(yǎng)成功后，經(jīng)活體(雞)長期飼喂試驗，確定該菌無毒可食。該菌株的發(fā)現(xiàn)對于豐富食用菌品種資源，彌補高溫季節(jié)食用菌品種稀少，提供新的育種材料，具有重要意義。為了馴化栽培該菌株，本試驗對其菌絲生長所需要的營養(yǎng)物質(zhì)進(jìn)行了優(yōu)化研究。

1 材料與方法

1.1 供試菌株

野生紫平，本所采集、分離、培養(yǎng)、保存菌株。

1.2 供試基礎(chǔ)培養(yǎng)基

1.2.1 薩市(Sabouraud’s)培養(yǎng)基 蛋白胨10 g，瓊脂20 g，麥芽糖40 g，復(fù)合維生素B 1片(含維生素B1 3 mg，維生素B2 1.5 mg，維生素B6 0.2 mg，煙酰胺10 mg，右旋泛酸鈣1 mg)，加水至1 000 ml，1.3×105 Pa滅菌40 min。

1.2.2 復(fù)合培養(yǎng)基 葡萄糖20 g，蛋白胨3 g，磷酸二氫鉀2 g，瓊脂粉20 g，加水至1 000 ml，1.3×105 Pa滅菌40 min。

1.3 試驗方法

1.3.1 接種 從試管斜面菌落邊緣挑取紫平菌絲，接種到PDA培養(yǎng)基平板上，25℃恒溫培養(yǎng)，長滿平板后，用打孔器在菌落邊緣，打成直徑5 mm的菌塊，接種到供試培養(yǎng)基上進(jìn)行試驗。

1.3.2 營養(yǎng)物質(zhì)對菌絲生長的影響試驗

①碳源:分別用含有相同含碳量的葡萄糖、果糖、蔗糖、乳糖、淀粉代替1.2.1薩市基礎(chǔ)培養(yǎng)基中的麥芽糖，對紫平菌絲進(jìn)行培養(yǎng)、觀察。

②氮源:分別用相同含氮量的硫酸銨、尿素、酵母浸粉和硝酸鉀代替1.2.2培養(yǎng)基中的蛋白胨，在相同培養(yǎng)條件下，對紫平菌絲進(jìn)行培養(yǎng)、觀察。

③碳氮比:在1.2.2基礎(chǔ)培養(yǎng)基中，以1 000 ml培養(yǎng)基中葡萄糖與蛋白胨(蛋白胨含碳量對試驗處理碳氮比的影響忽略不計)的總質(zhì)量23 g不變，添加不同量的葡萄糖與蛋白胨，使培養(yǎng)基的碳氮比分別為10∶1、15∶1、20∶1、25∶1、30∶1，接種后在相同培養(yǎng)條件下，觀察對比不同碳氮比對紫平菌絲生長的影響。

④復(fù)合維生素B:在1.2.2的培養(yǎng)基中，使用復(fù)合維生素B的添加量分別為0、5、10、15、20 mg，在相同培養(yǎng)條件下，對紫平菌絲進(jìn)行培養(yǎng)、觀察。

⑤硫酸鎂:在1.2.2的培養(yǎng)基中，分別加入0、1.5、3.0、4.5、6.0 g的硫酸鎂，在相同培養(yǎng)條件下，對紫平菌絲進(jìn)行培養(yǎng)、觀察。

⑥根據(jù)試驗結(jié)果進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，得出最佳配方，其中碳源和氮源的數(shù)據(jù)應(yīng)該滿足以下要求:

a.碳源和氮源的總質(zhì)量與食用菌常用培養(yǎng)基1.2.2相同，為23 g;

b.碳氮比為1.3.2中得出的結(jié)論，用C代替。

設(shè)碳源為X，含碳量為A;氮源為Y，含氮量為B，聯(lián)立方程如下:

X+Y=23，AX/BY=C

1.3.3 菌絲長速及生長勢觀察 各處理平板培養(yǎng)5 d，分別用十字交叉法測量菌落直徑，計算菌絲日均生長速率，同時觀察記錄菌絲生長勢，主要依據(jù)為菌絲粗細(xì)、濃密程度、菌落完整性等。

2 結(jié)果與分析

2.1 碳源

由表1可以看出，紫平菌絲在6種碳源中都能生長，菌落完整，但長勢不同。在碳源為麥芽糖的培養(yǎng)基上長勢最好、生長速度最快，與其它處理之間差異極顯著;在碳源為蔗糖和淀粉的培養(yǎng)基上菌絲長勢較好，二者長速差異不顯著;碳源為葡萄糖和果糖的培養(yǎng)基上長勢較差，二者差異不顯著。可見，紫平菌絲適宜的碳源是麥芽糖，其次為淀粉和蔗糖。

2.2 氮源

由表2可以看出，紫平菌絲在5種氮源中均能生長，菌落完整，但長勢不同。在氮源為蛋白胨的培養(yǎng)基中長勢最好、生長速度最快，與其它處理比較，差異極顯著;其次為酵母浸粉培養(yǎng)基;氮源為硫酸銨和硝酸鉀的培養(yǎng)基中菌絲長勢較差，氮源為尿素的培養(yǎng)基中菌絲長勢最差。可見，紫平菌絲適宜的氮源是蛋白胨，其次是酵母浸粉，其它氮源則不適合紫平菌絲生長。

2.3 碳氮比

由表3可以看出，菌絲在不同碳氮比的培養(yǎng)基中都能生長，保持了完整的菌落形態(tài)，但是長勢不同。碳氮比為25∶1時長勢最好，生長速度最快，與其它處理相比，差異極顯著，碳氮比為10∶1、15∶1、20∶1、30∶1時菌絲長勢較差，它們之間差異不顯著。可見，紫平菌絲適宜的碳氮比是25∶1，與一般栽培平菇的經(jīng)驗碳氮比要求相似。

2.4 復(fù)合維生素B

復(fù)合維生素B是食用菌母種培養(yǎng)基中需要添加的重要成分，其添加量對不同的食用菌種類生長差異很大。由表4可以看出，菌絲在不同含量復(fù)合維生素B的培養(yǎng)基中都能生長，保持了完整的菌落形態(tài)，但是長勢不同。復(fù)合維生素B 為15 mg和10 mg時菌絲長勢最好、生長速度最快，與其它處理相比，差異顯著;5 mg和20 mg時長勢較好于對照，但與對照差異不顯著。可見，紫平菌絲適宜的復(fù)合維生素B濃度為10～15 mg/L。

2.5 硫酸鎂

由表5可以看出，菌絲在含有不同濃度硫酸鎂的培養(yǎng)基上都能生長，保持了完整的菌落形態(tài)，但是長勢不同。在3.0g/L和4.5 g/L濃度時，菌絲長勢最好，生長速度最快，二者差異不顯著，但與其它處理差異極顯著;為6 g/L時菌絲長勢較好，1.5 g/L長勢較差。可見，在母種培養(yǎng)基上加入3～4.5 g/L硫酸鎂對紫平菌絲生長促進(jìn)作用最為顯著，這和弓建國等(2009)[5]的研究結(jié)果相似。

3 結(jié)論與討論

試驗結(jié)果表明，培養(yǎng)基中最適合野生紫平菌絲生長的碳源是麥芽糖，其次是淀粉和蔗糖;氮源是蛋白胨，其次是酵母浸粉;碳氮比為25∶1;添加復(fù)合維生素B 10～15 mg/L，硫酸鎂3～4.5 g/L，能夠明顯促進(jìn)菌絲生長。

綜合得出其最適培養(yǎng)基配方為:蛋白胨2.64 g，麥芽糖20.36 g，硫酸鎂4 g，復(fù)合維生素B 15 mg，瓊脂20 g，加水至1 000 ml。

本試驗中，適合紫平菌絲生長的碳氮比是25∶1，這和傳統(tǒng)上側(cè)耳屬真菌生長所要求的碳氮比相差不大[2，3]，對下一步栽培配方研究具有重要的參考價值;同時，該設(shè)計方案考慮到培養(yǎng)基中營養(yǎng)物質(zhì)的條件一致問題[4]，使試驗結(jié)果能夠正確反映碳氮比對紫平菌絲的影響[2]，對今后碳氮比的試驗具有借鑒意義;從試驗結(jié)果可以看出，碳氮比對紫平菌絲生長影響比較大。

試驗2.1和2.2可以相互驗證，蛋白胨就是紫平的最適氮源，麥芽糖就是紫平的最適碳源，蛋白胨使麥芽糖更有利于紫平菌絲的生長。

參 考 文 獻(xiàn):

[1] 卯曉嵐. 中國經(jīng)濟(jì)真菌[M].北京:科學(xué)出版社，1998，1-762.

[2] 萬魯長，黃春燕，單洪濤，等.不同營養(yǎng)條件對白靈側(cè)耳菌絲生長的影響[J].食用菌學(xué)報， 2005，12(4):27-32.

[3] 宮志遠(yuǎn)，任海霞，李 瑾，等. 白靈菇菌絲生長營養(yǎng)物質(zhì)優(yōu)化試驗[J].山東農(nóng)業(yè)科學(xué)，2008，7:74-76.

[4] 馮改靜，李守勉，李 明，等. 不同碳氮比栽培料對猴頭菌菌絲及子實體生長的影響[J]. 華北農(nóng)學(xué)報，2007，22(增刊): 131-35.

[5] 弓建國， 徐松鶴. 石頭菇母種培養(yǎng)基優(yōu)化研究[J]. 北方園藝，2009，11:224-226.