豆芽中藥物殘留檢測方法研究進展

于以竹，李 平

（1.貴州省檢測技術研究應用中心，貴州貴陽 550000；2.貴陽生產力促進中心，貴州貴陽 550000）

豆芽，又稱芽苗菜，經濟實惠，爽脆可口，是廣大消費者喜食的一種蔬菜。但是，近年來，“問題豆芽”事件屢屢發生，有相關報道指出在豆芽生產過程中，一些商販為了牟取更大利益，可能存在違法使用化學藥物的現象，長期食用這些含有藥物殘留的豆芽，會對人體健康構成威脅。針對這種情況，我國市場監管部門加強了對豆芽生產過程中藥物殘留的監控，但通過查閱文獻以及發布的食品安全抽檢公告，發現豆芽中藥物殘留的狀況不容樂觀，亟須建立高效、準確的檢測方法，加強監測力度。本文綜述了豆芽中藥物殘留檢測方法的應用情況，為保障豆芽的食品安全提供參考。

1 豆芽中藥物殘留的種類、作用及危害

在豆芽的生產過程中，使用的藥物主要涉及植物生長調節劑、殺菌劑、抗生素、尿素和漂白劑等[1-3]，這些類型的藥物可有效殺菌消毒和防止根部腐爛，具有增產保鮮、延長貨架時間、縮短生產時間、提升產品產量等作用，但各類藥物也會通過食物鏈在人體內積累，使機體對抗生素產生耐藥性，導致慢性中毒，使人體內激素分泌紊亂，影響機體代謝平衡等，給人體健康帶來風險[4]。

2 豆芽中藥物殘留的檢測方法

目前，國內外豆芽中使用的各類藥物殘留的技術手段主要有液相色譜法、液相色譜-質譜法、氣相色譜法、氣相色譜-質譜法等。

2.1 液相色譜法

液相色譜法主要集中于單個或某一類別化合物的檢測。宋薇等[5]利用在酸性條件下呫噸氫醇和尿素反應，生成具有熒光特性的產物，經C18色譜柱分離，建立了測定豆芽中尿素的液相色譜熒光檢測法，并對實驗室自發豆芽和市場上購買豆芽進行了檢測，部分市售豆芽尿素含量較高，有人為添加的嫌疑。袁文新等[6]利用混合固相萃取柱PXC 結合超高效液相色譜建立同時測定豆芽中4 種植物生長調節劑4-氟苯氧乙酸、戊烯基腺嘌呤、4-氯苯氧乙酸、6-芐基腺嘌呤的分析方法，減少了樣品雜質對檢測的干擾；高宗林等[7]基于二維液相色譜，針對綠豆芽中的干擾物質，建立了樣品中6-芐基腺嘌呤、赤霉素、4-氯苯氧乙酸和2,4-D 4 種植物生長調節劑的分析方法；WANG 等[8]開發了一種攪拌吸附萃取（IP-SBSE）結合HPLC-VWD 檢測3 種酸性植物激素（水楊酸、吲哚-3-乙酸和脫落酸）的分析方法，該方法簡便，成本低廉、靈敏度高，為豆芽等蔬菜中的植物生長調節劑測定提供了新的選擇；ZHU 等[9]將PSA 和C18固相萃取柱串聯使用，結合HPLC-DAD，同時測定獼猴桃、草莓、豆芽和青椒中的13種植物生長調節劑，提升樣品前處理的效率；朱群英等[10]利用雙三元液相系統的程序控制流路切換功能，建立在線固相萃取-高效液相色譜法同時測定豆芽中6 種植物生長調節劑、3 種殺菌劑和2 種喹諾酮類藥物，顯著提高了分析效率和穩定性。

2.2 液相色譜-質譜法

液相色譜-質譜法可實現大批量多組分藥物的同時快速測定，其中液相色譜-三重四極桿質譜儀定量能力較強，以四極桿-飛行時間質譜和四極桿/靜電場軌道阱為代表的高分辨質譜，可進行非靶向快速篩查。吳少明[11]采用液質聯用技術，結合HLB 固相萃取柱，建立同時測定豆芽中喹諾酮類、硝基咪唑類以及喹噁啉類共18 種藥物殘留的方法，擴大對于豆芽中可能使用的殺菌劑類藥物的監測范圍；馬凱等[12]采用分散固相萃取技術，結合超高效液相色譜-四極桿/靜電場軌道阱高分辨質譜儀，建立豆芽中藥物殘留的非靶向篩查和定量分析方法，準確評估豆芽中藥物殘留的狀況；蘇燕等[13]采用PRiME HLB固相萃取小柱凈化方式，建立并優化了同時測定豆芽、豆干、火鍋底料中喹諾酮類、磺胺類、硝基咪唑類、四環素類共42 種抗生素的超高效液相色譜-串聯質譜檢測方法，極大地提高了檢測效率；孫曉冬等[14]利用QuEChERS 凈化手段，結合超高效液相色譜-串聯四極桿質譜儀，研究建立豆芽中硝基咪唑類、大環內酯類、喹諾酮類、林可酰胺類、 -內酰胺類、四環素類和磺胺類7 類共51 種抗生素類藥物的快速篩查方法；馮軍軍等[15]建立了QuEChERS 結合液相色譜-串聯質譜同時檢測豆芽中不同類別的植物生長調節劑、殺菌劑、殺蟲劑以及抗生素等殘留的方法，大大縮短了檢測周期。

2.3 氣相色譜法

氣相色譜法在豆芽中藥物殘留檢測應用較少，主要集中在植物生長調節劑方面。曹洪恩等[16]利用乙烯利在堿性條件下加熱可分解為乙烯的原理，采用靜態頂空-氣相色譜儀測定，建立了豆芽中乙烯利的殘留分析方法，相對于氣相衍生法，該方法快速簡單，檢測限適宜，選擇性好，減少了實驗過程中對實驗人員的危害；常宇文等[17]建立了豆芽中2,4-D殘留量的凝膠滲透色譜-衍生化氣相色譜測定方法，提升了該化合物的檢測準確度、靈敏度和精密度，降低了檢測成本；龔睿蓉等[18]用乙腈提取豆芽中的2,4-二氯苯氧乙酸，用14%三氟化硼甲醇溶液進行衍生化處理，正己烷提取，氣相色譜儀使用HP-5 氣相色譜柱，結合ECD 檢測器進行分析，操作方便，快速和準確地測定豆芽中2,4-二氯苯氧乙酸的含量。

2.4 氣相色譜-質譜法

氣相色譜-質譜法可以有效分離和定量分析揮發性有機物，已廣泛應用于豆芽中農藥、植物生長調節劑和化學污染物殘留的檢測。張昊等[19]采用C18柱和PSA 柱進行樣品前處理，使用氣相色譜-質譜儀對豆芽中有機磷農藥殘留進行測定；乙小娟等[20]使用乙腈提取，濃縮后，再經Florisil 柱凈化，建立了氣質聯用法測定豆芽中百菌清的方法；程盛華等[21-22]采用QuEChERS 方法結合GC-MS/MS 同時測定豆芽中的16 種鄰苯二甲酸酯（Phthalic Acid Ester，PAEs）的方法，以及采用酸性乙腈溶液提取豆芽中的農藥，用Carb/NH2固相萃取小柱凈化，利用在線凝膠滲透色譜-氣相色譜分析的方法；吳平谷等[23]針對豆芽生產過程中可能使用的10 種植物生長調節劑，根據其化學性質進行分級凈化，采用氣相色譜質譜法測定，獲得較好的凈化效果，具有較大實際應用價值；QIN 等[24]使用10%三氟化硼甲醇溶液進行衍生，通過MCS 小柱凈化，利用GC-MS 分析豆芽中的5 種植物生長調節劑，該方法可靠、選擇性好，準確度和靈敏度較高。

2.5 其他方法

蘇曉燕等[25]比較了離子色譜法和分光光度法測定黃豆芽和綠豆芽中的亞硝酸鹽含量，與離子色譜法相比，分光光度法更適合于豆芽中亞硝酸鹽的測定；陳露等[26]用中空纖維三相液相微萃取技術，結合熒光分光光度計，測定綠豆芽中的吲哚類植物生長調節劑，該方法有效去除了豆芽基質中干擾組分的影響；馬占玲等[27]采用充氮蒸餾-氫氧化鈉吸收-鄰苯二甲醛熒光法測定豆芽中亞硫酸鹽的含量，該方法靈敏、準確，無污染；張君等[28]用水浸泡豆芽，通過活性炭脫色，去除基質干擾，與二甲氨基苯甲醛反應，建立了測定豆芽中尿素含量的分光光度法，為精確檢測豆芽中的尿素含量提供了技術參考；張萍等[29]應用快速溶劑提取前處理技術與便攜式表面增強拉曼光譜檢測技術，建立豆芽中6-芐基腺嘌呤殘留物質的快速檢測方法，為大規模快速檢測提供了高效、靈敏的解決方案；白新偉等[30]使用3-氨基苯磺酸作為衍生化試劑，對豆芽中10 種植物生長調節劑進行衍生化，結合毛細管電泳儀進行測定，該方法分離效果好、準確可靠，有望將該方法用于其他蔬菜、水果中植物生長調節劑殘留的測定；王乾龍等[31]建立了直接競爭酶聯免疫吸附分析（Enzyme Linked Immunosorbent Assay，ELISA）法快速、準確地對大批量的豆芽樣品實現殘留2,4-D 的檢測，相對于傳統的色譜法，簡化了樣品的前處理步驟；郭新穎[32]分別以直接浸泡法和水蒸氣蒸餾法作為前處理方法，利用甲醛與酚試劑反應，結合分光光度法，進行定量分析，通過對實驗條件的調試和比較，水蒸氣蒸餾法回收率較高，可根據樣品的含量范圍、預處理液的情況、干擾因素及實驗室具備的條件，選擇合適的方法進行檢測；蘆春梅等[33]建立了離子色譜法分離檢測不同種類的豆芽中的連二亞硫酸鈉，該方法操作簡單、分析時間短。

3 結語

近年來，在豆芽的生產過程中，違規使用的藥物類型越來越多，針對單個或者某一類別化合物的檢測，覆蓋面較窄，已不能滿足食品安全事件處置工作中高效率、多組分等要求，因此檢測類別多、覆蓋面廣、可以實現大批量樣品中多組分藥物同時快速測定的方法，具有重要的實際應用價值。同時，可開發操作簡單、靈敏、選擇性強的快速檢測方法，如酶聯免疫分析方法、生物傳感器和拉曼光譜法等，用于滿足大批量樣品的現場快速篩查方面的需求，為豆芽食品安全監控提供可靠的技術保障。