過敏性紫癜患兒外周血25-(OH)D3、CD4+/CD8+、免疫球蛋白水平與疾病復發的關系研究

張 林,朱國琴,葛婷婷,趙麗萍

(無錫市兒童醫院腎內風濕免疫科,江蘇 無錫 214023)

過敏性紫癜(henoch-schonlein purpura,HSP)是兒科最常見的系統性血管炎。據統計,約90%的HSP患者年齡小于10歲,年發病率為10/10萬～20/10萬人,男女比例為1.20～1.65[1]。HSP的發病機制尚不清楚,研究指出細菌、病毒、寄生蟲感染、過敏、藥物和疫苗的使用等均可導致機體產生免疫反應,沉積在小血管上,進而引發無菌性血管炎和紫癜[2-3]。HSP臨床主要表現為皮膚黏膜非血小板減少性紫癜、消化道出血、關節腫痛、腎損害、心肌炎、肝損害及顱內出血等。相關研究發現,HSP的復發率高,1年內可達30%～40%,反復發作時可能會造成腎損傷,甚至會發展成腎衰竭等,嚴重影響患兒的身體健康和生活質量[4]。25-羥基維生素D3[25-hydroxyvitamin D3,25-(OH)D3]是人體內維生素D的主要儲存形式,其在維持機體鈣穩態、增強免疫力方面發揮著重要作用。研究指出HSP患兒25-(OH)D水平低于健康兒童,其表達差異可能與皮膚、腎臟等受累導致的維生素D合成不足有關[5]。血管壁中IgA和免疫復合物的沉積在HSP患兒免疫和腎臟損傷過程中起著重要作用[6-7]。基于此,本研究通過分析HSP患兒外周血25-(OH)D3、白細胞分化抗原4/白細胞分化抗原8(leukocyte differentiation antigen 4/leukocyte differentiation antigen 8,CD4+/CD8+)和免疫球蛋白水平及與疾病復發的關系,旨在為HSP患兒疾病復發的評估提供參考,現報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2019年5月至2022年4月無錫市兒童醫院收治的100例HSP患兒為研究對象。納入標準:符合HSP診斷標準[8];患兒家屬知情并簽署同意書;年齡<15歲;首次發病。排除標準:入院前3個月服用激素、免疫抑制劑等藥物;合并感染性疾病;血液、免疫系統障礙者;嚴重心、肺、腎部疾病;嚴重意識障礙者。所有患兒男56例,女44例;年齡3～14歲,平均(7.26±1.89)歲;體重(29.23±7.62)kg;病程4～23d,平均(10.49±3.35)d;疾病類型:單純型47例,腹型21例,關節型19例,混合型13例。

1.2 研究方法

采集所有入組人員入院次日清晨空腹血5mL,使用磁微粒化學發光法檢測外周血25-(OH)D3,采用全自動蛋白分析儀檢測(美國貝克曼庫爾特公司生產)IgA、IgG水平,采用貝克曼庫爾特生物科技有限公司流式細胞儀檢測兩組治療前后外周血CD4+、CD8+細胞百分比,并計算得到CD4+/CD8+細胞比值。采取門診的方式對HSP患者進行6個月隨訪(每3個月隨訪一次),隨訪的截止日期為2022年11月。

1.3 觀察指標

①根據患兒病情嚴重程度[9]分為輕度組(n=43)、中度組(n=32)和重度組(n=25),比較三組外周血25-(OH)D3、CD4+/CD8+、免疫球蛋白(IgA、IgG)水平;②根據患者治療后6個月疾病復發情況分為復發組和未復發組,比較兩組外周血25-(OH)D3、CD4+/CD8+、免疫球蛋白水平,其中復發診斷標準:患兒出現皮疹、腹痛、關節炎和尿常規異常等情況;③統計分析外周血25-(OH)D3、CD4+/CD8+和免疫球蛋白的之間相關性;④統計分析外周血25-(OH)D3、CD4+/CD8+、免疫球蛋白對疾病復發的預測價值;⑤分析HSP患兒疾病復發的影響因素。

1.4 統計學方法

2 結果

2.1 三組外周血25-(OH)D3、CD4+/CD8+、免疫球蛋白水平比較

重度組外周血IgA水平高于輕度組和中度組,25-(OH)D3、CD4+/CD8+、IgG水平低于輕度組和中度組,差異具有統計學意義(F值介于9.127～24.936之間,P<0.05),見表1。

表1 三組外周血25-(OH)D3、CD4+/CD8+、免疫球蛋白水平比較

2.2 復發組和未復發組外周血25-(OH)D3、CD4+/CD8+、免疫球蛋白水平比較

對HSP患兒隨訪6個月,所有患者均得到隨訪,其中疾病復發28例,復發率為28.00%。復發組外周血IgA水平高于未復發組,25-(OH)D3、CD4+/CD8+、IgG水平低于未復發組,差異具有統計學意義(t值介于2.464～3.435之間,P<0.05),見表2。

表2 復發組和未復發組外周血25-(OH)D3、CD4+/CD8+、免疫球蛋白水平比較

2.3 外周血25-(OH)D3、CD4+/CD8+和免疫球蛋白之間的相關性

Pearson相關性分析顯示,外周血25-(OH)D3水平與CD4+/CD8+、IgG呈正相關(r值分別為0.354、0.228,P<0.05),與IgA呈負相關(r=-0.263,P<0.05);CD4+/CD8+水平與IgA呈負相關(r=-0.217,P<0.05),與IgG呈正相關(r=0.205,P<0.05)。

2.4 25-(OH)D3、CD4+/CD8+、免疫球蛋白對HSP患兒疾病復發的預測價值

ROC曲線分析顯示,25-(OH)D3、CD4+/CD8+、IgA、IgG聯合預測HSP患兒疾病復發的AUC為0.853,高于單一指標檢測,差異有統計學意義(Z值介于2.033～3.487之間,P<0.05),見表3及圖1。

圖1 25-(OH)D3、CD4+/CD8+、免疫球蛋白預測HSP患兒疾病復發的ROC曲線

表3 25-(OH)D3、CD4+/CD8+、免疫球蛋白對HSP患兒疾病復發的預測價值

2.5 多因素Logistic回歸分析HSP患兒疾病復發的影響因素

將HSP患兒疾病復發情況(復發=1,未復發=0)作為因變量,將25-(OH)D3(≤19.81ng/mL=1,>19.81ng/mL=0)、CD4+/CD8+(≤0.86=1,>0.86=0)、IgA(>1.98g/L=1,≤1.98g/L=0)、IgG(≤6.02g/L=1,>6.02g/L=0)作為自變量,進行多因素Logistic回歸分析,結果顯示,外周血25-(OH)D3≤19.81ng/mL、CD4+/CD8+≤0.86、IgA>1.98g/L均為HSP患兒疾病復發的獨立危險因素,其OR值及95%CI分別為11.936(3.343～42.619)、4.554(1.261～16.443)、7.869(2.086～29.674),見表4。

表4 多因素Logistic回歸分析HSP患兒疾病復發的影響因素

3 討論

3.1 25-(OH)D3水平與疾病復發的關系

目前HSP的具體發病機制尚不清楚,但多項研究指出,免疫復合物沉積、體液免疫失調及炎癥因子介導的血管損傷與HSP的發生和發展密切相關[9-10]。此外,由于HSP復發率高,部分患兒在治愈后可能會反復出現皮疹,甚至導致腎功能損害。因此,加強相關研究對HSP臨床治療的指導和預后評估具有重要意義。

25-(OH)D3是維生素D3的主要活性形式,其可與胞漿受體結合后進入細胞核,促進轉錄過程,生成一種與鈣有很高親和力的鈣結合蛋白,參與鈣的轉運而促進鈣的吸收。此外,25-(OH)D3還參與作用于免疫細胞、血管內皮細胞等,進而參與自身免疫性疾病及內分泌系統疾病的發生[11]。本研究中,重度組外周血25-(OH)D3水平低于輕度組和中度組,這與王華勝等[12]研究結果一致。分析其原因,可能為患兒飲食攝入不足,使機體適應性免疫降低,進而引發HSP病情加重。復發組外周血25-(OH)D3水平低于未復發組,提示25-(OH)D3參與HSP的發生和發展過程。25-(OH)D3可通過調節Th1/Th2細胞平衡,抑制B淋巴細胞增殖和免疫球蛋白產生,進而抑制HSP復發。朱凱莉等[13]研究指出,25-(OH)D水平降低是兒童HSP復發的危險因素,這與本研究的結論不謀而合。曾倩等[14]研究也指出,HSP患兒25-(OH)D3水平越低,其發生腎功能損傷的風險越高。

3.2 CD4+/CD8+水平與疾病復發的關系

正常情況下,CD4細胞和CD8細胞的水平或比例保持動態平衡,以維持體內免疫功能的一致性。Th1/Th2亞群失衡是導致機體自身免疫的關鍵驅動因素[15]。同時CD4細胞也影響B淋巴細胞的發育和免疫球蛋白的調節功能。CD4細胞功能障礙會導致免疫系統功能障礙,引起一系列病理改變。本研究中,重度組CD4+/CD8+低于輕度組和中度組,提示HSP患兒CD4+/CD8+與病情嚴重程度相關。進一步分析發現,復發組外周血CD4+/CD8+水平低于未復發組,提示CD4+/CD8+參與HSP的發生和發展過程。Th1/Th2失衡可刺激免疫活性細胞產生炎癥因子,使血管內皮功能損傷,導致中性粒細胞產生活性氧,進一步加速了HSP的進展。Sugino等[16]研究也指出HSP患兒皮膚損傷部位與腎小球基底膜均出現免疫復合物沉積。

3.3 免疫球蛋白水平與疾病復發的關系

免疫球蛋白是宿主防御微生物的關鍵驅動因素,其有幾種亞型,包括IgG和IgA等。IgA具有廣泛識別微生物群的特征,會引起自身免疫反應,導致免疫復合物驅動宿主的炎癥反應[17-18]。IgG是血清中含量最高的免疫球蛋白,其水平降低可能與HSP患兒體內大量免疫復合物形成有關[19-20]。本研究中,復發組外周血IgA水平高于未復發組,IgG水平低于未復發組,表明IgA、IgG參與HSP的發生和發展。IgA、IgG形成的循環免疫復合物可導致炎癥介質的產生增加和免疫球蛋白的分泌增加,使細胞增生、細胞外基質成分過度表達,進而介導HSP的發展。

本研究結果顯示,外周血25-(OH)D3、CD4+/CD8+、IgG、IgA兩兩之間呈相關性,提示四者可相互影響、相互作用,共同參與HSP的發生。ROC曲線分析顯示,25-(OH)D3、CD4+/CD8+、IgA、IgG聯合預測HSP患兒疾病復發的AUC高于單一指標,提示聯合四者預測HSP患兒疾病復發的效能較好。

綜上所述,HSP患兒外周血25-(OH)D3、CD4+/CD8+、IgA、IgG與病情嚴重程度相關,四者對疾病復發具有一定的預測價值,其中25-(OH)D3、CD4+/CD8+、IgA是HSP患兒疾病復發的獨立影響因素。