高效液相色譜在食品農獸藥殘留中的檢測應用

劉姝

摘 要：近年來，我國食品安全問題日益突出，食品農獸藥殘留檢測作為保證食品安全的重要手段，具有十分重要的作用。高效液相色譜法是一種迅速、靈敏、選擇性高的檢測方法，因操作簡便、分離效率高等特點，在食品農獸藥殘留分析中得到廣泛應用。本文綜述了高效液相色譜法在農藥獸藥殘留分析中的應用，主要介紹了高效液相色譜在食品中農獸藥殘留檢測中的作用和檢測方法，以供相關人員參考。

關鍵詞：高效液相色譜；食品；農獸藥殘留；檢測

Abstract： In recent years， China’s food safety issues have become increasingly prominent， the detection of residues of agricultural and veterinary drugs in food plays a very important role as an important means to ensure food safety. High performance liquid chromatography is a rapid， sensitive and selective detection method. It is widely used in the analysis of agricultural and veterinary drug residues in food because of its simple operation and high separation efficiency. This paper reviewed the application of high performance liquid chromatography in the analysis of pesticide and veterinary drug residues， mainly introduced the role and detection methods of high performance liquid chromatography in the detection of agricultural and veterinary drug residues in food， for the reference of?relevant personnel.

Keywords： high performance liquid chromatography; food; residues of agricultural and veterinary drugs; detection

近年來，隨著人們對食品安全關注度的不斷提高，食品中農獸藥殘留問題成為公眾關注的焦點。農獸藥廣泛應用于農業生產中，雖然能有效提高農作物和畜禽的產量，但其殘留會對人體健康造成潛在危害。高效液相色譜（High Performance Liquid Chromatography，HPLC）技術具有分辨率高、靈敏度高和準確性高等優勢，已被廣泛用于食品中農獸藥物殘留的檢測。

1 高效液相色譜技術

高效液相色譜技術是一種基于溶液流動相和固定相之間的相互作用原理，通過樣品溶液在固定相上的分配與再分配實現分離和檢測的方法[1]。其具有分析時間短、分離性能好、重現性強、靈敏度高等優點，相對于傳統的液相色譜方法，高效液相色譜柱直徑在2～6 mm，顆粒直徑在10 mm以下，采用高壓輸運的流動相，不但可以實現在線檢測，而且可以大大縮短實驗時間[2]。通過HPLC技術可以對樣品中的目標化合物進行分離、檢測，有效分析食品中的農獸藥殘留物。與傳統的氣相色譜法相比，HPLC方法具有選擇性高、操作簡單、流動相變化靈活等優點，在糧食、蔬果、畜禽肉類等食品檢測中具有廣闊的應用前景[3]。

HPLC檢測食品農獸藥殘留物的過程一般包括以下步驟。①樣品的前處理。樣品通常需要進行預處理，如樣品的提取和凈化，以去除干擾物[4]。②色譜柱的選擇。根據目標化合物的性質和分析要求，選擇適當的色譜柱，常用的有反相色譜柱、離子交換柱等。③流動相的選擇。根據目標化合物的特性，選擇合適的流動相，并進行流動相配制。④樣品上機。將經過前處理的樣品注入色譜儀中進行分析。⑤分離和檢測。通過控制流動相的流速和梯度，目標化合物會在色譜柱中分離出來，并通過檢測器進行檢測和定量。⑥數據處理和結果分析。對檢測到的信號進行數據處理，得到目標化合物的定量結果，并進行數據分析[5]。

2 高效液相色譜法在農藥獸藥殘留分析中的應用

2.1 高效液相色譜法在農藥殘留分析中的應用

2.1.1 有機磷農藥

在農業生產中，有機磷農藥應用廣泛，如敵百蟲和敵敵畏。有機磷農藥是一種乙酰膽堿抑制劑，因高效、廉價等特點而受到農民的青睞，作用機制主要是對害蟲膽堿酯酶活性的抑制[6]。有機磷農藥暴露于環境中可導致中毒，其過量使用對人、畜、環境等都有很大的危害。因此，對其進行檢測尤為重要，高效液相色譜-串聯質譜法是目前廣泛采用的一種檢測方法。郭愛靜等[7]用高效液相色譜-串聯質譜法（High Performance Liquid Chromatography Tandem Mass Spectrometry，HPLC-MS/MS）測定葡萄酒中4種不同類型的有機磷農藥，莎稗磷、抑草磷、哌草磷和甲基胺草磷的回收率均在69.3%～99.2%，5個樣品的相對標準偏差在2.3%～8.1%，顯示出高效液相色譜-質譜聯用技術對葡萄糖進行快速、準確測定的優越性。鐘冬蓮等[8]采用高效液相色譜-串聯質譜法對8種有機磷殺蟲劑在鐵皮石斛中的殘留量進行了分析。采用QuEChERS預處理、Waters AtlantisT3柱層析，采用電噴霧質譜聯用技術，通過預處理和液質條件優化，建立了一種具有較好重現性的分析方法，其相對標準偏差為2.1%～12.3%，可實現對有機磷農藥殘留的高靈敏、高靈敏、寬線性范圍（0.84～8.52 μg·kg-1）的檢測，具有一定的應用價值。

2.1.2 有機氯農藥

有機氯農藥具有穩定、不易分解、劇毒和生物富集的特性，可經體內的生物累積及食物鏈傳遞至人體內，在肝臟、腎臟、心臟等組織中累積，并對神經中樞產生興奮作用，引起慢性中毒。另外，該類殺蟲劑具有較強的脂溶性，易在生物體內蓄積，會影響生物體的穩態及調節功能，嚴重威脅人體健康及生態環境安全。因此，建立有效的定量檢測手段對其進行檢測意義重大。彭曉俊等[9]對4種有機氯殺蟲劑進行了分析，并對其在農業生產中的應用進行探討。通過多壁碳納米管（Multi-Walled Carbon Nanotube，MWCNTs）進行固相萃取，建立一種基于HPLC的高靈敏、高選擇性、高靈敏度的檢測方法，其溶劑用量少、回收率高（回收率為78%～104%）、穩定性高（相對標準偏差為2.7%～7.6%），能快速、準確地對大量樣品進行分析。

2.1.3 氨基甲酸酯類農藥

氨甲酸酯類農藥具有降解速度快、殘留時間短、高效、選擇性高等優點，在糧食、蔬菜、水果等農作物中應用廣泛。當前對于氨基甲酸酯類農殘的分析主要是通過液-液萃取、柱層析等進行預處理，并通過氣相色譜或高效液相色譜法等進行檢測。劉長武等[10]建立了一種測定蔬菜和水果中氨基甲酸酯類殺蟲劑的方法，并對其代謝產物進行分析。采用C18柱層析，以水、甲醇為流動相，采用梯度洗脫的方法。用此法對8種氨基甲酸酯類殺蟲劑及其代謝產物進行了分析，平均回收率為70%～120%，相對標準誤差＜20%，可以滿足對多個農藥殘留量同時測定的要求。

2.1.4 煙堿類農藥

煙堿類農藥具有殘留低、藥效持久、低毒、高效等特點，在水稻、蔬菜和果樹種植中應用廣泛。吳潔珊等[11]采用HPLC-MS/MS方法測定7種新煙堿類殺蟲劑，檢出限在0.1～2.0 μg·kg-1，線性關系良好，樣品回收率在71%～117%，相對標準偏差＜1.8%，證明HPLC-MS/MS方法簡便、快速，準確度高，能夠滿足食品中新煙堿類殺蟲劑的測定要求，保證食品的安全性。

2.2 高效液相色譜法在獸藥殘留分析中的應用

2.2.1 氯霉素

氯霉素是一種廣譜的抗生素，可以抑制細菌的蛋白質合成，對G-、G+均有較好的抑制作用，但會對動物的骨髓造血功能產生影響。彭莉等[12]利用HPLC對牛乳中的氯霉素殘留進行了測定。試驗中，用乙酸乙酯萃取牛乳中的殘留物，采用正己烷-氯仿（1+1，V/V）溶解法，以乙腈-0.005 mol·L-1磷酸氫二銨（18+82，V/V）作為流動相，采用高效液相色譜紫外檢測器，于278 nm波段測定，平均回收率達94.8%。結果準確度良好，變化系數低于12.0%。結果表明，該方法簡單、回收率高、靈敏度高、可重復，測定結果準確、可靠，適合于乳制品中氯霉素殘留量的測定。

2.2.2 四環素類

四環素是目前我國畜禽養殖業中應用最廣的一種抗生素，在畜牧業中廣泛使用，其在動物源性食物中的殘留量較高。抗生素類藥物不僅會對人體造成不良影響，而且還會導致致敏劑的耐藥性。張素霞等[13]采用高效液相色譜-紫外光譜法對乳制品中的四環素進行了測定。將試樣與C18、EDTA-2Na、草酸等粉碎后，制得半固態色譜柱，進行淋洗，并進行HPLC分析。測定結果的回收率為87.7%～90.2%，變異系數為2.4%～18.8%，測定下限0.02～0.05 μg·mL-1。秦燕等[14]采用HPLC方法測定了乳制品中四環素族抗生素的殘留量。用EDTA-Mcllvaine緩沖液提取樣品，離心，將上清液取到經過預平衡的Sep-Pak Waters TMSep-Pak C18固相萃取柱中，以便純化，用10 mmol·L-1的草酸甲醇作溶劑，洗脫，在氮氣濃縮機中干燥，以0.5 mL流動相溶解，用高效液相色譜法測定。結果表明，標準曲線線性范圍為0.05～0.10 mg·L-1，相關系數＞0.99，相對標準偏差≤10%。呂振娥[15]利用高效液相色譜技術實現了畜禽肉中四環素類抗生素的快速檢測，其中磷酸酯溶液+乙腈萃取技術制備的試樣檢出結果分別為0.06 mg·kg-1、0.10 mg·kg-1，回收率為79%～85%，并在烏魯木齊地區一家聯營企業的雞群中進行快速測定，結果顯示該方法操作簡單、準確率較高。

3 結語

HPLC方法具有分析速度快、靈敏度高、準確度高等優點，特別是可以對高沸點的化學物質進行有效分析，滿足對各種食品的檢測需求，為食品安全的質量保證提供一種可靠性高的分析檢測方法。HPLC技術已成為食品農獸藥殘留檢測的重要手段。未來，相關研究人員可進一步對該技術進行研究和創新，推動該領域的發展，從而提高食品安全監管的水平。

參考文獻

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[15]呂振娥.高效液相色譜法對畜禽肉中土霉素、四環素、金霉素的殘留檢測研究[J].食品安全導刊，2021（21）：75-76.