臍帶血免疫球蛋白E 和臍血Th1、Th2 細(xì)胞因子表達(dá)水平對(duì)嬰幼兒過(guò)敏性疾病的早期預(yù)測(cè)價(jià)值

鐘永興，嚴(yán)菊英，張徵

過(guò)敏性疾病是指IgE 介導(dǎo)的I 型過(guò)敏反應(yīng)性疾病，近年來(lái)，其發(fā)病率在全球范圍內(nèi)逐年遞增，已成為全球關(guān)注的熱點(diǎn)問(wèn)題[1]。近年來(lái)，隨著不斷深入研究發(fā)現(xiàn)，子代過(guò)敏性疾病的發(fā)生發(fā)展與臍帶血IgE、T淋巴細(xì)胞亞群密切相關(guān)，但具體臨床意義有待進(jìn)一步研究[2]。本文旨在探討臍帶血IgE 及臍帶血細(xì)胞因子對(duì)嬰幼兒過(guò)敏性疾病的診斷價(jià)值，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 納入2019 年1 月至2020 年12 月于紹興市婦幼保健院成功分娩的足月新生兒400例，納入新生兒均檢測(cè)出生時(shí)臍帶血IgE、臍帶血Th1、Th2 細(xì)胞因子水平。對(duì)其追蹤隨訪(fǎng)2 年，共隨訪(fǎng)到341 例（85%），根據(jù)是否發(fā)生過(guò)敏性疾病分為過(guò)敏性疾病組（98 例），未發(fā)生的納入對(duì)照組（243 例）。本研究經(jīng)紹興市婦幼保健院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)審批通過(guò)，家屬均知情同意并簽署知情同意書(shū)。

1.2 納入及排除標(biāo)準(zhǔn) 納入標(biāo)準(zhǔn)：（1）所有新生兒出生無(wú)窒息搶救史，均為足月兒；（2）經(jīng)培訓(xùn)過(guò)的兒科專(zhuān)家診斷為過(guò)敏性疾病。排除標(biāo)準(zhǔn)：（1）出生時(shí)伴有呼吸、凝血、肝功能、腎功能、神經(jīng)系統(tǒng)、循環(huán)系統(tǒng)等嚴(yán)重臟器疾病者；（2）合并惡性腫瘤者；（3）臨床及隨訪(fǎng)資料不完整者。

1.3 方法

1.3.1 臍帶血采集、檢測(cè) 胎兒分娩后，由受過(guò)專(zhuān)業(yè)培訓(xùn)的醫(yī)護(hù)人員收集孕婦分娩時(shí)的臍帶血（臍靜脈血）4 ～6 ml，6 ～24 h內(nèi)分離血清，置—70℃保存，待檢。采用ELISA 法進(jìn)行IgA 測(cè)定，任何IgA ＞30 IU/L 視為污染標(biāo)本，予以排除，本研究臍血標(biāo)本均未被母血污染，符合要求。IgE 采用電化學(xué)發(fā)光法（德國(guó)羅氏診斷有限公司）檢測(cè)，細(xì)胞因子測(cè)定采用Bio-Plex 懸浮芯片系統(tǒng)。

1.3.2 隨訪(fǎng) 分別于嬰兒出生時(shí)，生后1、3、6、12、18及24 個(gè)月進(jìn)行問(wèn)卷調(diào)查，包括孩子性別、出生方式、出生季節(jié)、喂養(yǎng)方式、家庭過(guò)敏性疾病或疾病史、有無(wú)飼養(yǎng)寵物、母親孕期吸煙史、家族成員吸煙史等。

1.4 觀(guān)察指標(biāo) 記錄新生兒隨訪(fǎng)期間過(guò)敏性疾病發(fā)生情況。過(guò)敏性疾病定義：明顯的過(guò)敏性疾病是通過(guò)出現(xiàn)特應(yīng)性皮炎、支氣管哮喘、過(guò)敏性鼻結(jié)膜炎、過(guò)敏性蕁麻疹或胃腸道過(guò)敏的癥狀或體征來(lái)診斷的。如果有在檢查時(shí)未觀(guān)察到的特定癥狀或體征，則可能存在過(guò)敏性疾病，包括瘙癢性性濕疹、感染期間或其他情況下反復(fù)出現(xiàn)的喘息、持續(xù)的鼻分泌物或沒(méi)有呼吸道感染的打噴嚏和眼睛瘙癢。

1.5 統(tǒng)計(jì)方法 采用SPSS 26.0 軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)整理和分析。計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料采用2檢驗(yàn)；相關(guān)性分析采用Pearson相關(guān)分析；以ROC曲線(xiàn)評(píng)估過(guò)敏性疾病患兒特異性檢測(cè)指標(biāo)，根據(jù)Youden 法確定預(yù)測(cè)過(guò)敏史疾病患兒的最佳臨界點(diǎn)。P ＜0.05 表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 過(guò)敏性疾病發(fā)生情況 所有新生兒隨訪(fǎng)2 年，隨訪(fǎng)到341 例，隨訪(fǎng)率85%。341 例中出現(xiàn)過(guò)敏性疾病98 例，發(fā)病率為28.74%，其中嬰兒濕疹30 例、過(guò)敏性鼻炎26 例、喘息性支氣管炎18 例、急性毛細(xì)支氣管炎15 例、蕁麻疹和藥疹9 例。

2.2 兩組一般資料比較 兩組性別、出生方式、出生季節(jié)、喂養(yǎng)方式、家中有無(wú)飼養(yǎng)寵物、母親孕期吸煙史及家庭成員吸煙史差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P ＞0.05），兩組家庭過(guò)敏性疾病或疾病史差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P ＜0.05），見(jiàn)表1。

表1 兩組患兒基本資料比較例例

2.3 兩組臍帶血IgE、Th1 及Th2 水平比較 過(guò)敏性疾病組臍血IgE、IL-4 均高于對(duì)照組，IL-2、IL-10、TNF- 及IFN-r均低于對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P ＜0.05），見(jiàn)表2。

表2 兩組臍帶血IgE、Th1 及Th2 水平比較

2.4 臍帶血細(xì)胞因子和IgE 的相關(guān)性 Pearson 相關(guān)分析顯示，IL-1 與IL-8、IL-17A、IL-12p70 均呈正相關(guān)（r=0.31、0.33、0.33，均P ＜0.05），IL-17A 與IL-12p70 呈正相關(guān)（r=0.31，P ＜0.05），見(jiàn)表3。

表3 相關(guān)變量間的相關(guān)性

2.5 ROC 曲線(xiàn) ROC 曲線(xiàn)顯示，IL-4、IgE 曲線(xiàn)下面積均為0.82。IL-4、IgE 的臨界值分別為0.61pg/ml、0.67 IU/ml時(shí)，其區(qū)分過(guò)敏性疾病與非過(guò)敏性疾病的敏感性分別為89.8%、76.5%，特異性分別為70.6%、74.8%，見(jiàn)圖1。

圖1 ROC 曲線(xiàn)

3 討論

過(guò)敏性疾病可發(fā)生于皮膚、鼻、眼部、支氣管、腸道等全身各個(gè)組織器官[3]，其機(jī)制為過(guò)敏源作用于機(jī)體不同靶點(diǎn)導(dǎo)致不同過(guò)敏性疾病發(fā)生，這可能與過(guò)敏刺激形成的高IgE 過(guò)度免疫應(yīng)答有關(guān)。過(guò)敏易感體質(zhì)發(fā)生過(guò)敏性疾病的風(fēng)險(xiǎn)更高，更易發(fā)生過(guò)敏性鼻炎、特應(yīng)性皮炎、過(guò)敏性哮喘三大過(guò)敏性病[4]，而子代發(fā)生過(guò)敏性疾病的風(fēng)險(xiǎn)與其父母有過(guò)敏性疾病史密切相關(guān)[5-6]，本研究結(jié)果亦與之相符。

Th1 和Th2 細(xì)胞（產(chǎn)生特定的細(xì)胞因子分別是IFN- 和IL-4）被認(rèn)為是調(diào)節(jié)過(guò)敏變態(tài)反應(yīng)的主要細(xì)胞群，其機(jī)制主要是環(huán)境過(guò)敏原優(yōu)先激活Th2 細(xì)胞及釋放Th2 相關(guān)細(xì)胞因子導(dǎo)致機(jī)體Th1/Th2 失衡[7-8]。IL-4 可促進(jìn)B 細(xì)胞反應(yīng)和IgE 的分泌，IL-4 與IgE存在正向促進(jìn)作用，這可以解釋本研究中過(guò)敏性疾病組臍血IgE、IL-4 均高于對(duì)照組原因。此外，本研究發(fā)現(xiàn)IL-2、IL-10、TNF- 、IFN-r 低于對(duì)照組，表明臍血TH2 因子占優(yōu)勢(shì)可能導(dǎo)致子代過(guò)敏性疾病發(fā)生，這也進(jìn)一步證實(shí)Th1/Th2 失衡與過(guò)敏性疾病發(fā)生發(fā)展有關(guān)，且在圍產(chǎn)期已經(jīng)存在。孕期母體臍血Th2 占優(yōu)，Th1/Th2 失衡，Th1/Th2 相關(guān)細(xì)胞因子變化，會(huì)促進(jìn)日后過(guò)敏的發(fā)生[9-10]。另外國(guó)內(nèi)學(xué)者最新研究指出臍血中IL-10 分泌機(jī)制受損，TNF- 、IFN-r濃度較低，可能會(huì)導(dǎo)致變應(yīng)原免疫耐受失調(diào)，導(dǎo)致日后哮喘、喘息、過(guò)敏性鼻炎風(fēng)險(xiǎn)增加[11]，本研究結(jié)果與以上研究結(jié)論相符。

本研究顯示IL-1 與IL-8、IL-17A、IL-12p70 和IL-17A與IL-12p70 呈正相關(guān)，表明人體內(nèi)各種細(xì)胞因子是相互促進(jìn)的。細(xì)胞因子在自分泌反饋回路中進(jìn)一步促進(jìn)T 細(xì)胞分化，會(huì)進(jìn)一步刺激過(guò)敏反應(yīng)和嗜酸性炎癥、以及上皮和平滑肌細(xì)胞最終導(dǎo)致過(guò)敏等病理學(xué)癥狀的發(fā)生[12]。而臍血IgE、臍血細(xì)胞因子IL-4 可作為嬰幼兒過(guò)敏性疾病的預(yù)測(cè)因子，這與國(guó)內(nèi)臍血IgE、IL-4 檢測(cè)對(duì)2 歲內(nèi)嬰幼兒特應(yīng)性疾病有一定預(yù)測(cè)作用的結(jié)論相符[13]。用IgA 作為生物標(biāo)志物評(píng)估臍帶血與母體血液的污染，結(jié)果IgA 均＜30 IU/L，提示臍血標(biāo)本未被母血污染[14]，排除了潛在的臍血IgE 的錯(cuò)誤分類(lèi)的可能。

利益沖突 所有作者聲明無(wú)利益沖突

作者貢獻(xiàn)聲明 鐘永興：實(shí)驗(yàn)操作、論文撰寫(xiě)；張徵：數(shù)據(jù)整理、統(tǒng)計(jì)學(xué)分析；嚴(yán)菊英：研究指導(dǎo)、論文修改、經(jīng)費(fèi)支持