卡氏乳香中1個新的降二萜

徐蓮蓮，陳志超，何夢麗，楊 寶，付劍江，陳芳有，羅永明

?化學成分 ?

卡氏乳香中1個新的降二萜

徐蓮蓮，陳志超，何夢麗，楊 寶，付劍江，陳芳有*，羅永明*

江西中醫藥大學藥學院，江西 南昌 330004

研究卡氏乳香中的化學成分及其抗骨質疏松活性。運用硅膠柱色譜、ODS柱色譜和制備高效液相色譜等方法進行化學成分分離，通過波譜數據及文獻對比對其進行結構解析?？ㄊ先橄愕?5%乙醇提取物中分離得到11個化合物，分別鑒定為 (1,2,8,9)-1,9-環氧-8-乙酰氧基-4,5-二氧代降西松烷型-2-烯（1）、(1,3,7,11,12)-1,12-epoxy-4-methylenecembr-7-ene-3,11-diol（2）、boscartin F（3）、boscartene K（4）、fidmansumbin-13(17)-en-3,16-diene（5）、3α-acetoxyl-7-oxo-tirucalla-8,24-dien-21-oic acid（6）、boscartene N（7）、3β-hydroxy-tirucallic acid（8）、α-boswellic acid（9）、boscarterol O（10）、boscarterol F（11）?；衔?是新化合物，命名為卡氏乳香素，化合物5為首次從乳香中分離得到，化合物2和10首次從該屬植物中分離得到。對11個化合物進行抗骨質疏松活性篩選，發現化合物1、3、6和10具有良好的抑制破骨細胞活性。

卡氏乳香；萜類化合物；降二萜；(1,2,8,9)-1,9-環氧-8-乙酰氧基-4,5-二氧代西松烷型-2-烯；卡氏乳香素

乳香是橄欖科植物乳香樹Birdw.及同屬植物Birdw.樹皮滲出的膠狀樹脂，具有活血定痛、消腫生肌的功效[1]。大量的臨床試驗結果表明，乳香具有較好的抗炎活性，主要用于治療類風濕性關節炎、潰瘍性結腸炎和骨關節炎[2-3]。乳香屬大約包含25種，其中卡氏乳香.Birdw.受到研究人員廣泛的關注，研究表明其主要化學成分為三萜類和二萜類[4]。早期文獻研究主要集中于乳香酸等三萜類成分，近年來從中報道了一些結構新穎、活性多樣的西松烷型二萜，但研究尚不深入[5]。本研究對卡氏乳香95%乙醇提取物的化學成分進行研究，從中分離鑒定出11個化合物，分別為 (1,2,8,9)-1,9-環氧-8-乙酰氧基-4,5-二氧代西松烷型-2-烯[(1,2,8,9)-1,9-epoxy-8-acetoxy-4,5-dioxo-2-cembranene，1]、(1,3,7,11,12)-1,12-epoxy-4- methylenecembr-7-ene-3,11-diol（2）、boscartin F（3）、boscartene K（4）、fidmansumbin-13(17)-en- 3,16-diene（5）、3α-acetoxyl-7-oxo-tirucalla-8,24- dien-21-oic acid（6）、boscartene N（7）、3β-hydroxy- tirucallic acid（8）、α-boswellic acid（9）、boscarterol O（10）、boscarterol F（11）。其中化合物1是新化合物，命名為卡氏乳香素，化合物5為首次從乳香中分離得到，化合物2和10首次從該屬植物中分離得到。

1 儀器與材料

Bruker Avance Ⅲ HD 600 MHz型核磁共振波譜儀（Bruker公司，瑞士）；AB SCIEX Triple ESI 5600+型高分辨飛行時間質譜聯用儀（AB SCIEX公司，美國）；Jasco J-1500型圓二色譜儀（Jasco公司，日本）；Rulph Autopol IV自動旋光儀（Rudolph Research Analytical公司，美國）；Agilent 1260型高效液相色譜儀（Agilent公司，美國）；FTIR-650紅外光譜儀（天津港東公司）；Waters 515 制備型液相色譜儀（Waters公司，美國）；C18半制備色譜分析柱（250 mm×10 mm，5 μm，YMC，日本）；柱色譜硅膠（200～300目）和薄層色譜硅膠GF254（青島海洋化工廠）；色譜純甲醇（西隴科學股份有限公司）；純凈水（杭州娃哈哈集團有限公司）；分析純石油醚（PE）、二氯甲烷、醋酸乙酯和甲醇（西隴科學股份有限公司）。

卡氏乳香藥材（批號20190401）于2019年10月購自于江西繼中堂健康科技有限公司，經南昌大學第一附屬醫院周健副主任藥師鑒定為卡氏乳香樹Birdw.樹皮滲出的膠狀樹脂。樣品（20191020）保存于江西中醫藥大學藥學院中藥化學教研室。

2 提取與分離

卡氏乳香樹脂10 kg，粉碎后用95%乙醇冷浸提取3次，合并提取液減壓濃縮，得到總浸膏6.7 kg，所得浸膏經硅藻土柱色譜依次用石油醚、二氯甲烷、醋酸乙酯和甲醇進行分離，回收有機溶劑，分別得到石油醚部位2.9 kg、二氯甲烷部位1.8 kg、醋酸乙酯部位850.0 g和甲醇部位200.0 g。二氯甲烷部位浸膏經PRP 512A樹脂洗脫分離（30%、50%、70%、95%乙醇-水溶液）得到4個部分。

取70%乙醇組分（400.0 g）經硅膠柱色譜分離，以石油醚-醋酸乙酯（30∶1→0∶1）梯度洗脫得到7個組分（Fr. 1～7），其中Fr. 4（184.0 g）經減壓柱色譜以二氯甲烷-甲醇（100∶1→0∶1）得到6個組分（Fr. 4-1～4-6）。Fr. 4-1（50.0 g）經MCI柱色譜洗脫（50%→100%甲醇-水溶液）得到6個組分（Fr. 4-1-1～4-1-6)，其中Fr. 4-1-6（17.0 g）進行反復硅膠柱色譜分離得到化合物6（600.0 mg）、8（202.0 mg）、9（29.1 mg）和11（33.0 mg），Fr. 4-1-5（30.0 g）經反復硅膠柱色譜和制備液相色譜（80%甲醇-水溶液，體積流量2 mL/min）分離純化得到化合物4（7.0 mg，R＝1.2 min）、5（13.1 mg，R＝1.5 min）和7（6.2 mg，R＝1.8 min）。對Fr. 4-3進行ODS柱色譜（洗脫梯度為60%～100%的甲醇-水溶液）得到5個組分（Fr. 4-3-1～4-3-5），其中Fr. 4-3-1經反復硅膠柱色譜和制備液相柱色譜（65%甲醇-水溶液，體積流量2 mL/min）分離得到化合物1（5.6 mg，R＝2.0 min）、2（11.1 mg，R＝2.1 min）和3（9.6 mg，R＝1.8 min）。Fr. 4-6（14.0 g）經ODS柱色譜（60%→100%甲醇-水溶液）進行梯度洗脫得到5個組分（Fr. 4-6-1～4-6-5），其中Fr. 4-6-1經制備液相柱色譜（60%甲醇-水溶液，體積流量2 mL/min）得到化合物10（12.2 mg，R＝2.2 min）。

3 結構鑒定

通過1H-1H COSY譜和HMBC（圖1）可以對以上做進一步證實。1H-1H COSY譜顯示H-2/H-3、H-6/H-7/H-8、H-10/H-11和H-12/H3-13/H3-14相關信號。在HMBC譜中，H-2 (H6.75) 與C-1、C-3、C-4和C-11相關，且H-3 (H6.24) 與C-1、C-2、C-4和C-15相關，H-15 (H2.30) 與C-3和C-4相關，由此確定C-2、C-3、C-4和C-15為α, β不飽和酮部分；H-12 (H1.79) 與C-1、C-2、C-11、C-13和C-14相關，H-17 (H1.20) 與C-8、C-9和C-10相關，結合C-1和C-9的化學位移可以確定C-1和C-9之間連有1個五元氧環[6]；H-16 (H2.14)與C-5和C-6相關，H-6a (H2.49) 與C-5和C-7相關，可以確定C-5為酮羰基部分；H-13 (H0.91) 和C-1、C-12和C-14相關, H-14 (H0.87) 與C-1、C-12和C-13相關，H-12 (H1.79) 與C-1、C-12、C-13相關，可以確定C-1上連有1個異丙基結構。

在NOESY譜中，觀察到H-17與H8/H12的相關信號，表明H-8/H-12/H-17位于同一平面內。化合物1的ECD圖譜在234 nm (= ?4.70) 處呈現負的Cotton效應，化合物1的計算ECD和實驗ECD圖譜基本一致（圖2），確定該化合物的絕對構型為1,8,9,其結構如圖1所示。通過以上信息推測化合物1的結構為 (1,2,8,9)-1,9-環氧-8-乙酰氧基-4,5-二氧代西松烷型-2-烯，命名為卡氏乳香素。波譜數據歸屬見表1。

化合物2：白色針狀結晶（甲醇）；HR-ESI-MS/323.255 0 [M＋H]+（C20H35O3計算值為323.258 6）。1H-NMR (600 MHz, CDCl3): 5.33 (1H, t,= 7.5 Hz, H-7), 4.99 (1H, s, H-18b), 4.89 (1H, s, H-18a), 4.28 (1H, d,= 9.9 Hz, H-3), 3.38 (1H, d,= 9.5 Hz, H-11), 2.37 (1H, ddd,= 13.1, 9.9, 3.1 Hz, H-5a), 2.28 (1H, m, H-15), 2.23 (1H, ddd,=10.0, 7.3, 3.1 Hz, H-6a), 2.17 (1H, m, H-9a), 2.08 (1H, m, H-5b), 2.04 (1H, m, H-9b), 2.02 (1H, m, H-14a), 2.00 (1H, m, H-13a), 1.91 (1H, m, H-10a), 1.78 (1H, m, H-13b), 1.72 (1H, dd,= 14.6, 9.9 Hz, H-2a), 1.67 (3H, s, H-19), 1.61 (1H, dd,= 14.6, 1.5 Hz, H-2b), 1.50 (1H, m, H-14b), 1.46 (1H, m, H-6b), 1.42 (1H, m, 10a), 1.12 (3H, s, H-20), 0.90 (3H, d,= 2.5 Hz, H-16), 0.89 (3H, d,= 2.6 Hz, H-17)；13C-NMR (150 MHz, CDCl3): 88.9 (C-1), 40.6 (C-2), 70.0 (C-3), 155.1 (C-4), 34.1 (C-5), 29.9 (C-6), 126.5 (C-7), 135.0 (C-8), 33.4 (C-9), 31.2 (C-10), 76.2 (C-11), 85.1 (C-12), 36.2 (C-13), 31.8 (C-14), 33.4 (C-15), 18.2 (C-16), 17.4 (C-17), 110.0 (C-18), 18.6 (C-19), 20.2 (C-20)。以上數據與文獻對照基本一致[7]。對化合物2進行X-射線單晶衍射分析，確定其絕對構型，見圖3。晶體數據：分子式為C20H34O3,＝323.499，斜方晶系，晶胞參數＝0.646 71 (3) nm，＝1.912 80 (9) nm，＝0.790 44 (3) nm，＝0. 947 83 (7) nm3，＝2，＝293（2），Kμ (Cu K)＝0.577 mm?1，空間集群為P212121(No. 19), 收集衍射點數為7629，獨立衍射點數為3193，int＝0.044 4，sigma＝0.054 1，1＝0.059 5，2＝0.146 3，Flack常數為?0.1 (2)。因此，化合物1確定為(13,7,11,12)-1,12-epoxy-4- methylenecembr-7-ene-3,11-diol。

圖1 化合物1的主要1H-1H COSY、HMBC和NOESY相關

圖2 化合物1的實驗和計算ECD圖

表1 化合物1的1H-NMR和13C-NMR數據(600/150MHz, CDCl3)

Table1 1H-NMR and 13C-NMR data of compound 1 (600/150MHz, CDCl3)

碳位δHδc 1 89.2 26.75 (1H, d, J = 16.0 Hz)149.9 36.24 (1H, d, J = 16.0 Hz)129.3 4 198.7 5 208.0 62.41 (1H, m), 2.49 (1H, m)40.2 71.72 (1H, m), 1.76 (1H, m)24.2 84.79 (1H, dd, J = 10.5, 2.6 Hz)77.9 9 84.6 101.65 (1H, m), 1.76 (1H, m)35.0 111.94 (1H, m), 2.00 (1H, m)33.2 121.79 (1H, dd, J = 6.8, 7.0 Hz)38.3 130.91 (1H, d, J = 7.0 Hz)17.8 140.87 (1H, d, J = 6.8 Hz)18.4 152.30 (3H, s)28.2 162.14 (3H, s)30.2 171.20 (3H, s)22.4 18 171.0 192.02 (3H, s)21.3

圖3 化合物2的橢球圖(橢球率為50%)

化合物3：白色針狀結晶（甲醇）；HR-ESI-MS/337.235 9 [M＋H]+（C20H33O4計算值為337.237 9）。1H-NMR (600 MHz, CDCl3): 6.84 (1H, dd,= 6.3, 5.8 Hz, H-7), 3.86 (1H, d,= 12.5 Hz, H-10a), 3.53 (1H, d,= 10.4 Hz, H-11), 3.14 (1H, dd,= 4.7, 2.3 Hz, H-3), 2.46 (1H, m, H-6a), 2.46 (1H, m, H-6b), 2.27 (1H, m, H-5a), 2.21 (1H, sept,= 6.8 Hz, H-15), 2.11 (1H, m, H-13a), 2.05 (1H, dd,= 12.5, 10.4 Hz, H-10b), 2.02 (1H, m, H-14a), 1.87 (1H, m, H-13b), 1.82 (1H, dd,= 15.8, 2.3 Hz, H-2a), 1.78 (3H, s, H-19), 1.62 (1H, dd,= 15.8, 4.7 Hz, H-2b), 1.48 (1H, m, H-14b), 1.36 (1H, m, H-5b), 1.14 (3H, s, H-20), 1.13 (3H, s, H-18), 0.98 (3H, d,= 6.9 Hz, H-17), 0.92 (3H, d,= 6.9 Hz, H-16)；13C-NMR (150 MHz, CDCl3): 89.0 (C-1), 37.4 (C-2), 60.8 (C-3), 58.7 (C-4), 37.9 (C-5), 25.6 (C-6), 144.5 (C-7), 137.2(C-8), 203.5 (C-9), 40.9 (C-10), 78.3 (C-11), 84.9 (C-12), 36.8 (C-13), 30.5 (C-14), 33.0 (C-15), 18.8 (C-16), 17.0 (C-17), 16.3 (C-18), 11.4 (C-19), 19.8 (C-20)。以上數據與文獻對照基本一致[8]，故鑒定該化合物為boscartin F。

化合物4：白色針狀結晶（甲醇）；HR-ESI-MS/373.272 9 [M＋H]+（C24H37O3計算值為373.274 3）。1H-NMR (600 MHz, CDCl3): 5.80 (1H, d,= 1.3 Hz, H-17), 4.68 (1H, t,= 2.6 Hz, H-3), 2.71 (1H, dd,= 14.2, 4.7 Hz, H-12a), 2.56 (1H, d,= 19.1 Hz, H-15a), 2.42 (1H, td,= 13.6, 6.8 Hz, H-12b), 2.10 (3H, s, CH3CO-), 1.94 (1H, m, H-2a), 1.88 (1H, d,= 19.1 Hz, H-15b), 1.84 (1H, m, H-11a), 1.70 (1H, m, H-9), 1.67 (1H, m, H-7a), 1.64 (1H, m, H-2b), 1.54 (1H, m, H-1a), 1.53 (1H, m, H-11b), 1.48 (1H, m, H-6a), 1.40 (1H, m, H-6b), 1.35 (3H, s, H-22), 1.31 (1H, m, H-7b), 1.28 (1H, m, H-1a), 1.28 (1H, m, H-5), 0.89 (3H, s, H-20), 0.88 (3H, s, H-19), 0.87 (3H, s, H-21), 0.80 (3H, s, H-18)；13C-NMR (150 MHz, CDCl3): 34.4 (C-1), 23.1 (C-2), 78.1 (C-3), 36.9 (C-4), 50.8 (C-5), 18.2 (C-6), 35.5 (C-7), 41.5 (C-8), 50.2 (C-9), 37.7 (C-10), 22.1 (C-11), 27.5 (C-12), 190.6 (C-13), 51.6 (C-14), 46.2 (C-15), 209.5 (C-16), 126.6 (C-17), 16.1 (C-18), 16.3 (C-19), 22.0 (C-20), 28.0 (C-21), 22.6 (C-22), 170.9 (CH3CO-), 21.6 (CH3CO-)。以上數據與文獻對照基本一致[9]，故鑒定該化合物為boscartene K。

化合物5：黃色油狀物；HR-ESI-MS/329.248 1 [M＋H]+（C22H33O2計算值為329.248 1）。1H-NMR (600 MHz, CDCl3): 5.79 (1H, s, H-17), 2.71 (1H, ddd,= 14.1, 5.0, 1.9 Hz, H-12a)，2.53 (1H, d,= 19.1 Hz, H-15a), 2.49 (1H, m, H-2a), 2.49 (1H, m, H-2b), 2.43 (1H, m, H-12b), 1.99 (1H, m, H-1a), 1.88 (1H, d,= 19.1 Hz, H-15b), 1.80 (1H, m, H-11a), 1.66 (1H, dd,= 12.7, 3.1 Hz, H-9), 1.66 (1H, m, H-6a), 1.55 (1H, m, H-7a), 1.51 (1H, m, H-1b), 1.46 (1H, m, H-6b), 1.42 (1H, m, H-7b), 1.42 (1H, m, H-11b), 1.31 (3H, s, H-22), 1.27 (1H, m, H-5), 1.11 (3H, s, H-20), 1.05 (3H, s, H-21), 0.96 (3H, s, H-19), 0.84 (3H, d,= 0.8 Hz, H-18)；13C-NMR (150 MHz, CDCl3): 39.8 (C-1), 34.1 (C-2), 217.5 (C-3), 47.4 (C-4), 55.2 (C-5), 19.7 (C-6), 50.1 (C-7), 41.1 (C-8), 51.1 (C-9), 37.3 (C-10), 22.4 (C-11), 27.5 (C-12), 187.4 (C-13), 51.5 (C-14), 46.1 (C-15), 209.2 (C-16), 126.9 (C-17), 15.9 (C-18), 16.4 (C-19), 26.9 (C-20), 21.0 (C-21), 22.7 (C-22)。以上數據與文獻對照基本一致[10]，故鑒定該化合物為fidmansumbin-13(17)-en- 3,16-diene。

化合物6：白色粉末；HR-ESI-MS/513.357 4 [M＋H]+（C32H49O5計算值為513.358 0）。1H-NMR (600 MHz, DMSO-6): 11.60 (1H, s, COOH), 5.09 (1H, t,= 6.4 Hz, H-24), 4.57 (1H, s, H-3), 2.39 (1H, m, H-2a), 2.36 (1H, m, H-2b), 2.34 (1H, m, H-6b), 2.32 (1H, m, H-6a), 2.27 (1H, m, H-11a), 2.22 (1H, m, H-11b), 2.18 (1H, m, H-16b), 2.10 (1H, m, H-5), 2.03 (1H, m, H-17), 2.02 (3H, s, CH3CO-), 2.00 (1H, m, H-15a), 1.94 (1H, m, H-16a), 1.94 (1H, m, H-23a), 1.90 (1H, m, H-23b), 1.72 (1H, m, H-1a), 1.59 (3H, s, H-26), 1.54 (3H, s, H-27), 1.45 (1H, m, H-12a), 1.45 (1H, m, H-15b), 1.22 (1H, m, H-22a), 1.22 (1H, m, H-22b), 1.17 (1H, m, H-1b), 1.12 (1H, m, H-12b), 1.06 (1H, m, H-16b), 1.03 (3H, s, H-19), 0.97 (3H, s, H-29), 0.96 (3H, s, H-28), 0.89 (3H, s, H-30), 0.80 (3H, s, H-18)；13C-NMR (150 MHz, DMSO-6): 32.2 (C-1), 22.4 (C-2), 76.1 (C-3), 36.2 (C-4), 47.3 (C-5), 34.9 (C-6), 196.6 (C-7), 137.5 (C-8), 165.6 (C-9), 38.7 (C-10), 21.1 (C-11), 27.6 (C-12), 43.1 (C-13), 43.9 (C-14), 29.0 (C-15), 26.9 (C-16), 46.8 (C-17), 15.7 (C-18), 17.9 (C-19), 45.4 (C-20), 177.1 (C-21), 31.0 (C-22), 25.5 (C-23), 123.8 (C-24), 131.2 (C-25), 22.7 (C-26), 17.5 (C-27), 25.5 (C-28), 26.6 (C-29), 24.1 (C-30), 169.9 (CH3CO-), 20.9 (CH3CO-)。以上數據與文獻對照基本一致[11]，故鑒定該化合物為3α- acetoxyl-7-oxo-tirucalla-8,24- dien-21-oic acid。

化合物7：白色粉末；HR-ESI-MS/467.313 3 [M＋H]+（C30H43O4計算值為467.316 7）。1H-NMR (600 MHz, CDCl3): 5.22 (1H, m, H-24), 5.20 (1H, m, H-23), 2.78 (1H, ddd,= 15.4, 13.8, 6.0 Hz, H-2), 2.68 (1H, td,= 8.9, 4.9 Hz, H-20), 2.49 (1H, d,= 13.9 Hz, H-6a), 2.43 (1H, m, H-6b), 2.41 (1H, m, H-2b), 2.40 (1H, m, H-11), 2.38 (1H, m, H-22a), 2.29 (1H, m, H-17), 2.23 (1H, m, H-15a), 2.18 (1H, m, H-1a), 2.13 (1H, dd,= 13.8, 4.3 Hz, H-5), 2.04 (1H, m, H-12a), 1.99 (1H, m, H-16a), 1.78 (1H, m, H-1b), 1.78 (1H, m, H-12b), 1.76 (3H, s, H-26), 1.75 (3H, s, H-27), 1.66 (1H, m, H-15b), 1.46 (1H, m, H-16b), 1.29 (3H, s, H-19), 1.13 (3H, s, H-29), 1.09 (3H, s, H-28), 1.03 (3H, s, H-30), 0.83 (3H, s, H-18)；13C-NMR (150 MHz, CDCl3): 35.5 (C-1), 34.6 (C-2), 214.5 (C-3), 47.5 (C-4), 49.5 (C-5), 36.3 (C-6), 197.5 (C-7), 139.1 (C-8), 164.7 (C-9), 39.3 (C-10), 24.1 (C-11), 27.7 (C-12), 47.5 (C-13), 44.9 (C-14), 31.3 (C-15), 24.7 (C-16), 43.3 (C-17), 16.7 (C-18), 18.2 (C-19), 41.8 (C-20), 178.9 (C-21), 35.0 (C-22), 75.3 (C-23), 123.2 (C-24), 139.1 (C-25), 25.9 (C-26), 18.6 (C-27), 24.1 (C-28), 21.6 (C-29), 24.7 (C-30)。以上數據與文獻對照基本一致[12]，故鑒定該化合物為boscartene N。

化合物8：白色粉末，HR-ESI-MS/457.367 8 [M＋H]+（C30H49O3計算值為457.368 2）。1H-NMR (600 MHz, CDCl3): 5.09 (1H, m, H-24), 3.23 (1H, dd,= 11.7, 4.5 Hz, H-3), 2.28 (1H, m, H-17), 2.08 (1H, m, H-20), 2.08 (1H, m, H-11a), 2.05 (1H, m, H-23a), 1.98 (1H, m, H-11b), 1.95 (1H, m, H-24b), 1.76 (1H, m, H-12a), 1.74 (1H, m, H-12b), 1.70 (1H, m, H-2a), 1.68 (3H, s, H-26), 1.66 (1H, m, H-1b), 1.58 (3H, s, H-27), 1.56 (2H, m, H-22), 1.56 (2H, m, H-7), 1.53 (1H, m, H-6a), 1.41 (1H, dd,= 12.4, 6.2 Hz, H-2b), 1.35 (2H, m, H-16), 1.35 (1H, m, H-6b), 1.25 (1H, m, H-15a), 1.22 (1H, m, H-15b), 1.18 (1H, m, H-1a), 1.12 (1H, dd,= 12.4, 1.9 Hz, H-5), 1.00 (3H, s, H-29), 0.93 (3H, s, H-17), 0.88 (3H, s, H-30), 0.82 (3H, s, H-28), 0.74 (3H, s, H-18)；13C-NMR (150 MHz, CDCl3): 35.4 (C-1), 27.7 (C-2), 79.1 (C-3), 39.1 (C-4), 51.1 (C-5), 19.0 (C-6), 29.0 (C-7) , 134.2 (C-8), 132.4 (C-9), 37.4 (C-10), 26.1 (C-11), 32.6 (C-12), 44.0 (C-13), 49.7 (C-14), 29.5 (C-15), 28.0 (C-16), 47.1 (C-17), 20.2 (C-18), 15.7 (C-19), 47.6 (C-20), 182.3 (C-21), 21.7 (C-22), 27.0 (C-23), 123.7 (C-24), 133.3 (C-25), 24.6 (C-26), 17.8 (C-27), 28.2 (C-28), 15.9 (C-29), 25.8 (C-30)。以上數據與文獻對照基本一致[13]，故鑒定該化合物為3βhydroxy-tirucallic acid。

化合物9：白色粉末，HR-ESI-MS/457.367 8 [M＋H]+（C30H49O3計算值為457.368 2）。1H-NMR (600 MHz, CDCl3): 5.19 (1H, t,= 3.6 Hz, H-12), 4.08 (1H, t,= 2.8 Hz, H-3), 2.21 (1H, m, H-11a), 1.99 (1H, m, H-11b), 1.95 (1H, dd,= 14.0, 4.8 Hz, H-18), 1.89 (1H, m, H-21), 1.88 (1H, m, H-22), 1.77 (1H, m, H-21b), 1.71 (1H, m, H-2a), 1.68 (1H, m, H-22b), 1.64 (1H, m, H-6a), 1.59 (1H, m, H-1a), 1.52 (1H, m, H-7a), 1.49 (1H, m, H-2b), 1.44 (1H, m, H-19a), 1.43 (1H, m, H-7b), 1.40 (1H, m, H-6b), 1.37 (1H, m, H-5), 1.35 (3H, s, H-23), 1.32 (1H, m, H-1b), 1.27 (1H, m, H-15a), 1.23 (1H, m, H-16a), 1.21 (1H, m, H-19b), 1.15 (3H, s, H-27), 1.10 (1H, m, H-15b), 1.03 (1H, m, H-9), 1.00 (3H, s, H-26), 0.98 (1H, m, H-16b), 0.88 (3H, s, H-25), 0.87 (3H, s, H-29), 0.87 (3H, s, H-30), 0.83 (3H, s, H-28)；13C-NMR (150 MHz, CDCl3): 33.5 (C-1), 26.1 (C-2), 70.6 (C-3), 47.3 (C-4), 49.0 (C-5), 19.6 (C-6), 32.7 (C-7), 39.7 (C-8), 46.7 (C-9), 37.5 (C-10), 23.6 (C-11), 121.6 (C-12), 145.0 (C-13), 41.8 (C-14), 26.1 (C-15), 26.8 (C-16), 32.7 (C-17), 47.3 (C-18), 46.7 (C-19), 31.0 (C-20), 34.6 (C-21), 37.5 (C-22), 24.0 (C-23), 183.2 (C-24), 13.0 (C-25), 16.6 (C-26), 26.1 (C-27), 28.3 (C-28), 33.5 (C-29), 23.6 (C-30)。以上數據與文獻對照基本一致[14]，故鑒定該化合物為α-boswellic acid。

化合物10：黃色油狀物，HR-ESI-MS/339.190 9 [M＋Na]+（C20H28NaO3計算值為339.193 6）。1H-NMR (600 MHz, CDCl3): 7.1 (1H, m, H-17), 4.82 (1H, d,= 2.1 Hz, H-16), 4.71 (1H, s, H-12b), 4.69 (1H, s, H-12a), 2.45 (1H, dd,= 13.3, 6.3 Hz, H-9a), 2.27 (1H, td,= 9.6, 6.6 Hz, H-1), 2.16 (1H, m, H-9b), 2.04 (1H, m, H-8a), 1.91 (1H, m, H-2a), 1.77 (3H, s, H-20), 1.75 (1H, m, H-3a), 1.68 (1H, m, H-3b), 1.65 (1H, m, H-2b), 1.65 (1H, m, H-15), 1.37 (1H, d,= 10.8 Hz, H-5), 1.34 (3H, s, H-11), 1.29 (1H, m, H-7), 1.07 (1H, m, H-8b), 1.04 (1H, m, H-6), 0.93 (3H, s, H-14)；13C-NMR (150 MHz, CDCl3): 51.7 (C-1), 25.9 (C-2), 41.6 (C-3), 81.2 (C-4), 53.3 (C-5), 25.9 (C-6), 24.4 (C-7), 25.0 (C-8), 38.7 (C-9), 153.6 (C-10), 25.2 (C-11), 106.7 (C-12), 23.3 (C-13), 12.0 (C-14), 65.8 (C-15), 72.5 (C-16), 155.6 (C-17), 143.6 (C-18), 207.1 (C-19), 10.2 (C-20)。以上數據與文獻對照基本一致[15]，故鑒定該化合物為boscarterol O。

化合物11：白色油狀物，HR-ESI-MS/301.212 1 [M＋H]+（C20H29O2計算值為301.216 8）。1H-NMR (600 MHz, CDCl3): 9.39 (1H, s, H-19), 6.81 (1H, d,= 11.2 Hz, H-15), 6.46 (1H, dd,=15.1, 11.2 Hz, H-16), 5.82 (1H, d,= 15.1 Hz, H-17), 4.75 (1H, s, H-12a), 4.73 (1H, s, H-12b), 2.48 (1H, dd,= 13.6, 6.2 Hz, H-9a), 2.26 (1H, td,= 10.6, 6.1 Hz, H-1), 2.07 (1H, t,= 1.8 Hz, H-9b), 1.95 (1H, dq,= 11.6, 6.4 Hz, H-2a), 1.95 (1H, m, H-8a), 1.85 (3H, s, H-20), 1.79 (1H, td,= 13.1, 6.3, 2.4 Hz, H-3a), 1.67 (1H, m, H-2b), 1.61 (1H, td,= 12.8, 11.5, 6.2 Hz, H-3b), 1.52 (1H, t,= 10.8 Hz, H-5), 1.29 (3H, s, H-14), 1.26 (1H, m, H-7), 1.24 (3H, s, H-11), 1.20 (1H, m, H-8b), 1.03 (1H, t,= 11.2, 9.7 Hz, H-6)；13C-NMR (150 MHz, CDCl3): 52.9 (C-1), 26.8 (C-2), 42.1 (C-3), 80.9 (C-4), 53.5 (C-5), 33.0 (C-6), 30.7 (C-7), 24.4 (C-8), 38.3 (C-9), 152.6 (C-10), 26.3 (C-11), 107.4 (C-12), 28.4 (C-13), 12.3 (C-14), 156.0 (C-15), 120.3 (C-16), 150.1 (C-17), 135.1 (C-18), 195.1 (C-19), 9.6 (C-20)。以上數據與文獻對照基本一致[16]，故鑒定該化合物為boscarterol F。

4 抗骨質疏松活性篩選

本實驗對卡氏乳香中分離得到的11個化合物進行了抗骨質疏松活性篩選，采用體外核因子-κB配體受體致活劑（receptor activator of nuclear factor kappa-B ligand，RANKL）誘導小鼠骨髓原代巨噬細胞（bone marrow-derived macrophages，BMMs）形成成熟破骨細胞模型，進行抗骨質疏松活性評估。將細胞接種于96孔板中，接種12 h，整板更換為新的α-MEM完全培養基，實驗設對照組、模型組和給藥組（濃度分別為1、10 μmol/L）。對照組加入巨噬細胞集落刺激因子（macrophage colony-stimulating factor，MCSF）的原代小鼠巨噬細胞，模型組加入誘導因子MCSF以及RANKL的小鼠原代巨噬細胞，給藥組在模型組的基礎上分別加入1、10 μmol/L化合物溶液。每48小時換藥1次，直至模型組出現明顯的細胞融合為止，即得破骨細胞，棄去培養基，加入500 μL預冷的固定劑在冰上靜置10 min，加入2 mL PBS 稀釋固定劑，再除去PBS，加入500 μL乙醇-丙酮（50︰50）溶液，在?30～?20 ℃下培養1 min。用雙蒸水洗3次，加入TRAP染色，在37 ℃培養箱內反應15～45 min至顯色，在顯微鏡下觀察，結果見圖4。由此可知，化合物1、3、6和10在1 μmol/L濃度時具有一定的破骨細胞抑制活性，化合物1在10 μmol/L濃度時具有良好的破骨細胞抑制活性。

圖4 化合物1、3、6和10抑制破骨細胞活性

5 討論

本實驗對乳香乙醇提取物中二氯甲烷部分進行研究，從中分離得到11個化合物，其中化合物1是新化合物，化合物5為首次從乳香中分離得到，化合物2和10為首次從該屬植物中分離得到。對11個化合物進行抗骨質疏松活性篩選，結果顯示化合物1、3、6和10在1 μmol/L濃度時具有一定的破骨細胞抑制活性，化合物1在10 μmol/L濃度時具有良好的破骨細胞抑制活性。本實驗豐富了乳香化學成分和生物活性研究，闡釋了其發揮抗骨質疏松活性的物質基礎，為其進一步開發提供了依據。

利益沖突 所有作者均聲明不存在利益沖突

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A new norditerpenoid from gum resin of

XU Lian-lian, CHEN Zhi-chao, HE Meng-li, YANG Bao, FU Jian-jiang, CHEN Fang-you, LUO Yong-ming

School of Pharmacy, Jiangxi University of Chinese Medicine, Nanchang 330004, China

To study the chemical compositions ofand their anti-osteoporotic activities.The chemical components were separated by silica gel column chromatography, ODS column chromatography and preparative HPLC, and their structures were analyzed by comparison of spectral data and literature.Eleven compounds were isolated from 95% ethanol extract ofand identified as (1,2,8,9)-1,9-epoxy-8-acetoxy-4,5-dioxo-2-cembranene (1),(1,3,7,11,12)-1,12-epoxy-4- methylenecembr-7-ene-3,11-diol (2), boscartin F (3), boscartene K (4), fidmansumbin-13(17)-en-3,16-diene (5), 3α-acetoxyl-7- oxo-tirucalla-8,24-dien-21-oic acid (6), boscartene N (7), 3β-hydroxy-tirucallic acid (8), α-boswellic acid (9), boscarterol O (10), boscarterol F (11).Compound 1 is a new compound, named boscartenoid A, compound 5 is the first time isolated from the species, and compounds 2 and 10 are the fiist time isolated from this genus. Eleven compounds were screened for anti-osteoporotic activity and compounds 1, 3, 6 and 10 were found to have good inhibitory activity against osteoclasts.

Birdw.;terpenoids; norditerpenoids; (1,2,8,9)-1,9-epoxy-8-acetoxy-4,5-dioxo-2-cembranene; boscartenoid A

R284.1

A

0253 - 2670(2023)18 - 5833 - 07

10.7501/j.issn.0253-2670.2023.18.001

2023-05-03

國家自然科學基金項目（82060697）；江西中醫藥大學校級科技創新團隊發展計劃（CXTD22015）；學校博士科研啟動基金項目（2018BSZR003）

徐蓮蓮，碩士研究生在讀。E-mail: xulianliana@163.com

陳芳有，副教授，從事中藥物質基礎研究。Tel: 13037218802 E-mail: tedchenfy@163.com

羅永明，教授，從事中藥物質基礎研究。Tel: 13970058758 E-mail: loym999@163.com

[責任編輯 王文倩]