白菜中19種農藥殘留檢測能力驗證

曾華芳

摘 要：目的：參加福建省農業農村廳組織的2022年度農藥殘留檢測能力驗證項目，評價實驗室白菜中農藥殘留定量檢測能力，提高實驗室檢驗人員檢測水平。方法：根據作業指導書，參照國家標準GB 23200.121—2021中基本操作步驟，采用液相色譜-質譜聯用法對考核樣進行檢測，外標定量法。結果：樣品空白未檢出農藥殘留；樣品白菜中吡唑醚菌酯檢測值為0.17 mg·kg-1。一個月后考核結果為合格，通過能力驗證。結論：參加該次能力驗證活動，發現并解決了檢驗人員在實驗過程中存在的問題，提升了檢驗人員的檢測能力。

關鍵詞：白菜；農藥殘留；檢測能力驗證

Abstract： Objective： To participate in the 2022 pesticide residue detection capacity verification project organized by Fujian Provincial Department of Agriculture and Rural Affairs， to evaluate the laboratorys ability to quantitatively detect pesticide residues in Chinese cabbage， and to improve the testing level of laboratory inspectors. Method： According to the operation guide， referring to the basic operation steps in the national standard GB 23200.121—2021， liquid chromatography-mass spectrometry was used to test the assessment samples with external standard quantitative method. Result： No pesticide residues were detected in the sample blank; the detection value of pyraclostrobin in the sample Chinese cabbage was 0.17 mg·kg-1. The result of the assessment after one month was qualified and passed the proficiency testing. Conclusion： Participating in this detection capacity verification project has identified and solved the problems of the inspectors in the experimental process， and improved the detection capacity of the inspectors.

Keywords： Chinese cabbage; pesticide residues; detection capacity verification

隨著現代農業的高質量發展，農產品生產對農藥、抗生素和激素等外源物質依賴日益加深。農藥在農產品生產過程中使用量較大、農藥不規范使用以及農藥本身質量問題等都是農產品中農藥殘留超標的原因。因此農產品農藥殘留檢測是把控農產品質量和安全的第一道關口，關乎著人們的食品安全、農業產業的發展和社會穩定[1]。本文依托于參加福建省農業農村廳開展的2022年農藥殘留檢測能力驗證項目，介紹了白菜中的農藥殘留量測定能力驗證的整個流程[2]，并總結了能力驗證需要注意的幾點關鍵事項，目的在于加強交流學習，促進縣級檢測中心農產品農藥殘留檢測技術和管理水平的提升。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

能力驗證實驗的盲樣由福建省農產品質量安全檢驗檢測中心統一制備發放，本次盲樣的基質為白菜，樣品處于冷凍勻漿狀態，樣品包括1份約為200 g的考核樣和1份約為200 g的空白樣。

19種農藥標準品（吡蟲啉、啶蟲脒、多菌靈、噻嗪酮、噻菌靈、克百威、嘧菌酯、烯酰嗎啉、噻螨酮、咪鮮胺、吡唑醚菌酯、茚蟲威、滅多威、3-羥基克百威、甲萘威、抗蚜威、戊唑醇、甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽和莠滅凈），質量濃度為100 ?g·mL-1，壇墨質檢標準物質中心；乙腈（HPLC）、甲醇（色譜純）、冰乙酸（AR）和甲酸（HPLC），賽默飛有限公司。

1.2 儀器與設備

LX50-QSight110液相色譜質譜聯用儀（美國珀金埃爾默公司）、電子天平（福州志華科學儀器有限公司）、振蕩器（江蘇省金壇市江南儀器廠）和漩渦儀等。

1.3 方法

1.3.1 驗證項目和方法

本次參加能力驗證的項目共19種，包括吡蟲啉、啶蟲脒、多菌靈、噻菌靈、克百威、嘧菌酯、烯酰嗎啉、咪鮮胺、吡唑醚菌酯、茚蟲威、滅多威、3-羥基克百威、甲萘威、抗蚜威、戊唑醇、甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽、噻嗪酮、噻螨酮、莠滅凈[3]，根據本實驗室資質認定證書附表中的承檢范圍確定。

根據實驗室的實際條件，能力驗證選擇的方法是《食品安全國家標準 植物源性食品中331種農藥及其代謝物殘留量的測定 液相色譜-質譜聯用法》（GB 23200.121—2021）[4]。樣品用有機溶劑乙腈進行提取，所得提取液經凈化進行液質聯用儀上機檢測，外標法定量。

1.3.2 實驗條件

（1）液相色譜條件。色譜柱：C18柱（100 mm×2.1 mm，2.7 μm）；柱溫：35 ℃；流動相：A為2 mmol·L-1甲酸銨-甲酸水溶液，B為2 mmol·L-1甲酸銨-甲酸甲醇溶液；進樣量：2.0 μL；流速：0.25 mL·min-1；流動相梯度洗脫見表1。

（2）質譜條件。離子源類型：ESI電噴霧離子源；正離子掃描方式；多反應監測（MRM）；電噴霧電壓：5 000 V；霧化器溫度：180 ℃；離子源溫度：250 ℃。19種農藥及其代謝物的質譜參數見表2。

1.4 能力驗證測定

1.4.1 樣品領取

樣品的領取是能力驗證較重要的步驟之一。樣品是省廳檢測中心直接用順豐冷鏈速運，檢測人員應隨時跟蹤快遞信息，確保及時收到樣品，收到樣品時應檢查樣品是否存在破裂撒漏等現象，若出現上述現象應立即與省廳檢測中心聯系。

1.4.2 樣品的提取

分別稱取解凍至室溫的樣品白菜和樣品空白各10 g于50 mL離心管中，各3個平行，另外取空離心管做試劑空白。分別加入10 mL乙腈、1顆陶瓷均質子，劇烈振蕩1 min；加入提取鹽包（內含4 g無水硫酸鎂、1 g氯化鈉、1 g檸檬酸鈉二水合物、0.5 g檸檬酸二鈉鹽倍半水合物），劇烈振蕩1 min，4 200 r·min-1離心5 min。

1.4.3 樣品的凈化

從每個離心管吸取上層乙腈溶液5.00 mL，分別加入凈化鹽管（內含除水劑和凈化材料），再經混勻用渦旋儀渦旋1 min，4 200 r·min-1離心5 min，吸取上清液經過濾膜，等候測定。

1.4.4 標準曲線的配制

將上述1.1中的19種農藥標準品（濃度為100 ?g·mL-1）用乙腈配制成濃度為2 ?g·mL-1的19種農藥混標溶液A，再將混標溶液A稀釋成濃度梯度分別為0.005 ?g·mL-1、0.010 ?g·mL-1、0.020 ?g·mL-1、0.050 ?g·mL-1和0.100 ?g·mL-1的混合標準工作溶液，上機測定，建立標曲曲線。

1.4.5 結果上報

上機檢測完畢后，實驗人員應及時打印檢測結果并分析數據得到結果，收集色譜圖以及做好原始記錄的完善，結果數據分析確認無誤后，在規定的時間內提交驗證結果以及報送圖譜與原始記錄等，然后針對此次能力驗證進行全面梳理，及時進行分析總結與整理歸檔工作。

2 結果與分析

2.1 定性和定量檢測結果

為防止待測液目標未知物衰減，樣品處理結束后立即安排上機檢測，允許的情況下，每個樣品上機重復測定3次以上，減少系統誤差。初檢結果顯示，樣品空白未檢出農藥殘留；樣品白菜檢測出含有吡唑醚菌酯，其余18種農藥均未檢出，檢出結果如表3所示。

2.2 回收率試驗

根據初檢結果，樣品白菜含有的吡唑醚菌酯平均濃度為0.202 mg·kg-1。稱取3個空白樣品10 g，分別加入1 mL 混標溶液A以及9 mL的乙腈，剩余步驟與1.4.2、1.4.3步驟一致，獲得加標待測液，再進行上機測定，計算回收率[回收率=（加標濃度-初檢濃度）/質控添加濃度×100%]，結果如表4所示。

2.3 能力驗證結果

通過對樣品空白、樣品白菜以及加標回收質控樣進行上機檢測分析，質控回收率滿足70%～120%這一要求的范圍。為使結果更為準確，將樣品檢出值經質控回收率矯正后上報結果，即考核盲樣中檢出農藥及含量：樣品空白為未檢出；樣品白菜中檢出吡唑醚菌酯檢測值為0.17 mg·kg-1，結果上報1個月后收到反饋結果為合格，通過此次能力驗證。

3 農殘檢測能力驗證的注意事項

3.1 樣品保存

收到的樣品處于冷凍狀態，樣品可能存在水和冰晶，此時應重新勻漿再取樣檢測。

3.2 稱量

稱量樣品時應注意是否具有代表性，盡量用比較大的稱量勺，減少樣品間的差異性；瓜果類冷凍蔬菜樣品，需要在完全解凍后再均勻混合處理進行稱量，以保證檢測數據的準確性[5]。稱量樣品時應注意是否過度解凍；稱量之前應該充分攪拌；稱量時盡量使用開口較大的容器，可以避免樣品粘在容器邊緣；稱量前應規劃好樣品的用量，防止實驗過程中出現過失時需要重新稱取樣品而樣品量不夠的情況。

3.3 提取

根據實驗標準操作，應注意樣品是深綠色時，如青菜椒、菠菜、菜心等，可以在均質前加入石墨粉先將大部分色素去除，再進行提取；樣品為汁液時，如桃汁、菠菜汁等，這類樣品含水分多且呈酸性，建議在稱取之前先將pH調制中性，再進行提取。

3.4 標準品配制

（1）標準品應按說明書要求來存放。濃度為500～1 000 mg·L-1的標準品，一般存放溫度在-18 ℃左右，有效期為6個月；濃度為1～10 mg·L-1的標準品，一般存放溫度在0～5 ℃，有效期為1個月；濃度為0.5～1.0 mg·L-1的標準品，一般存放溫度在0～5 ℃，有效期為2～3周。

（2）實驗室管理標準溶液應該做到規范并且可追溯，應建立標準物質管理臺賬和配制領用臺賬。每種標準品都能溯源到所購買標準品的標準證書。

（3）標準品在配制時應逐級稀釋，做到現配現用，應使用在保質期內且新開封的標準品，避免標準品放置時間過久出現濃度變化的情況。

（4）當標液濃度與樣品的濃度相差較大時若使用單點校準，容易導致結果偏差較大，因此本實驗采用五點校準。

3.5 檢測過程中質量控制

①先做試劑空白，根據空白值高低來判斷試劑是否有問題或者是器皿是否被污染。②質量控制加標時盡量使用混標進行添加，避免因添加溶劑體積過大而對結果造成影響。③回收率試驗時，可用樣品空白進行添加，添加的濃度應盡量與考核樣品初步定量一致，以確保數據結果的準確性。

3.6 儀器設備維護

在接到能力驗證通知時，檢測人員應對儀器設備進行全方位維護[5]，對儀器狀態有清晰的把握，及時確定儀器設備的準確度、靈敏度、穩定性等各項關鍵參數。可將新配制的標準溶液進行上機測定，與之前記錄的標準溶液響應值進行比較，響應值一致，則表明儀器設備正常，否則需一一排查是否需要更換色譜柱、更換進樣隔墊、清洗離子源等，最終使設備處于最佳運行狀態。

3.7 數據處理

（1）在日常實驗中，需要加強實驗的前處理過程，否則容易出現結果不平行、回收率偏高或偏低等。如若出現兩個樣品結果不平行的情況，首先要排除儀器問題，再排查前處理環節問題。

（2）原始記錄應及時填寫，不能補記；所填寫的信息應該完整并且可追溯；填寫有效數字的數位要正確，并且使用國家規定的法定計量單位；有效數字計算應符合有效數字運算規定；數值修約應符合GB/T 8170—2008標準的規定；農藥殘留和農藥污染物檢測的計算結果一般保留2位有效數字，若含量超過1 mg·L-1時，保留3位有效數字。

4 結論

農藥殘留能力驗證結果是否合格直接反映了實驗室是否具備農藥殘留檢測能力。要想順利通過能力驗證，檢驗人員應夯實基本功，規范各項操作規程，不斷分析總結，提升檢測水平，最終為農產品質量安全以及人們的身體健康提供保障。本文以福建省農業農村廳組織的農產品農藥殘留能力驗證為例，分享整個實踐過程中應注意的各項關鍵點，旨在于加強交流學習，為農產品農藥殘留檢測機構提高能力驗證水平提供參考和借鑒。

參考文獻

[1]郭華.草萘胺對土壤環境的影響以及農藥多殘留分析方法研究[D].南京：南京農業大學，2007.

[2]張文靜.西葫蘆中3種有機磷農藥殘留檢測能力驗證實踐[J].農業科技與信息，2022（22）：90-94.

[3]鮑小明，胡濤，胡春.淺析寧夏農產品檢測技術能力驗證工作[J].寧夏農林科技，2020，61（11）：23-24.

[4]國家衛生健康委員會，農業農村部，國家市場監督管理總局.食品安全國家標準 植物源性食品中331種農藥及其代謝物殘留量的測定 液相色譜-質譜聯用法：GB 23200.121—2021[S].北京：中國標準出版社，2021.

[5]陳世武.農產品農藥殘留檢測能力驗證存在的問題及關鍵控制點[J].農業工程技術，2023，43（2）：79-80.