細胞DNA定量、HR-HPV、AFP等多指標聯合檢測在宮頸癌篩查中的應用價值*

羅含荑 郎 琳 徐文敏

重慶大學附屬腫瘤醫院 重慶市腫瘤研究所 重慶市腫瘤醫院健康體檢與腫瘤篩查中心,重慶市 400030

宮頸癌與女性生殖系統健康密切相關,是危害女性生命安全的婦科腫瘤疾病之一。宮頸癌的發病過程漫長,包含從宮頸上皮內癌變進展至原位癌、早期癌、浸潤癌的演變,因此,對宮頸癌進行早期篩查是盡早進行干預,提高患者生存率的關鍵[1]。細胞DNA定量分析技術指的是通過對患者DNA水平進行檢測,了解癌癥細胞相關的遺傳基因變異的過程,對診斷腫瘤的良惡性具有一定的臨床價值[2]。人類乳頭瘤病毒(HPV)是引起宮頸癌并發的重要因素,持續的HR-HPV是大多宮頸癌及癌前病變患者的明顯特點,與病變的發生息息相關[3]。AFP屬于常見的腫瘤標志物,其水平表達異常與多種腫瘤疾病的發生、轉移等有關[4]。基于此,本研究通過多種檢測方式對宮頸癌進行篩查檢測,旨在尋求更為行之有效的臨床檢測方式,為女性健康提供科學意見。

1 資料與方法

1.1 一般資料 回顧性選取2021年1月—2022年1月在本院進行早期宮頸癌篩查的265例高危婦女作為研究對象,年齡21～63歲,平均年齡(41.26±9.20)歲,存在白帶異常、陰道出血等情況。納入標準:(1)存在宮頸炎癥狀;(2)檢查前24h內無性生活;(3)非月經期;(4)臨床資料完整;(5)無精神疾病;(6)未行子宮切除術。排除標準:(1)其他惡性腫瘤疾病;(2)嚴重的臟器功能異常;(3)妊娠、哺乳狀態中;(4)無性生活史;(5)宮頸手術史。另選取同期在本院進行檢查的100例宮頸良性疾病患者作為對照組,年齡22～65歲,平均年齡(41.38±9.61)歲。

1.2 方法

1.2.1 細胞DNA定量:患者均制作宮頸細胞涂片,采用Feulgen染色法并進行細胞DNA定量分析,通過貝克曼z2全自動細胞像分析儀對涂片上約8 000個細胞核進行掃描,通過分析每個細胞核超過100個參數的特征值進行自動分類。評價標準:可疑,增生細胞數占總數5%～10%或DNA指數≥2.5的倍體異常細胞1～2個,囑咐患者6個月后復查;陰性,檢查中的細胞大多為正常二倍體細胞,DNA指數<2.5,無倍體異常細胞,增生細胞數占總數<5%,囑咐患者定期采取宮頸癌篩查;陽性,增生細胞數占總數>10%或>3個DNA指數≥2.5的倍體異常細胞,囑咐患者采取活檢或陰道鏡檢查。

1.2.2 HR-HPV檢查:使用采樣刷在宮頸口取樣,逆時針旋轉3周并停留10s,取樣后放置在1ml保存液中,將其置于低溫環境下保存待測,對13種高危型HPV進行檢測,檢測樣本的RLU/CO≥1.0則為陽性。

1.2.3 病理學檢測:在陰道鏡輔助下進行,依據《乳腺與女性生殖系統腫瘤病理與遺傳學》[5]中的宮頸癌病理學診斷標準,宮頸上皮內瘤變1級以上則為陽性。

1.2.4 腫瘤標志物:抽取所有患者入院清晨空腹肘靜脈血3ml,通過3 000r/min 離心后取上層血清待測。使用放射免疫方法測定AFP水平,采用酶免疫點印跡化學發光法檢測TSGF、TK1水平,所有操作過程按照說明書由同一組檢驗人員嚴格執行。

2 結果

2.1 不同檢測方式與病理學結果對比 病理學檢測結果顯示,265例患者中陽性153例、陰性112例。細胞DNA定量分析結果顯示,陽性158例、陰性107例;HR-HPV檢查結果顯示,陽性156例、陰性109例;兩者聯合檢查結果顯示,陽性154例、陰性111例。見表1。

表1 不同檢測方式與病理學結果對比(n)

2.2 細胞DNA定量分析、HR-HPV與兩者聯合檢測宮頸癌的準確性分析 細胞DNA定量分析+HR-HPV對宮頸癌診斷的靈敏度、特異度、陽性預測值、準確度顯著高于細胞DNA定量分析(P<0.05),特異度、陽性預測值、陰性預測值、準確度顯著高于HR-HPV,差異統計學意義(P<0.05),見表2。

表2 細胞DNA定量分析、HR-HPV與兩者聯合檢測宮頸癌的準確性分析(%)

2.3 兩組患者AFP、TSGF、TK1水平比較 研究組AFP、TSGF、TK1水平顯著高于對照組(P<0.05),見表3。

表3 兩組患者AFP、TSGF、TK1水平比較

2.4 AFP、TSGF、TK1水平及聯合診斷對于宮頸癌的預測價值分析 ROC分析結果顯示,AFP、TSGF、TK1三者聯合預測宮頸癌的診斷價值顯著高于單獨檢測(P<0.05),見圖1、表4。

圖1 AFP、TSGF、TK1水平及聯合診斷對于宮頸癌預測的ROC曲線

表4 AFP、TSGF、TK1水平及聯合診斷對于宮頸癌的預測價值分析

3 討論

宮頸癌病變是多種因素共同影響下的復雜病理過程,對其疾病進程中生物學機制及有關指標進行探究對宮頸癌早期診治具有重要意義[6]。宮頸癌患者在患病早期并無顯著的臨床特征,大多患者不易察覺,且存在誤診或漏診的狀況,部分患者在確診時已步入中晚期階段,導致預后狀況差,危及生命安全。隨著醫學檢測技術的進步,臨床已具備多種檢測方式用于早期的宮頸癌篩查中[7]。本研究將細胞DNA定量分析技術、HR-HPV檢查、腫瘤標志物等應用在宮頸癌篩查中,展現出了較好的預測價值。

本研究265例患者中,陽性153例、陰性112例,細胞DNA定量分析聯合HR-HPV檢查宮頸癌的準確性及特異性顯著高于單一采用細胞DNA定量分析或HR-HPV檢查,且陰性預測值也較高。究其原因在于:細胞學檢查在宮頸癌篩查中發揮重要基礎作用,但該種檢測方式對于操作者的要求較高,若操作不合格可能導致檢查假陽性與假陰性的概率較高[8]。細胞DNA定量分析技術通過對患者的DNA情況進行檢查,把握與患者機體腫瘤細胞有關的變異遺傳基因,從而達到篩查宮頸癌細胞的目的。對于高度鱗狀上皮內病變程度嚴重及宮頸鱗狀細胞癌患者來說,該技術檢測到DNA倍體異常細胞的概率更大[9]。細胞發生癌變主要是細胞迅速轉移及增殖導致的,故對細胞核內的DNA情況進行檢查,能夠有效判別是否存在惡性癌變的可能,當患者機體產生異倍體細胞時,染色體的數量與結構顯著變化,且可以將其作為早期判斷的依據,異倍體細胞的表達量越高則癌癥惡性程度越嚴重,且分化程度越低。除此之外,細胞DNA定量分析技術對于操作者的要求不高,實施過程較為便捷,適用于臨床篩查宮頸癌疾病中。HPV感染是宮頸癌發生的關鍵,目前研究指出,有超過30種HPV與宮頸病變密切相關,依據不同致病的能力分為低危與高危型,低危型HPV大多是良性病變,HR-HPV則與宮頸癌前病變或宮頸癌本身關聯緊密。大多患者在性生活穩定或頻率較高時,會導致HR-HPV的感染率提高[10],病毒長期的存在在體內導致惡性可能上升。故采取HR-HPV是對患者病變進行判別的有效方式,且患者病變等級越高,篩查準確率越高。同時,HR-HPV會影響DNA倍體異常,因此,HR-HPV聯合細胞DNA定量技術更能夠提高宮頸癌病變篩查的準確性,為患者臨床診斷及治療提供科學意見。另外,研究組AFP、TSGF、TK1水平較對照組高,且聯合三項指標能夠有效提高宮頸癌的診斷價值,這可能是因為:AFP由肝細胞及卵黃囊合成,在成年人體內的含量很低,健康機體內難以被檢測,但其與多種腫瘤疾病的發生有關[11],宮頸癌患者疾病進展時會分泌出大量腫瘤分泌物,患者機體炎性反應加劇,導致肝臟水平出現異常,故AFP含量上升;TSGF屬于惡性腫瘤進展中有關的糖類及代謝物質,宮頸癌病變過程中患者腫瘤及相關毛細血管擴增,導致TSGF的釋放,表達水平提高;TK1屬于特殊激酶,參與癌變細胞DNA的合成過程,腫瘤的發生預示著大量新生血管的生成,此為導致TK1水平提升的關鍵[12]。故聯合以上三種腫瘤標志物指標進行檢測,能夠有效提高宮頸癌的鑒別價值。

綜上所述,細胞DNA定量聯合HR-HPV檢查、AFP等多種腫瘤標志物指標聯合檢測能夠有效提高宮頸癌篩查的準確性,為早期預防提供有效依據。但本研究還存在一些局限之處,例如樣本的數量不大且未對宮頸癌具體情況進行細化分析,在今后的研究中將會進一步細化研究內容,使研究結果更具有客觀性和科學性。