血清Caspase-3、Lp-PLA2水平與突發(fā)性耳聾病情嚴(yán)重程度和預(yù)后的關(guān)系

崔彥儒，高偉，鄭艷秋

內(nèi)蒙古醫(yī)科大學(xué)附屬醫(yī)院耳鼻咽喉頭頸外科，呼和浩特 010059

突發(fā)性耳聾（SD）是指72 h內(nèi)突然發(fā)生，沒有可識(shí)別原因，且至少兩個(gè)相鄰頻率聽力下降≥20 dBHL的感音神經(jīng)性聽力損失，可伴有頭暈、耳鳴、耳脹等不適感［1］。近年來，SD發(fā)病率呈上升趨勢，盡管SD具有自愈傾向，但部分患者恢復(fù)程度不一，可能出現(xiàn)不可逆的聽力損失，影響患者生活質(zhì)量［2］。研究表明，耳蝸細(xì)胞凋亡和炎癥反應(yīng)參與SD發(fā)生、發(fā)展［3］。半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3（Caspase-3）是一種通過裂解細(xì)胞脫氧核糖核酸促進(jìn)細(xì)胞凋亡的蛋白酶［4］。據(jù)報(bào)道，Caspase-3在順鉑誘導(dǎo)的耳聾小鼠耳蝸組織內(nèi)表達(dá)上調(diào)［5］。脂蛋白相關(guān)磷脂酶A2（Lp-PLA2）是一種磷脂酶，能水解氧化磷脂參與炎癥反應(yīng)［6］。Lp-PLA2基因多態(tài)性與SD有關(guān)［7］。本研究探討血清Caspase-3、Lp-PLA2水平與SD病情嚴(yán)重程度和預(yù)后的關(guān)系，以期為SD防治提供參考。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選取2019年1月—2022年8月我院收治的100例SD患者（SD組），其中男59例、女41例，年齡20～81（49.46 ± 13.63）歲；體質(zhì)量指數(shù)18.70～28.43（22.36 ± 1.73）kg/m2；癥狀：耳鳴86例、暈眩31例、耳脹27例；聽力曲線分型［8］：低頻下降型33例、高頻下降型26例、平坦下降型33例、全聾型8例。納入標(biāo)準(zhǔn)：①符合《突發(fā)性聾診斷和治療指南（2015）》［8］診斷標(biāo)準(zhǔn)；②年齡≥18歲；③單耳SD。排除標(biāo)準(zhǔn)：①合并偏頭痛、梅尼埃病、傳導(dǎo)性聽力損失、慢性中耳炎、聽覺創(chuàng)傷等其他耳部疾病；②先天遺傳聾或耳科手術(shù)史；③近期急慢性感染或既往心力衰竭、中風(fēng)；④合并造血系統(tǒng)、免疫系統(tǒng)、神經(jīng)系統(tǒng)損害、嚴(yán)重心肝腎功能損害、惡性腫瘤；⑤近3個(gè)月有免疫抑制劑、抗生素使用史；⑥復(fù)發(fā)性SD。參考全球疾病負(fù)擔(dān)聽力損失專家組定義［9］將SD患者分為輕度聽力損失20例［純音平均聽閾（PTA）：20～40 dB‐HL］、中度聽力損失43例（PTA：41～60 dBHL）、重度聽力損失25例（PTA：61～80 dBHL）、極重度聽力損失12例（PTA：>81 dBHL）。SD患者均參考指南［8］根據(jù)不同聽力損失情況接受治療，并根據(jù)臨床療效分為預(yù)后不良（無效）38例（預(yù)后不良組）、預(yù)后良好（痊愈+顯效+有效）62例（預(yù)后良好組）。另選取同期60例體檢健康且聽力正常者為對(duì)照組，其中男35例、女25例，年齡18～78（50.14 ± 10.75）歲；體質(zhì)量指數(shù)18.53～26.87（22.42 ± 1.62）kg/m2。兩組一般資料比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P均>0.05）?；颊呒凹覍賹?duì)本研究知情并簽署同意書，且經(jīng)醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)（審批編號(hào)：2019-0243）。

1.2 血清Caspase-3、Lp-PLA2檢測 收集SD組入院后次日和對(duì)照組體檢時(shí)采集3 mL靜脈血，3 000 r/min離心15 min（離心半徑10 cm），取上層血清，采用酶聯(lián)免疫吸附法（北京百奧萊博科技有限公司，編號(hào)：ZN2053-OJR、ZN2369-LZH）檢測Caspase-3、Lp-PLA2。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS28.0統(tǒng)計(jì)軟件。計(jì)量資料符合正態(tài)分布以表示，兩組間比較采用t檢驗(yàn)，多組間比較采用F檢驗(yàn)；不符合正態(tài)分布計(jì)量資料以M（P25，P75）表示，兩組間比較采用U檢驗(yàn)，多組間比較采用H檢驗(yàn)，組間兩兩比較采用Bonferroni校正；計(jì)數(shù)資料以例（%）表示，比較采用χ2檢驗(yàn)；Spearman相關(guān)性分析SD患者血清Caspase-3、Lp-PLA2水平與PTA的相關(guān)性；多因素Logistic回歸分析SD患者預(yù)后不良的影響因素；受試者工作特征（ROC）曲線分析血清Caspase-3、Lp-PLA2水平對(duì)SD患者預(yù)后不良的預(yù)測價(jià)值。P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 SD組與對(duì)照組血清Caspase-3、Lp-PLA2水平比較 SD組與對(duì)照組血清Caspase-3水平分別為17.32（12.56，21.77）、10.86（9.59，11.44）pg/mL，Lp-PLA2水平分別為（18.36 ± 3.85）、（13.12 ±2.44）ng/mL，SD組血清Caspase-3、Lp-PLA2水平高于對(duì)照組（P均<0.05）。

2.2 不同病情嚴(yán)重程度SD患者血清Caspase-3、Lp-PLA2水平比較 輕度、中度、重度、極重度聽力損失者血清Caspase-3、Lp-PLA2水平依次升高（P均<0.05）。見表1。

表1 不同病情嚴(yán)重程度SD患者血清Caspase-3、Lp-PLA2水平比較

2.3 SD患者血清Caspase-3、Lp-PLA2水平與PTA的相關(guān)性 SD患者PTA為22～96［52.00（44.00，70.00）］dBHL，Spearman相關(guān)性分析顯示，SD患者血清Caspase-3、Lp-PLA2水平與PTA呈正相關(guān)（r分別為0.816、0.848，P均<0.05）。

2.4 SD患者預(yù)后不良的影響因素 預(yù)后不良組年齡大于預(yù)后良好組，PTA、全聾型比例和血清Caspase-3、Lp-PLA2水平高于預(yù)后良好組（P均<0.05），見表2。以年齡、PTA、全聾型（是為“1”，否為“0”）、Caspase-3、Lp-PLA2為自變量，預(yù)后不良（是為“1”，否為“0”）為因變量。多因素Logistic回歸分析顯示，年齡增加、PTA升高、全聾型、Caspase-3升高、Lp-PLA2升高為SD患者預(yù)后不良的獨(dú)立危險(xiǎn)因素（P均<0.05）。見表3。

表2 預(yù)后不良組與預(yù)后良好組臨床資料比較

表3 影響SD患者預(yù)后不良的多因素Logistic回歸分析

2.5 血清Caspase-3、Lp-PLA2水平對(duì)SD患者預(yù)后不良的預(yù)測價(jià)值 ROC曲線分析顯示，血清Caspase-3、Lp-PLA2水平聯(lián)合預(yù)測SD患者預(yù)后不良的曲線下面積（AUC）大于Caspase-3、Lp-PLA2單獨(dú)預(yù)測（Z分別為3.038、3.174，P均<0.05）。見表4。

表4 血清Caspase-3、Lp-PLA2水平對(duì)SD患者預(yù)后不良的預(yù)測價(jià)值

3 討論

SD是耳鼻喉科的常見急癥，男女發(fā)病率相似，以單側(cè)發(fā)病為主，雙側(cè)較少見，目前病因尚不完全明確，多數(shù)學(xué)者認(rèn)為與睡眠障礙、生活不規(guī)律、情緒波動(dòng)、壓力增加、精神緊張等有關(guān)［10］。盡管近年來局部和全身的激素、抗病毒、高壓氧、改善血液流變學(xué)藥物、抗病毒藥物、中耳瘺管修補(bǔ)術(shù)等治療方法不斷完善，但SD病因不明導(dǎo)致治療上仍缺乏針對(duì)性，使得不同患者預(yù)后存在較大差異［11］。因此有必要探索SD相關(guān)生物標(biāo)志物，為SD治療和預(yù)后評(píng)估提供理論依據(jù)。

SD發(fā)病確切機(jī)制尚不明確，目前研究認(rèn)為與炎癥反應(yīng)、病毒感染、內(nèi)耳微循環(huán)障礙、免疫性疾病等密切相關(guān)［12］。近年研究發(fā)現(xiàn)，耳蝸毛細(xì)胞凋亡也參與SD發(fā)生、發(fā)展，耳蝸毛細(xì)胞是聽覺感受器，與內(nèi)耳中管狀器官耳蝸中的神經(jīng)相連，耳毒性藥物、炎癥、噪聲暴露、年齡增長老化等因素均可導(dǎo)致毛細(xì)胞不可逆損害，當(dāng)眾多因素引起耳蝸毛細(xì)胞凋亡則會(huì)阻礙信號(hào)傳至中樞，導(dǎo)致SD發(fā)生［13］。胱天蛋白酶是一組以酶原形式存在于細(xì)胞質(zhì)內(nèi)并介導(dǎo)細(xì)胞凋亡的半胱氨酸蛋白酶，Caspase-3是該家族內(nèi)介導(dǎo)細(xì)胞凋亡的關(guān)鍵執(zhí)行分子，在細(xì)胞凋亡早期被激活，能裂解相應(yīng)的胞質(zhì)胞核底物加速細(xì)胞凋亡［14］。HAYASHI等［15］實(shí)驗(yàn)報(bào)道，病毒感染能通過腫瘤壞死因子相關(guān)的凋亡誘導(dǎo)配體誘導(dǎo)耳蝸毛細(xì)胞Caspase-3表達(dá)，抑制Caspase-3表達(dá)能抑制耳蝸毛細(xì)胞凋亡。XIE等［16］實(shí)驗(yàn)報(bào)道，Caspase-3在脂多糖誘導(dǎo)的豚鼠聽力損失模型中大量表達(dá)，抑制耳蝸毛細(xì)胞內(nèi)Caspase-3表達(dá)能改善豚鼠聽力。這些研究均提示Caspase-3與體力損失密切相關(guān)。本研究結(jié)果顯示，SD患者血清Caspase-3水平升高，并隨著聽力損失程度增加而升高，說明血清Caspase-3水平升高參與SD發(fā)生、發(fā)展，分析原因可能是SD患者耳蝸毛細(xì)胞凋亡導(dǎo)致Caspase-3被釋放入血，引起血清Caspase-3水平升。而Caspase-3作為細(xì)胞凋亡的關(guān)鍵執(zhí)行分子，其水平升高加劇耳蝸毛細(xì)胞凋亡，導(dǎo)致聽力損失加重［14-16］。

炎癥反應(yīng)是SD發(fā)生發(fā)展的關(guān)鍵機(jī)制之一，不僅能直接破壞耳蝸內(nèi)毛細(xì)血管完整性引起聽力障礙，還能引起內(nèi)耳局部組織細(xì)胞缺血、缺氧和炎癥，通過內(nèi)耳微循環(huán)障礙減少內(nèi)耳血供，導(dǎo)致聽力障礙［17］。Lp-PLA2是巨噬細(xì)胞和中性粒細(xì)胞等免疫細(xì)胞分泌的一種血管特異性炎癥因子，能通過其酶活性水解低密度脂蛋白中氧化磷脂，形成氧化游離脂肪酸和溶血卵磷脂等脂類促炎物質(zhì)，這些物質(zhì)又能通過趨化炎癥細(xì)胞生成更多促炎物質(zhì)，參與炎癥發(fā)生、發(fā)展［18］。近年研究證實(shí)，SD的發(fā)病機(jī)制與心腦血管疾病相似［3］。Lp-PLA2作為血管特異性炎癥因子，已被證實(shí)與冠心病、腦卒中等心腦血管疾病相關(guān)［19］。同時(shí)有研究發(fā)現(xiàn)，Lp-PLA2基因多態(tài)性參與SD發(fā)生［7］。本研究結(jié)果顯示，SD患者血清Lp-PLA2水平升高，并隨著聽力損失程度增加而升高，說明血清Lp-PLA2水平升高參與SD發(fā)生、發(fā)展，分析原因可能是SD患者耳蝸炎癥反應(yīng)導(dǎo)致Lp-PLA2升高。Lp-PLA2升高能激活血管壁炎癥通路，促進(jìn)炎癥反應(yīng)，增加耳蝸內(nèi)毛細(xì)血管破壞，導(dǎo)致聽力損失加重。同時(shí)Lp-PLA2還可能損傷血管內(nèi)皮導(dǎo)致管腔狹窄或堵塞，可能導(dǎo)致內(nèi)耳微循環(huán)障礙，造成內(nèi)耳局部組織細(xì)胞缺血、缺氧、水腫等，加重聽力損失［20］。

本研究通過分析SD患者預(yù)后不良影響因素發(fā)現(xiàn)，血清Caspase-3、Lp-PLA2水平升高為SD患者預(yù)后不良的獨(dú)立危險(xiǎn)因素，提示二者可能成為SD患者預(yù)后不良的輔助預(yù)測指標(biāo)，分析原因是Caspase-3、Lp-PLA2均參與SD發(fā)生、發(fā)展，血清Caspase-3、Lp-PLA2水平升高反映聽力損失程度更嚴(yán)重，因此預(yù)后更差。本研究結(jié)果還發(fā)現(xiàn)，年齡增加、PTA升高和全聾型能獨(dú)立影響SD患者預(yù)后，分析原因是隨著年齡增長，血管壁順應(yīng)性、微循環(huán)血液流變學(xué)和內(nèi)耳聽覺功能退化，影響聽力恢復(fù)，因此療效更差［21］；PTA升高和全聾型反映SD患者聽力損失程度更嚴(yán)重，因此預(yù)后更差。繪制ROC曲線發(fā)現(xiàn)，血清Caspase-3、Lp-PLA2水平分別為16.82 pg/mL、20.92 ng/mL時(shí)，預(yù)測SD患者預(yù)后不良的AUC分別為0.784、0.780，血清Caspase-3、Lp-PLA2水平聯(lián)合預(yù)測SD患者預(yù)后不良的AUC增至0.901，說明血清Caspase-3、Lp-PLA2水平可能成為SD患者預(yù)后不良的輔助預(yù)測指標(biāo)，且二者聯(lián)合能提升預(yù)測價(jià)值。

綜上所述，SD患者血清Caspase-3、Lp-PLA2水平明顯升高，與SD患者聽力損失加重和預(yù)后不良密切相關(guān)，可能成為SD患者預(yù)后不良的輔助預(yù)測指標(biāo)，且二者聯(lián)合能提升預(yù)測價(jià)值。