兒童吉蘭-巴雷綜合征譜系疾病變異型免疫功能變化

孫小蘭,黃志新,黃文劍,鐘建民

(江西省兒童醫院 a.神經內科; b.信息科,南昌 330006)

吉蘭-巴雷綜合征(GBS)譜系疾病是一類包括經典型GBS以及變異型急性免疫介導性的中樞及周圍神經疾病。全球GBS的年發病率為1/10 萬～2/10 萬[1],兒童年發病率為0.34/10萬～1.34/10萬[2],而我國GBS年發病率約為0.66/10萬[3]。變異型的發病率國內外未見明確的報道。2014年8月,GBS分類專家組[4]提出GBS和Miller Fisher綜合征(MFS)的新分類和診斷標準,將GBS、MFS和Bickstaffer腦干腦炎(BBE)作為一個疾病譜。近年來國內外也有新的GBS譜系疾病及其各亞型的研究[5-6]。目前,GBS譜系疾病變異型的發病機制一般認為由細胞免疫與體液免疫共同參與,但機體免疫功能如何影響該病變異型的發生發展尚不清楚。本文通過分析變異型患兒淋巴細胞亞群、免疫球蛋白及相關細胞因子的變化,探討兒童GBS譜系疾病變異型的發病免疫機制,為臨床診治、判斷疾病預后及探討新的治療方法提供理論依據。

1 資料與方法

1.1 一般資料

收集2018—2021年于江西省兒童醫院就診的變異型GBS譜系疾病患兒20例(變異型組)及經典型GBS譜系疾病患兒20例(經典型組),既往無自體免疫病或無服用激素等免疫抑制劑史,均符合2014年GBS分類專家組提出的診斷標準[4]。選取同期本院兒?？平】刁w檢兒童20例為對照組,均無自身免疫性疾病,無感染、手術、外傷、精神創傷等病史。變異型組,男8例,年齡(4.85±1.13)歲;女12例,年齡(4.81±1.10)歲。經典型組,男9例,年齡(5.21±1.08)歲;女11例,年齡(4.92±1.02)歲。對照組,男8例,年齡(5.09±1.10)歲;女12例,年齡(4.98±1.07)歲。3組年齡、性別比較差異無統計學意義(P>0.05),具有可比性。所有患兒均在其父母知情同意的情況下參與本研究,并得到醫院醫學倫理委員會批準。

1.2 檢測方法

抽取外周靜脈血行相關指標檢測。用流式細胞術測定外周血淋巴細胞亞群水平(CD16+56、CD19+、CD4+、CD8+),流式細胞儀(FACSCanto)和試劑盒購自美國BD公司。用化學發光法測定相關細胞因子(IL-2、IL-6、IL-8、IL-10、TNF-α)水平,IMMULITE1000化學發光免疫分析儀和試劑盒購自德國西門子公司。用免疫比濁法測定血清免疫球蛋白(IgM、IgG、IgA),ADVIA2400免疫分析儀購自德國西門子公司,試劑購自重慶博士泰生物有限公司。

1.3 統計學方法

數據采用SPSS 21.0軟件進行分析。正態分布的計量資料采用t檢驗進行比較,計數資料的比較采用χ2檢驗或Fisher精確概率法;非正態分布數據的比較采用Wilcoxon符號秩和檢驗。以P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 淋巴細胞亞群水平比較

變異型組CD16+56、CD4+、CD8+低于對照組(P<0.05);變異型組外周血淋巴細胞亞群數與經典組比較,差異無統計學意義(P>0.05)。見表1。

表1 3組淋巴細胞亞群的水平比較

2.2 細胞因子水平比較

變異型組IL-2、IL-8、TNF-α高于對照組(P<0.05);變異型組IL-2、IL-8高于經典型組(P<0.05)。見表2。

表2 3組細胞因子的水平及比較

2.3 免疫球蛋白水平比較

變異型組IgG高于對照組(P<0.05);變異型組與經典型組IgG、IgM、IgA比較差異無統計學意義(P>0.05),見表3。

表3 3組免疫球蛋白的水平比較

3 討論

兒童GBS譜系疾病是由細胞免疫和體液免疫共同參與的中樞及周圍神經系統自身免疫性疾病,自體免疫功能的紊亂對該病的發生起主要作用。機體免疫功能的維持與T(CD3+)、B(CD19+)和NK(CD16+56)淋巴細胞有關。Th(CD4+)細胞分為Th1和Th2細胞,Th1細胞主要參與細胞免疫及遲發型超敏反應;Th2細胞主要與體液免疫有關[7]。Ts(CD8+)細胞為細胞毒性T細胞,對體液免疫和細胞免疫起負相調節作用。B(CD19+)淋巴細胞可分化為漿細胞,主要維持機體的體液免疫作用。NK(CD16+56)細胞作為免疫細胞,在特定條件下參與自身免疫性疾病的發生。目前發現機體免疫功能失衡與多種神經系統免疫性疾病有關,GBS譜系疾病作為神經系統免疫性疾病的一類,免疫失衡在其發生發展中起重要作用,本研究結果顯示,兒童GBS譜系疾病變異型患者CD16+56、CD4+、CD8+水平低于對照組,IgG水平高于對照組(均P<0.05),提示兒童GBS譜系疾病變異型患者細胞免疫功能與體液免疫功能均出現紊亂,參與疾病的發生發展,鑒于此結果,對于GBS譜系疾病變異型患兒的治療建議參考經典型GBS治療[8],首選免疫球蛋白治療,調節免疫失衡,改善預后。

IL-2是T細胞生長因子,具有促進T、B淋巴細胞增殖、分化和增強NK細胞的細胞毒性作用,抗原刺激T淋巴細胞產生大量IL-2,血清IL-2含量變化,代表著T細胞增殖和功能的強弱。YOSHII等[9]研究發現,急性期GBS患者在接受治療前血清中IL-2水平低于對照組,經過治療后,血中IL-2水平有所上升,但本研究發現,變異型組血清IL-2水平高于對照組及經典型組,由此推測IL-2參與了GBS譜系疾病變異型的發病,且變異型與經典型GBS免疫發病機制存在差異性,為變異型GBS譜系疾病患兒的免疫治療提供新的思路。

IL-8是由多種細胞產生的炎癥因子[10],主要調節中性粒細胞激活和轉移,在組織病理損傷過程中起關鍵作用[11]。在病毒感染、缺氧、外傷及自身免疫性疾病患者的血清中可檢測到高水平的IL-8,研究還發現IL-8的升高與疾病的進展、轉歸等相關[12],本研究發現,變異型組血清中IL-8水平高于對照組、經典型組(P<0.05),提示IL-8參與兒童變異型GBS譜系疾病的發病,與既往報道的經典型GBS發病有所差異[12]。

TNF-α是由巨噬細胞和T細胞分泌的單核因子,在免疫系統的發育、免疫功能的調節和T細胞引起的組織損傷中起著重要作用[13]。HUIZINGA等[14]研究發現,GBS患者血清TNF-α水平明顯升高,并且與病情嚴重程度密切相關(P<0.05),經免疫治療后,血清TNF-α水平下降(P<0.05)。RADHAKRISHNAN等[15]也發現,GBS患者血清TNF-α水平高于對照組(P<0.05),經過靜脈注射免疫球蛋白或血漿置換治療后,血清TNF-α的水平降低(P<0.05)。本研究結果顯示,變異型組血清TNF-α水平高于對照組(P<0.05),與既往報道經典型GBS患者結果一致[15],進一步支持兒童變異型GBS譜系疾病免疫治療有效。

總之,本研究表明變異型GBS譜系疾病患兒存在細胞免疫及體液免疫功能紊亂,表現為CD16+56、CD4+、CD8+水平下降,IL-2、IL-8、TNF-α水平升高,IgG水平升高,與經典型GBS發病免疫機制有部分重疊,不同之處為血IL-2、IL-8水平升高。隨著醫學技術的發展,未來IL-2、IL-8等炎癥因子抑制劑用于臨床免疫性疾病的治療值得期待。