鄭自華,吳雙燕,韋小歡,梁桂燕,張瑞門,韋英明*
(1.廣西大學農牧產業發展研究院,廣西南寧 530004;2.鹿寨縣動物疫病預防控制中心,廣西柳州 545600;3.羅城仫佬族自治縣水產畜牧養殖服務中心,廣西河池 546300;4.廣西大學動物科學技術學院,廣西南寧 530004)
羅城仫佬族自治縣地處大石山區,氣候炎熱高濕,生態環境比較脆弱,是廣西最后脫貧 “摘帽” 的8 個縣之一。肉牛養殖是羅城自治縣的特色產業,但是當地肉牛產業的生產技術相對落后,母牛繁殖率低、良種率低等因素明顯制約著當地的肉牛產業發展。同期發情技術能有效地調節母牛的發情周期,顯著改善繁殖效果,縮短產犢間隔,進而提高繁殖效率,是肉牛生產中常用的技術措施[1]。通過集成和推廣同期發情、人工授精等繁殖新技術,引入良種養殖和良種改良本地母牛相結合的途徑,可快速提高地方良種牛的比率,解決肉牛良種緊缺的問題,提高當地的良種養殖經濟效益,促進肉牛產業高質量發展。
同期發情—人工授精技術是通過利用外源激素人為調控母畜的發情時間,使母畜集中在一段時間內發情排卵,再對母畜進行定時人工輸精配種的技術,使用同期發情技術中實現控制母畜發情時間,使母畜可以集中配種、妊娠、產犢,提高集約化養殖的生產效率和經濟效益,該技術在現代畜牧業生產中已被廣泛應用。但同期發情—人工授精技術的效果受到多方面因素的影響,可概括為兩個大方面的因素,一是內部因素,如牛的品種、年齡、繁殖狀況、所處的發情周期、體況和遺傳基因等;二是外部因素,包括激素處理方案、季節、工作人員的技術操作水平等[2]。目前生產上常用孕酮陰道栓(Controlled internal drug release,CIDR)、促性腺激素釋放激素(Gonadotropin-releasing hormone,GnRH)和前列腺素(Prostaglandin,PG)等外源激素進行同期發情處理,其中以 “GnRH+PG+GnRH” 三種激素結合使用的方式最為普遍,岳成廣等[2]用三種不同的同期發情處理方案在夏冬兩季對安格斯牛進行同期發情處理(方案Ⅰ:PG+PG;方案Ⅱ:CIDR+PG+GnRH;方案Ⅲ:GnRH+PG+GnRH);三組的同期發情率分別76.70%、90.56%和85.00%,差異不顯著;3 組同期發情方案在夏冬兩季的同期發情率均無顯著差異。史佳斌等[3]同樣采用3 種不同處理方案(方案I:CIDR+PGF2a+GnRH;方案Ⅱ:CIDR+GnRH+PGF2a+GnRH;方案Ⅲ:GnRH+PGF2a+GnRH)在夏秋季兩季對延邊黃牛母牛進行同期發情處理,結果發現方案Ⅱ的秋季同期發情率(88.24±5.55)%顯著高于夏季同期發情率(66.67±4.33)%;但3 組處理方案之間的夏季、秋季同期發情率對比發現無顯著性差異。有很多研究報道,母畜的繁殖性能與不同季節的溫度、日照和光照時間等因素有相關。本文通過探討在不同月份進行相同方案的同期發情處理對西門塔爾牛人工輸精效果的影響,以期對廣西大石山區地區母牛繁育方案制訂提供理論指導。
1.1.1 試驗母牛
在廣西大石山區羅城仫佬族自治縣某牛場選擇186 頭西門塔爾能繁母牛,空懷,無生殖道疾病,且經直腸檢查觸摸卵巢有功能性黃體。試驗時間為2022 年2—8 月。
1.1.2 凍精
選用西門塔爾良種肉牛凍精,凍精質量符合《牛冷凍精液》(GB/T 4143-1984)的規定。
1.1.3 藥品
前列腺素為氯前列醇注射液(PGF2α),規格2mL:0.2mg/ 支,齊魯動物保健有限公司;戈那瑞林注射液(主要成分為GnRH),規格2mL:100μg/支,上海全宇生物科技動物藥業有限公司。
1.1.4 器材設備
0.25 mL 細管凍精規格母牛專用輸精槍(廣西蔣氏動物用品有限公司)。
1.2.1 試驗分組及同期發情法
在2—8 月,每月用同一處理方法同期發情處理一批母牛,即在上午同一時段對試驗牛肌肉注射氯前列醇注射液2 支(4mL)和戈那瑞林注射液4 支(8mL)。如表1 所示,共處理7 批次母牛。

表1 同期發情各組處理情況
1.2.2 發情判定
在進行 “PG+GnRH” 激素處理后的第2~5天觀察母牛發情情況,使用試情公牛或觀察母牛相互爬跨情況,如果有爬跨或接收爬跨情況,即進一步通過直腸檢查進行發情鑒定,如母牛陰戶充血腫脹,陰道粘膜潮紅,陰道有黏液即判定發情。
1.2.3 人工授精
一般在母牛發情表現后24h 內進行人工輸精,具體時間需結合母牛陰道黏液情況確定最適輸精時間,通過直腸檢查觀察陰道黏液粘稠渾濁拉絲易斷時為最適時間。進行一次人工授精,輸精量為0.25mL。輸精流程為將輸精器械清洗和消毒,保定母牛,用手掏凈母牛直腸宿糞后,再用溫水清洗母牛外陰部并擦拭干凈。將按解凍精液規范解凍的精液,通過直腸把握子宮頸輸精方式進行子宮體輸精,輸精槍打出精液后緩慢抽出輸精槍,并稍把握抬高子宮頸片刻防止精液倒流再緩慢從直腸中抽出手。
1.2.4 妊娠檢查
人工授精2~3 個月即對母牛進行直腸妊娠檢查,通過直腸檢查觸摸子宮的變化判定母牛是否受孕,懷孕母牛的兩側子宮相比大小不一,子宮間溝明顯,孕角子宮較粗,當直腸檢查觸摸子宮有波動感時,即可判定為受胎牛。
使用SPSS 26.0 對數據進行方差分析和t 檢驗,對比組間數據差異性,P>0.05 表示差異不顯著,P<0.05 表示差異顯著。
對186 頭西門塔爾能繁母牛進行 “PG+GnRH” 激素處理及人工授精,由表2 可以看出,在不同月份對西門塔爾能繁母牛進行“PG+GnRH” 激素處理,后對發情的母牛進行人工輸精1 次,情期受胎率平均為52.8%。在2—5月份進行西門塔爾能繁母牛同期發情及人工授精技術處理,受胎率為62%以上,這4 個月份母牛受胎率差異不顯著(P>0.05);在6—8 月份進行西門塔爾能繁母牛同期發情及人工授精技術處理,受胎率為36%左右,這3 個月同樣差異不顯著(P>0.05);夏季(6—8 月)比春季(2—5月)受胎率降低28%左右,差異顯著(P<0.05)。

表2 同期發情及人工授精效果統計表
2022 年2—4 月,聯合縣級農業部門、牛配種員,針對舍飼條件下,在羅城縣對能繁母牛進行“PG+GnRH” 激素處理及人工授精,累計實現同期發情與配種母牛16767 頭,發情率達93%,并持續跟蹤、記錄母牛產仔情況。從記錄結果來看,截至2023 年2 月,目標母牛群累計產犢12509 頭,產仔率為74.6%,上一年相同時期母牛自然發情采用本交和人工輸精方式產犢數量10779 頭,產仔率為64.3%,相比母牛的繁殖率提高了10.3%。在春秋季節氣溫適宜的季節采用同期發情—定時輸精技術集中處理空懷能繁母牛,使人工授精工作得以集中開展,有效的提高了羅城縣母牛的繁殖率。
目前利用外源激素進行母牛同期發情的模式大致可分兩種類型:第一類是通過延長母牛發情周期中的黃體期時間,常用方法是應用孕酮抑制卵泡的發育,通過放置孕酮陰道栓(CIDR)或皮下埋植方式,使得母畜一直處于黃體期,抑制發情,而后在同一時間撤掉孕酮后讓母畜同一時間集中發情;第二類是人為縮短黃體期,使用PG或類似物溶解黃體使得卵泡提前發育,提前進入發情期[4-6]。母牛發情周期約為18~24d,平均21d,PG 只對發情周期5~18d 的功能性黃體有溶解作用,如果應用PG 進行同期發情處理時母畜的情期不處于這個時段,則激素處理無效,母畜不出現發情[7]。
氯前列烯醇是PGF2α的類似物,它既具有與PGF2α相似的藥理作用和臨床用途,又克服了PGF2α在體內易被代謝破壞,性質不穩定等缺點,因為其具有與PGF2α類似的促進黃體溶解的作用,所以常用它來誘導各種家畜的同期發情[1]。本次實驗采用PGF2α-GnRH 處理母牛后,在2~5d 內母牛陸續出現發情,發情率達95%,取得了很好的發情效果,與段洪峰等[8]采用CIDR-PGF2α-GnRH類似處理獲得的發情率相似,其主要原因可能是本次同期發情的母牛均是處于發情間期卵巢具有功能性黃體的能繁母牛。氯前列烯醇對功能性黃體有強烈的溶解作用,且兩次注射法優于一次注射法,其原因是氯前列烯醇對功能性黃體有溶解作用,而對新生黃體無溶解作用,兩次注射可避免因作用于早期黃體或末期黃體而無效,有更大概率直接作用于功能黃體[4]。趙維等[9]以兩種方式氯前列烯醇誘導紅安格斯牛同期發情,一次肌注法和二次肌注法(間隔11d)的同期發情率分別達77.7%和96.4%,二次注射法同期發情效果要優于一次注射法,獲得更高的同期發情率。PGF2α-GnRH 同期處理方法,對促進舍養母牛發情效果明顯,能提高舍飼規模化肉牛養殖場的配種效率。同在一定時期范圍內,與自由本交相比,該方法可使母牛繁殖率提高10.3%,大大提高了牛群產犢效率。此外,同期發情定時輸精能否取得好的效果,取決于是否掌握科學正確的同期發情處理方法,規范的輸精操作和適宜的輸精時間,此次試驗設計和操作,都是由經驗豐富的配種員進行,所以取得了較理想的效果。
母牛同期發情受胎率在不同季節受氣溫等氣候因素影響,而存在差異性,呼格吉勒圖等[10]對高寒地區不同季節對安格斯和西門塔爾母牛同期發情效果的影響開展研究,結果顯示高寒地區不同季節同期發情和人工授精受胎率差異顯著,夏季同期發情效果好于冬季,因為高寒地區夏季溫度相對適宜,冬季氣溫過于低影響到母牛的內分泌功能進而影響到母牛的繁殖性能,這與本文結論相類似,廣西夏季高溫對母牛繁殖影響較大,而春季氣溫較適宜所以母牛生殖生理功能較為正常,因此進行同期發情定時輸精受胎率的相對較高。王前[11]在不同季節使用氯前列烯醇對廣州的奶牛進行同期發情處理,比較不同季節自然發情和同期發情人工授精受胎率,發現季節因素對奶牛同期發情受胎率有影響,但不如對自然發情情期受胎率影響大;奶牛炎熱的夏季自然發情人工輸精受胎率較低,同期發情處理可提高人工授精受胎率,高溫的季節奶牛發情率和受胎率降低,原因主要是可能高溫會導致奶牛體溫升高,內分泌紊亂,而秋冬季節奶牛自然發情人工輸精受胎率較高,同期發情對其影響不大。不同季節的季節溫度、光照等因素影響,會導致家畜的繁殖機能差異很大,楊芬俠等[12]采用GnRH+一次PG 法探討不同季節、體況因素對安格斯牛的同期發情的影響,其結果表明,GnRH+一次PG 法能獲得較高的同期發情率,冬春季(11—4月)的同期發情率比夏秋季(5—10 月)略高,夏秋季的同期發情率為86.21%,冬春季為90.00%,兩者差異不顯著,但經產母牛的同期發情處理效果稍優于育成牛。牛同期發情不宜在太冷、太熱的季節進行,最佳操作時間是秋季,膘情好的母牛也可在春季開展[13]。本次試驗通過在不同的月份同期發情處理,在2—5 月進行西門塔爾能繁母牛同期發情及人工授精技術處理,受胎率達60%以上;在6—8 月進行西門塔爾能繁母牛同期發情及人工授精技術處理,受胎率為33%左右,比2—5 月受胎率低30%左右,可見在廣西大石山區黃牛同期發情定時輸精的效果存在季節性差異,廣西2—5 月春季氣溫較溫和,對于肉牛生長較適宜,而6—8 月氣候高溫高濕,母牛熱應激反應較大,可能對母牛的生殖內分泌產生較大影響,導致氣候炎熱的夏季受胎率明顯下降。
廣西夏季炎熱高溫高濕,對母牛的生殖內分泌系統影響大,母牛同期發情人工授精受胎率夏季和春季差異顯著,因為春季氣溫相對適宜,同期發情、定時輸精技術運用能獲得相對較高的受胎率,推薦能繁母牛的同期發情及人工授精技術運用在春季開展。