基于數據挖掘與德爾菲法的脾氣虛證動物模型評價及用藥特征分析

張裕惠，薛 丹，王憭瑤，賈瑞婷，宋朱謹，虞吳敏，朱愛松*

基于數據挖掘與德爾菲法的脾氣虛證動物模型評價及用藥特征分析

張裕惠1, 2, 3，薛 丹1, 2，王憭瑤1, 2，賈瑞婷1, 2，宋朱謹1, 2，虞吳敏1, 2，朱愛松1, 2*

1. 浙江省中醫(yī)“瘀毒”證重點實驗室，浙江 杭州 310053 2. 中醫(yī)“治未病”智慧健康浙江省工程研究中心，浙江 杭州 310053 3. 嘉興市第二醫(yī)院，浙江 嘉興 314000

全面分析脾氣虛證動物模型并明確模型評價指標，為該動物模型的規(guī)范化研究提供參考。在中國知網數據庫中檢索脾氣虛證動物模型相關實驗性研究文獻，分別對動物品系、造模方法、取材部位、評價指標和用藥特征進行數據提取及分析。以此為基礎聚焦高頻評價指標進行德爾菲專家問卷調查，通過均數和變異系數等明確高效能的脾氣虛證動物模型評價指標。同時，基于用藥特征分析結果，通過以方測證進一步探討脾氣虛證動物模型的客觀性和科學性。共納入146篇文獻，動物模型以SD大鼠和雄性占比最高，取材部位依次為小腸、胃和脾臟，飲食失宜和游泳力竭雙因素復合法是最常用的造模方法。德爾菲專家問卷調查表明，高效能的脾氣虛證動物模型評價指標主要包括表觀指標（大便溏泄、神疲乏力、皮毛枯槁無華等）、生化指標[胃動素、線粒體三磷酸腺苷（adenosine triphosphate，ATP）水平、-木糖吸收率等] 和其他指標（食量減少、體質量下降、抓力下降等）。其中75篇文獻報道了有效的治療方藥，最常用的方劑為四君子湯，高頻藥物為白術、甘草、茯苓、黃芪、黨參和人參等，用藥特征以性溫、味甘、歸脾經為主。脾氣虛證動物模型的構建主要為SD大鼠，多采用飲食失宜與游泳力竭的雙因素復合法。綜合表觀指標、生化指標和其他指標的系統性模型評價方法具有科學性和合理性，將為脾氣虛證動物模型的規(guī)范化提供參考。

脾氣虛證；動物模型；評價指標；德爾菲法；用藥特征；四君子湯

證候是證所表現的具有內在聯系的癥狀和體征，是中醫(yī)辨證的結果和論證的依據[1]。證候的規(guī)范化是中醫(yī)學走向現代化、規(guī)范化的基石，而構建完善的中醫(yī)證候動物模型是證候規(guī)范化研究的基本方法。脾氣虛證是中醫(yī)基礎證候類型之一，以倦怠乏力、大便溏稀、食欲減退為主要表現[2]，是臨床多種疾病的常見證型[3-5]。目前，關于脾氣虛證動物模型的研究主要涉及模型制備與評價方法等方面，但仍存在一些問題，如造模方法復雜多樣，評價指標差異大、種類多，脾氣虛、脾虛及氣虛模型的研究常相互混雜，沒有形成系統性的整合，這些問題導致了脾氣虛證實驗研究無法標準化和規(guī)范化，也阻礙了中醫(yī)證候科學研究進程。

本研究通過數據挖掘對脾氣虛證動物模型的構建方法和評價指標進行全面整理，結合德爾菲法[6]對評價指標進行專家意見征詢，構建較為系統的脾氣虛證動物模型評價方法。同時，通過以方測證探討脾氣虛證動物模型成功構建的客觀性和科學性。以期為脾氣虛動物模型的建立與評價提供科學依據，為中醫(yī)證候動物模型的規(guī)范化研究提供參考。

1 資料與方法

1.1 數據來源與處理

1.1.1 文獻檢索與篩選

（1）檢索策略：以“脾氣虛”“動物模型”等為主題詞在中國知網進行檢索，時間為2010年1月1日—2022年10月1日。

（2）動物模型文獻篩選：納入標準是1）脾氣虛證動物模型造模成功的實驗研究性文獻；2）同一作者進行拆分數據發(fā)表的文獻最終僅計入1次；3）同一篇文獻中同一指標采用不同方法進行檢測最終僅計入1次。排除標準是1）會議論文、理論性研究、綜述及資料不全的文獻；2）脾虛證、脾陽虛證及氣虛證等非脾氣虛證或指代性不明的文獻；3）重復發(fā)表的文獻。

（3）用藥特征文獻篩選：納入標準是1）中藥治療有效改善模型動物脾氣虛證的文獻；2）處方信息完整的文獻。排除標準是1）僅有方名無藥物組成的文獻；2）處方藥物記載不全的文獻；3）無治療措施或非中藥治療手段的文獻。

由2名評價者根據納入、排除標準獨立進行篩選，閱讀全文，剔除不合格文獻。如出現分歧，由第3名評價者判定，直至意見一致。

1.1.2 數據錄入 以實驗動物品系、性別、取材部位、造模成功時間、評價指標、處方名、具體用藥及藥物性、味、歸經為分類依據，提取數據并錄入Excel表，建立脾氣虛證動物模型數據集。

1.1.3 術語規(guī)范化 參照《中醫(yī)實驗動物模型方法學》[7]及《實用中醫(yī)證候動物模型學》[8]規(guī)范模型要素數據，如“大便溏泄、便溏、泄瀉”歸為“大便溏泄”。參照《中國藥典》2020年版一部[9]及《中藥學》[10]規(guī)范中藥名及性、味、歸經，如將“生黃芪、炙黃芪、黃芪”歸為“黃芪”，將“微甜”“微甘”歸為“甘”等。

1.2 德爾菲專家問卷調查

1.2.1 調查問卷 選取文獻研究中高頻評價指標（頻次≥5）構建條目池，制定《脾氣虛證動物模型評價指標專家意見征詢問卷》[6]，邀請專家根據重要性進行評價。

1.2.2 評價指標及量化 通過對評價指標進行歸納，將其分為定性指標和定量指標。定性指標為表觀指標，主要是對動物的外觀、行為狀態(tài)以及排泄物性狀等由主觀觀察得出的定性結果。定量指標分為生化指標和其他指標，強調通過客觀化、多維度視角對動物的功能狀態(tài)進行評估。生化指標是從分子水平檢驗動物的功能狀態(tài)，其他指標從動物的體質量、食量及運動量等方面進行評估。評價指標的重要性采用Likert的五尺度評分法[11]，根據“很不重要、不重要、一般、重要及很重要”分別賦1、2、3、4、5分。

1.3 統計分析

Excel 2021軟件用于統計模型要素及用藥特征條目的頻次與頻率。SPSS 25.0用于統計專家問卷指標，包括：1）專家積極系數，用回收率表示（回收率＝回收份數/總份數）；2）專家意見集中程度，以平均數（X）、滿分率（，滿分頻數/總頻數）、等級和（，專家對某項指標賦值后的總得分）表示，這些指標越高，表明專家的意見越集中；3）專家意見的協調程度，以變異系數（CV，標準差/均值）和肯德爾和諧系數（）表示，CV越小，提示專家對該指標重要性評價的一致性越高[12]；是專家對所有指標評價的協調程度，其值在0～1，＜0.05認為有統計學意義，值越大，協調程度越高，德爾菲法的值多在0.5上下波動[13]。將滿足以下條件的指標納入脾氣虛證動物模型的評價標準：1）均數≥3.5；2）等級和≥70；3）CV≤0.3。

2 結果

2.1 文獻篩選

共檢索出442篇文獻，包括學術期刊279篇、學位論文145篇、會議論文18篇。根據納排標準篩選后，納入146篇文獻。其中，有75篇文獻中報道了具有改善脾氣虛證較好的方藥，涉及到67個方劑和48味中藥。

2.2 動物模型、造模方法、取材及評價指標

2.2.1 動物模型 在脾氣虛證動物模型中，使用頻次最高的動物品系依次為SD大鼠（105篇，71.92%）、Wistar大鼠（25篇，17.12%）、C57BL/6小鼠（8篇，5.48%）。性別以雄性最多（81篇，55.50%），其次為雌雄各半（54篇，37.00%），見表1。

表1 實驗動物品系、性別頻次分布

Table 1 Species and gender frequency distribution of experimental animals

動物品系頻次頻率/%動物性別頻次頻率/% SD大鼠10571.92雄性雌性各半815455.5037.00 Wistar大鼠 2517.12 C57BL/6小鼠 8 5.48雌性11 7.50 昆明種小鼠 4 2.74 Balb/c小鼠 4 2.74

2.2.2 造模方法 有飲食失宜法、游泳力竭法、耗氣破氣法、苦寒瀉下法、情志所傷法、睡眠剝奪法、跑步疲勞法和利血平皮下注射法共8種造模方法。這些造模方法經過組合后，使用頻次排序為雙因素復合法102篇、3因素復合法31篇、單因素法24篇。其中飲食失宜、游泳力竭的雙因素復合法（78篇，49.68%）頻次最高。造模時間分布情況中，頻次最高的為造模14～16 d的飲食失宜和游泳力竭復合法，見表2。

2.2.3 取材部位 小腸頻次最多（37篇，25.70%），其次為胃（27篇，18.80%）和脾臟（23篇，16.00%），見表3。

2.2.4 評價指標 經統計高頻指標共有64個，其中表觀指標16個、生化指標37個、其他指標11個，各類型指標排序前8的指標分布情況見圖1。由于評價指標較多，導致模型評價存在一定的困難，因此，本研究進行了德爾菲專家問卷調查以明確動物模型的高效評價指標。

2.3 專家問卷

本次調查共2輪，共邀請40名中醫(yī)專家參與問卷調查。涉及華東（上海市、浙江省、江蘇省、福建省、江西省）、華北（北京市、天津市、河北省、山西省）、華中（湖北省、湖南省）、東北（遼寧省）、華南（廣東省）、西南（四川省）、西北（青海省、寧夏回族自治區(qū)）共16個省市，地域分布范圍廣，地域影響小。所有專家均具有高級職稱，且90%的專家學歷為研究生及以上。2輪問卷全部回收，專家積極系數為100%。問卷中，各指標的均數、滿分率、等級和及CV見表4。

第1輪問卷表觀指標、生化指標、其他指標的值分別為0.257、0.159和0.247，2為41.149、54.212和44.397。第2輪問卷值分別為0.533、0.345和0.259，2為85.23、117.246和46.668，見表5。2輪專家值均有統計學意義，第2輪專家值較第1輪有較大提高，表明專家對脾氣虛證動物模型評價指標判定條目的認同度明顯提高。根據專家問卷結果，最終確定脾氣虛證動物模型評價指標見表6。

表2 造模方法分布

Table 2 Distribution of modeling methods

單因素法雙因素復合法3因素復合法 造模方法造模時間/d頻數造模方法造模時間/d頻數造模方法造模時間/d頻數 苦寒瀉下12～144飲食失宜及游泳力竭14～1662苦寒瀉下、飲食失宜及游泳力竭2112 21321 614～1610 8～9228 428 1 18142 230～35 2 利血平皮下注射9～12330～31 242 1 14～16324 1耗氣破氣、飲食失宜及游泳力竭35 2 7184 1 飲食失宜141飲食失宜及耗氣破氣14 4飲食失宜、睡眠剝奪及跑步疲勞28 1 21142 4 36156 1飲食失宜、游泳力竭及情志所傷21 1 841苦寒瀉下及耗氣破氣30 328 1 耗氣破氣30135 1 451飲食失宜及苦寒瀉下21 2 游泳力竭21112～14 2 30 1 苦寒瀉下及游泳力竭21 1 瀉下傷脾及游泳力竭39 1 耗氣破氣及游泳力竭14 1 21 1 28 1 飲食失宜及睡眠剝奪28 1

表3 取材部位分布

Table 3 Distribution of sampling parts

取材部位頻次頻率/% 小腸3725.70 胃2718.80 脾臟2316.00 胸腺149.70 海馬128.30 心臟117.60 骨骼肌106.90 肝臟106.90

2.4 方藥分析

經統計，高頻有效方劑中四君子湯（26次，39%）使用最多，其次為白術茯苓湯（7次，10%）、補中益氣湯（5次，7%）及香砂六君子湯（5次，7%），其余為自擬方。頻次＞5的藥物共17味，依次為白術、甘草、茯苓、黃芪、黨參、人參等，見表7。

藥物性味歸經分析發(fā)現，溫性藥物占比最高（23次，47.92%），其次為平性（13次，27.08%）、寒性（10次，20.83%）。藥味中，甘味藥占比最多（31次，41.33%），其次為苦性（20次，26.67%）、辛性（18次，24.00%）。歸經中，藥物歸脾經最多（34次，25.37%），其次為肺經（25次，18.66%）、胃經（21次，15.67%），歸經頻次前6位見圖2。

3 討論

中醫(yī)證候的規(guī)范化研究是中醫(yī)基礎理論研究的重要內容，是揭示中醫(yī)證的本質研究的重要途徑。基于文獻的數據挖掘可為證候研究提供數據來源，德爾菲專家問卷調查可提高證候標準的科學性與指導性，將數據挖掘和德爾菲法相結合，能夠對脾氣虛證動物模型做出全面、科學的評價，促進中醫(yī)證候的規(guī)范化研究。

圖1 高頻指標分布

表4 評價指標問卷調查結果

Table 4 Questionnaire survey results of evaluation index

指標條目第1輪問卷第2輪問卷 `XK/%SCV`XK/%SCV 表觀指標大便溏泄4.5565910.154.8585970.08 神疲乏力4.5060900.154.9095980.09 皮毛枯槁無華4.2040840.204.2540850.17 蜷縮扎堆4.0535810.204.4050880.15 形體消瘦4.0030800.214.2040840.18 肛周污穢4.1515830.164.0530810.19 足蹼鼻爪或耳尾色白4.0530810.194.0020800.16 弓背3.7030740.293.4510690.20 瞇眼3.4030680.263.15 0630.12 其他指標食量減少4.0535860.104.9090980.06 體質量下降或增長緩慢3.7515760.154.5565910.15 抓力下降3.8015800.114.3545870.15 飲水量減少3.5510680.204.3035860.13 游泳力竭時間縮短3.9030850.114.2040840.18 曠場實驗（運動距離、站立次數等下降）3.8020750.184.1540880.16 脾臟指數下降3.8020720.184.2035840.17 受激排便率增高3.80 5640.164.4035840.11 體溫不變或輕微下降3.5525740.213.7030830.15 胸腺指數下降3.5510620.194.20 5740.17 生化指標胃動素3.9025780.204.1015820.11 線粒體ATP水平4.0525810.174.0010800.11 D-木糖吸收率3.9020780.183.9515800.13 環(huán)磷酸腺苷4.0530810.193.8510800.15 胃泌素4.0025800.183.8510790.15 線粒體呼吸鏈復合物（complex Ⅰ～IV）3.9535790.224.0010770.11

續(xù)表4

指標條目第1輪問卷第2輪問卷 `XK/%SCV`XK/%SCV 生化指標線粒體膜電位3.9525790.194.0010770.14 血清免疫球蛋白A3.7520750.233.75 0750.12 血紅蛋白3.7020740.233.35 5740.18 血管活性腸肽3.5515710.233.50 0720.15 P物質3.6015720.233.70 0710.15 酪蛋白裂解酶3.7020740.233.25 0700.14 超氧化物歧化酶3.5515710.233.45 5700.15 生長抑素3.5515710.233.55 0690.14 淋巴細胞比值3.6020720.253.30 0660.14 炎癥因子（TNFα、IL1β)等3.5525710.283.20 5670.13 丙二醛3.4010680.203.60 0640.14

表5 專家意見協調系數

Table 5 Coordination coefficient of expert opinion

咨詢輪次指標分類重要性Wc2P值 第1輪表觀指標0.257 41.149＜0.001 生化指標0.159 54.212＜0.001 其他指標0.247 44.397＜0.001 第2輪表觀指標0.533 85.230＜0.001 生化指標0.345117.246＜0.001 其他指標0.259 46.668＜0.001

表6 脾氣虛證動物模型評價指標

Table 6 Evaluation indexes of animal model with spleen qi deficiency syndrome

指標分類具體指標 表觀指標大便溏泄、神疲乏力、皮毛枯槁無華、形體消瘦、蜷縮扎堆、肛周污穢、足蹼鼻爪耳尾色白 生化指標胃動素、線粒體ATP水平、D-木糖吸收率、環(huán)磷酸腺苷、胃泌素、線粒體呼吸鏈復合物（complex Ⅰ～IV）、線粒體膜電、血清免疫球蛋白A、血紅蛋白、血管活性腸肽、P物質、酪蛋白裂解酶、超氧化物歧酶 其他指標食量減少、體質量下降或增長緩慢、抓力下降、飲水量減少、游泳力竭時間縮短、曠場實驗（運動距離、站立次數等下降）、脾臟指數下降、體溫不變或輕微下降

前期文獻調研發(fā)現，脾氣虛證動物模型在2010年之前研究力度和學術關注度較低，在近10年出現階梯式增長，得到廣泛關注，故本研究基于近10年的文獻資料進行展開。本研究顯示，在模型動物選擇上，SD大鼠是主要的模型動物。SD大鼠具有皮毛、尾巴和耳朵等部位顏色淡的特點，便于收集脾氣虛證的四診指標。目前，脾氣虛證造模方法較多且以中醫(yī)病因造模法為主。中醫(yī)病因造模法是基于中醫(yī)學病因學說與發(fā)病理論，模擬導致“證”形成的致病因素并作用于實驗動物，使模型呈現特定的證候特征的造模方法[14]。本研究發(fā)現，飲食失宜和游泳力竭復合法最為多見。飲食失宜主要包括饑飽失常和飲食偏嗜。飲食物主要是依賴脾胃的納運作用進行消化吸收，過饑、過飽均會損傷脾胃。飲食偏嗜是遵循《素問·生氣通天論》中“味過于酸，肝氣以津，脾氣乃絕”“味過于苦，脾氣不濡，胃氣乃厚”的理論。游泳力竭法是使模型動物負重后游泳，直至勞倦。《脾胃論·脾胃勝衰論》：“形體勞役則脾病”，勞倦過度會耗傷大量氣血。脾為氣血生化之源，脾氣健旺則氣血生化有源，而勞倦過度易損耗脾氣導致脾氣虧虛。楊關林等[15]采用飲食失宜和游泳力竭法，損傷大鼠脾胃，造成脾氣虛證。此外，苦寒瀉下、耗氣破氣也是脾氣虛證動物模型常用的方法。《本草經疏·五臟六腑虛實門》：“脾虛，忌下、降泄、破氣、苦寒。”苦寒瀉下、耗氣破氣法可導致脾氣虛損。鄭小偉等[16]采用苦寒瀉下的大黃水煎劑進行灌胃，謝磊等[17]則在隔日喂食的基礎上結合耗氣破氣的小承氣湯進行灌胃，均造成了大鼠脾氣虛癥狀。利血平皮下注射是利用利血平的胃腸道不良反應，使動物出現消痩、腹瀉、納呆等與脾氣虛證類似的臨床表現。梁雪丹等[18]通過利血平皮下注射導致大鼠出現毛色無澤、便溏，體質量、食水量下降等癥狀，成功建立脾氣虛動物模型。此外，情志刺激、睡眠剝奪及跑步疲勞也與脾氣虛證密切相關。在脾氣虛型亞健康狀態(tài)中，研究人員在飲食失宜與游泳力竭的基礎上結合情志所傷法，造成脾氣虛模型[19]，睡眠剝奪與飲食失宜及跑步疲勞結合也可造成模型動物脾氣虛[20]。

表7 藥物使用頻次分布

Table 7 Frequency distribution of herbs use

藥物頻次頻率/%藥物頻次頻率/% 白術6415.17柴胡143.32 甘草5713.51大棗102.37 茯苓4711.14半夏 92.13 黃芪31 7.35生姜 81.90 黨參26 6.16桂枝 61.42 人參26 6.16丹參 61.42 陳皮20 4.76飴糖 61.42 當歸14 3.32白芍 61.42 升麻14 3.32

圖2 藥性、藥味、歸經分布圖

在取材部位上本研究發(fā)現脾氣虛證動物模型研究的焦點或所關聯的疾病與“小腸、胃、脾臟、胸腺、海馬、心臟、骨骼肌”等相關，這與中醫(yī)“脾”的生理功能和特性息息相關。脾主運化，脾氣虧虛則運化水谷的功能障礙，可見腹脹、便溏之癥。現代醫(yī)學認為腸道中的膽囊收縮素（cholecystokinin，CCK）、血管活性腸肽等腦腸肽具有調節(jié)胃腸道運動的作用[21]，其表達情況可以反映脾主運化的功能。脾主升，胃主降，脾氣虧虛升而不及，則胃通降失常，研究觀察到脾虛組大鼠的胃排空率低于對照組[22]。脾臟和胸腺是重要的免疫器官，因此脾臟指數和胸腺指數常用來評價動物的免疫功能[23]。脾藏意、主思，海馬是學習記憶的關鍵部位，脾氣虛大鼠可見記憶功能下降、海馬神經元數量減少[24]。脾為氣血生化之源，血為水谷之精氣，總統于心而生化于脾。若脾氣虧虛，則生化乏源，氣血衰少，脈道失盈，亦見統攝無權、行血異常，進而導致“脈道不利”，影響心主血脈的功能，最終導致心臟病變，故心臟在脾氣虛證中也受到廣泛關注。《靈樞·本神》：“脾氣虛則四肢不用”，若脾虛運化失司，肌肉失養(yǎng)，則見肌肉萎縮、四肢無力。基于此，研究人員發(fā)現脾氣虛大鼠可見肌力減退、肌肉萎縮、腓腸肌線粒體受損、肌細胞凋亡及炎癥因子浸潤[25]。

在脾氣虛證動物模型中，表觀體征一直是脾氣虛證的常用評價指標，但研究人員對表觀體征進行評價時往往存在一定的主觀性，缺乏更加科學化的客觀指標的支持。本研究使用德爾菲法科學評價脾氣虛證評價指標，匯聚了眾多專家的意見，以達成對動物的脾氣虛證診斷共識。結果顯示，表觀指標的專家意見集中程度最高、協調性最好，表明表觀指標可能是脾氣虛證動物模型主要的評價手段。其中大便溏泄、神疲乏力、皮毛枯槁無華、蜷縮扎堆及形體消瘦等指標受到專家的高度認可，便溏、神疲乏力、體瘦是臨床脾氣虛患者的癥狀，而皮毛枯槁無華與蜷縮扎堆則是脾氣虛證動物特有的表現[26]。食量減少、體質量下降、抓力下降等其他指標是脾氣虛患者“食欲減退、肌瘦無力”的臨床表現。生化指標分析發(fā)現，脾氣虛不僅與消化吸收功能相關，還與現代醫(yī)學線粒體能量代謝、免疫功能、神經內分泌、血液質量、氧化損傷、炎癥反應等息息相關。基于“脾為后天之本”為機體提供生命活動所必須的能量，與線粒體通過三羧酸循環(huán)產生ATP為細胞提供能量存在相似性，認為線粒體能量代謝障礙與脾氣虛密切相關[27]，脾氣虛動物會出現ATP水平下降[28]。《靈樞·五癃津液別》：“脾為之衛(wèi)”，《脾胃論·脾胃盛衰論》：“內傷脾胃，百病由生”，《金匱要略·臟腑經絡先后病脈證第一》：“四季脾旺不受邪”均指出了脾在防病驅邪方面的重要作用，這與現代醫(yī)學的免疫功能內涵不謀而合。脾氣虛與神經系統密切相關，脾通過“腦-腸軸”，將胃腸道與中樞神經系統聯系起來，調節(jié)胃腸道運動以及內分泌平衡[29]。脾氣虛與血液質量密切相關，《靈樞·決氣》：“中焦受氣取汁，變化而赤，是謂血”，中焦脾胃功能正常，則運化水谷精微上輸心肺，奉心化赤為血，參與血液的生成。脾氣虛與氧化損傷密切相關，脾氣虛會導致體內自由基代謝的紊亂，導致抗氧化酶清除自由基的活性降低、脂質過氧化損傷增強，應用具有健脾益氣功能的四君子湯治療可以起到抗氧化的作用[30]。此外，研究發(fā)現脾氣虛大鼠的手術傷口炎癥反應失調，中性粒細胞散在分布，提示炎癥反應與脾的功能也是密切相關的[31]。

“以方測證”是中醫(yī)學認識病證的重要方法，其通過處方的藥物構成與功效，并結合用藥后的反應，可推測研究對象的所屬證型[32]，故選擇正確的處方是驗證模型準確性的關鍵。本研究對脾氣虛證動物模型的有效方藥進行分析發(fā)現，經典補氣方劑“四君子湯”是目前使用最多的方劑。白術、甘草、茯苓、黃芪、黨參等是有效的高頻藥物，其功效多以益氣健脾為主，可以顯著改善模型動物的脾氣虛癥狀。藥物藥性以溫、平為主，藥味以甘、苦、辛為主，藥物歸經以脾經、肺經、胃經為主。甘味藥能補益，苦味藥能燥濕，辛味藥能發(fā)散、行氣，能發(fā)揮補脾、醒脾并防止?jié)窭⒌淖饔谩Ｈ肫ⅰ⑽附浰幬锟芍边_病變臟腑以調理脾胃功能，入肺經藥物則可通過“母子關系”達到肺強脾健的效果。可見，方藥分析結果與模型病機相吻合。

綜上所述，中醫(yī)的“脾”不僅僅與消化吸收有關，而是一個涵蓋現代醫(yī)學中消化系統、免疫系統、能量代謝系統、神經系統、造血系統、運動系統、氧化系統的多元系統單位。脾氣虛證動物模型的構建主要動物為SD大鼠，多采用飲食失宜與游泳力竭的雙因素復合法。模型的評價應更加科學、全面地反映消化吸收、運動及免疫功能的表觀指標和其他指標，與其量化的胃腸激素、能量代謝、免疫、血液質量、氧化損傷及炎癥因子等微觀生化指標相結合。模型的辨證應當選擇與其病機相符的方藥，可選擇藥性溫、平，藥味以甘、苦、辛為主，歸脾、胃、肺經的藥物。本研究通過對脾氣虛證動物模型的建立、評價及用藥特征的全面分析，以提高脾氣虛證實驗研究的準確性、科學性，從而為中醫(yī)證候的規(guī)范化研究提供參考。

利益沖突 所有作者均聲明不存在利益沖突

[1] 谷浩榮, 付橋橋, 李小會, 等. 中醫(yī)證候研究進展及趨勢 [J]. 中華中醫(yī)藥雜志, 2020, 35(3): 1340-1343.

[2] 張聲生, 胡玲, 李茹柳. 脾虛證中醫(yī)診療專家共識意見(2017) [J]. 中醫(yī)雜志, 2017, 58(17): 1525-1530.

[3] 張北華, 高蕊, 李振華, 等. 中醫(yī)藥治療慢性胃炎的專家經驗數據挖掘分析 [J]. 中醫(yī)雜志, 2015, 56(8): 704-708.

[4] 張嘉皓, 朱愛松. 從脾氣虛角度論動脈粥樣硬化 [J]. 中華中醫(yī)藥雜志, 2015, 30(2): 353-355.

[5] 申睿, 劉苗, 朱向東, 等. 中醫(yī)藥治療潰瘍性結腸炎實驗研究進展 [J]. 中草藥, 2018, 49(7): 1721-1725.

[6] 張穎, 季聰華, 李秋爽, 等. 中醫(yī)臨床實踐指南制修訂中德爾菲法的統計分析方法 [J]. 中華中醫(yī)藥雜志, 2018, 33(1): 249-251.

[7] 鄭小偉. 中醫(yī)實驗動物模型方法學[M]. 上海: 上海中醫(yī)藥大學出版社, 1999: 29.

[8] 陳小野. 實用中醫(yī)證候動物模型學[M]. 1993: 145-193.

[9] 中國藥典[S]. 一部. 2020.

[10] 鐘贛生. 中藥學 [M]. 北京: 中國中醫(yī)藥出版社, 2016.

[11] 何雯青, 馮貞貞, 春柳, 等. 慢性阻塞性肺疾病急性加重期證候療效評價要素研究: 基于文獻研究結合專家咨詢 [J]. 中醫(yī)雜志, 2022, 63(5): 481-487.

[12] 黃為鈞, 趙進喜, 王世東, 等. 基于德爾菲法形成慢性腎臟病風邪證候要素判定專家共識的研究 [J]. 中醫(yī)雜志, 2017, 58(23): 2004-2007.

[13] 馬雪顏, 于河, 吳力群, 等. 基于德爾菲法的兒童胃腸積熱評價量表條目篩選 [J]. 中華中醫(yī)藥雜志, 2020, 35(2): 851-854.

[14] 鐘森杰, 李琳, 胡思遠, 等. 中醫(yī)病因型證候模型建立的思考 [J]. 中國中醫(yī)基礎醫(yī)學雜志, 2022, 28(2): 310-314.

[15] 楊關林, 宋囡, 賈連群, 等. 基于iTRAQ技術分析脾氣虛證大鼠回腸蛋白質的差異 [J]. 中醫(yī)雜志, 2017, 58(24): 2124-2127.

[16] 鄭小偉, 王穎, 宋紅. 三種脾氣虛證模型大鼠血清胃泌素及胃竇G細胞的比較研究 [J]. 中華中醫(yī)藥雜志, 2006, 21(6): 338-340.

[17] 謝磊, 賈波, 羅云波, 等. 白術茯苓湯及水煎液提取分離組分對脾氣虛大鼠血管活性腸肽受體親和力的影響 [J]. 中華中醫(yī)藥雜志, 2012, 27(8): 2186-2188.

[18] 梁雪丹, 林傳權, 曾信平, 等. 基于體征半定量指標評價的利血平致脾氣虛大鼠模型的研究 [J]. 中藥新藥與臨床藥理, 2019, 30(1): 26-32.

[19] 馮玉華, 楊育同, 王坤芳. 脾氣虛慢性疲勞型亞健康狀態(tài)大鼠模型的構建及評估 [J]. 山西中醫(yī)學院學報, 2015, 16(3): 21-23.

[20] 鄒明, 高丕明, 虞亞明, 等. 不同強度運動訓練對脾氣虛質大鼠免疫學指標的影響研究 [J]. 中國醫(yī)學前沿雜志: 電子版, 2019, 11(3): 50-55.

[21] 叢培瑋, 尚冰, 王艷杰, 等. 脾氣虛和脾陽虛模型大鼠腦腸肽與下丘腦葡萄糖轉運體1及葡萄糖轉運體3表達水平變化的實驗研究 [J]. 中國全科醫(yī)學, 2016, 19(18): 2201-2205.

[22] 高云航, 李晗, 宋玲, 等. 參苓健脾胃顆粒對脾虛模型大鼠胃腸道調節(jié)的藥效學研究 [J]. 藥物評價研究, 2022, 45(10): 1992-2001.

[23] 王珺, 高云芳, 姚洋. 不同劑量四君子湯對脾虛證小鼠消化和免疫功能的影響 [J]. 中草藥, 2007, 38(4): 558-564.

[24] 白敏, 段永強, 李能蓮, 等. 基于腦腸肽四君子湯對脾氣虛證大鼠運化功能以及學習記憶功能的影響 [J]. 中國臨床藥理學雜志, 2021, 37(13): 1696-1699.

[25] 范方馨, 朱昊如, 錢夢, 等. 脾虛證模型大鼠腓腸肌損傷及其機制的探查 [J]. 北京中醫(yī)藥大學學報, 2023, 46(1): 77-86.

[26] 白敏, 段永強, 虎峻瑞, 等. 基于BDNF/PI3K/AKT信號通路探討四君子湯對脾氣虛證大鼠學習記憶功能的影響 [J]. 中藥藥理與臨床, 2022, 38(3): 22-25.

[27] 楊曄, 劉悅, 張帆, 等. 基于線粒體研究論脾虛與臟腑疾病的相關性 [J]. 中醫(yī)雜志, 2018, 59(20): 1742-1746.

[28] 戴娜, 何蘭, 胡晶, 等. “脾主肌肉”的理論探討及其臨床意義 [J]. 中醫(yī)雜志, 2018, 59(2): 95-99.

[29] 高曉宇, 張哲, 王洋, 等. 現代復雜適應系統思想在脾藏象理論中的應用 [J]. 中醫(yī)雜志, 2020, 61(19): 1702-1706.

[30] 紀云飛, 王瑞君, 李曉波. 復方四君子湯的化學成分和藥理作用研究進展 [J]. 中草藥, 2016, 47(5): 837-843.

[31] 樊慧杰, 柴智, 閆潤紅, 等. 補中益氣湯對脾氣虛證模型大鼠手術切口肌肉組織炎癥反應和肉芽組織增生的影響 [J]. 中醫(yī)雜志, 2014, 55(3): 238-241.

[32] 鐘森杰, 李靜, 李琳, 等. “以方測證”在中醫(yī)證候模型研究中的應用述評 [J]. 中華中醫(yī)藥學刊, 2021, 39(2): 48-50.

Evaluation of animal model with spleendeficiency syndrome and analysis of medication characteristics based on data mining and Delphi method

ZHANG Yu-hui1, 2, 3, XUE Dan1, 2, WANG Liao-yao1, 2, JIA Rui-ting1, 2, SONG Zhu-jin1, 2, YU Wu-min1, 2, ZHU Ai-song1, 2

1. Zhejiang Key Laboratory of Traditional Chinese Medicine for “Blood-Stasis-Yoxin” Syndrome, Hangzhou 310053, China 2. Zhejiang Engineering Research Center of Traditional Chinese Medicine for Preventive Disease, Hangzhou 310053, China 3. The Second Affiliated Hospital of Jiaxing University, Jiaxing 314000, China

To comprehensively analyze the animal model with spleendeficiency syndrome and clarify its evaluation index, so as to provide reference for the standardization research of the animal model.Experimental studies related to the animal model with spleendeficiency syndrome was retrieved from the database of China National Knowledge Infrastructure, and the data of animal species, modeling method, sampling parts, evaluation indexes and medication characteristics were extracted and analyzed. On this basis, the Delphi expert questionnaire was constructed focusing on the high-frequency evaluation indicators, and the evaluation indicators of the animal model with spleendeficiency syndrome were defined by means of the mean number and coefficient of variation. At the same time, based on the analysis results of medication characteristics, the objectivity and scientific nature of the animal model of spleendeficiency syndrome was further confirmed by the prescription analysis.A total of 146 studies were included, SD rats and male rats accounted for the highest proportion. The sampling parts were small intestine, stomach and spleen in order. The two-factor complex method of improper diet and swimming exhaustion was the most commonly used method for modeling. According to the results of Delphi expert questionnaires, the highly effective evaluation indexes of animal model with spleendeficiency syndrome mainly include apparent indexes (loose stool, fatigue, and withered fur, etc.), biochemical indexes [motilin, mitochondrial adenosine triphosphate (ATP) level,-xylose absorption rate, etc.] and other indexes (decreased food intake, decreased weight, decreased grasping power, etc.). A total of 75 studies reported effective prescriptions, the most commonly used was Sijunzi Decoction (四君子湯), and the most frequently used traditional Chinese medicines were Baizhu (), Gancao (et), Fuling (), Huangqi (), Dangshen (), Renshen (et), etc. The drug characteristics were mainly warm property, sweet taste and belong to the spleen meridians.The animal model with spleendeficiency syndrome was mainly constructed in SD rats, and the two-factor complex method of improper diet and swimming exhaustion was used. The systematic model evaluation method which synthesize apparent index, biochemical index and other index phases is scientific and reasonable. This study provides reference for the standardization of animal model of spleendeficiency syndrome.

spleendeficiency syndrome; animal model; evaluation index; Delphi method; medication characteristic; Sijunzi Decoction

R285

A

0253 - 2670(2023)14 - 4590 - 09

10.7501/j.issn.0253-2670.2023.14.020

2023-02-21

國家自然科學基金面上項目（82174246）；浙江省衛(wèi)生創(chuàng)新人才項目（浙衛(wèi)辦[2020]18號）

張裕惠（1996—），女，碩士研究生，從事中醫(yī)藏象理論及其應用研究。E-mail: yhzhang0601@163.com

朱愛松，女，教授，博士生導師，主要從事中醫(yī)病因病機、中醫(yī)治未病及心血管疾病研究。E-mail: liaoningzhongyi@hotmail.com

[責任編輯 潘明佳]