沉默CD147 對前列腺癌LNCaP 細胞糖酵解的影響

張斯琦, 孫美琪, 李澤顥, 劉丹丹, 胡 城, 方 芳, 王國慶

（1.北華大學(xué)醫(yī)學(xué)技術(shù)學(xué)院臨床生化檢驗教研室，吉林 吉林 132013；2.吉林醫(yī)藥學(xué)院檢驗學(xué)院免疫學(xué)技術(shù)教研室，吉林 吉林 132013）

腫瘤細胞中的能量代謝與正常細胞不同，其傾向于進行活躍的葡萄糖攝取和有氧條件下的糖酵解，即Warburg 效應(yīng)。研究［1］顯示：糖酵解促進了腫瘤進展和不良預(yù)后。前列腺癌（prostate cancer，PCa）是全球男性發(fā)病率排名第二位的腫瘤，已經(jīng)成為影響全球男性健康的主要原因之一［2］。腫瘤細胞具有獨特的葡萄糖代謝特點，在PCa 細胞移植瘤模型中，藥物聯(lián)合靶向Warburg 效應(yīng)和自噬導(dǎo)致腫瘤消退［3］。CD147 是免疫球蛋白超家族Ⅰ型跨膜糖蛋白，在多種癌細胞中高表達［4］。PCa 發(fā)展與CD147 表達密切相關(guān)［5］。研究［6］表明：在胰腺導(dǎo)管腺癌細胞中，低表達CD147 可降低丙酮酸激酶M2（pyruvate kinase M2，PKM2）蛋白表達水平進而抑制糖酵解作用。在肝星狀細胞中，低表達的CD147 抑制糖酵解相關(guān)蛋白乳酸脫氫酶（lactic dehydrogenase，LDH）活性和己糖激酶（hexokinase，HK）2 及葡萄糖轉(zhuǎn)運蛋白1（glucose transporter 1，Glut1）的表達［7］。CD147 可通過多種方式調(diào)節(jié)腫瘤細胞的糖酵解作用。但CD147 對PCa 細胞糖酵解的作用及其機制尚未完全闡明。因此，本研究通過構(gòu)建低表達CD147 的PCa 細胞系LNCaP，分析糖酵解中的產(chǎn)物及催化糖酵解限速酶的活性，探討CD147 對PCa 細胞糖酵解的影響，為PCa 臨床診斷和治療提供新的分子標(biāo)志物及其靶點。

1 材料及方法

1.1 細胞、主要試劑和儀器LNCaP/shCD147 細胞和陰性對照LNCaP/scramble 細胞由本實驗室保存［8］。RPMI-1640、胎牛血清（fetal bovine serum，F(xiàn)BS）、胰酶和青-鏈霉素雙抗購自美國Gibco 公司，反轉(zhuǎn)錄試劑盒和實時熒光定量PCR （real-time fluorescence quantitative PCR，RT-qPCR）試劑盒購自……