Cav3.2 基因在盆底電刺激治療小鼠壓力性尿失禁中的作用及其機制

劉劍鋒, 湯劍明, 陽 蓮, 張舒飛, 洪 莉

（武漢大學(xué)人民醫(yī)院婦產(chǎn)科，湖北 武漢 430060）

女 性 壓 力 性 尿 失 禁 （stress urinary incontinence，SUI）是指女性患者腹壓升高時尿液不自主外漏，多見于經(jīng)產(chǎn)婦和高齡女性患者，其發(fā)病率逐年升高，嚴(yán)重影響了患者的生活質(zhì)量和心理健康［1-2］。SUI 的治療方法主要分為手術(shù)和非手術(shù)治療。對于輕中度SUI 患者和無法接受手術(shù)治療的患者多采用行為療法、盆底肌鍛煉和藥物治療等非手術(shù)治療，其中盆底電刺激（pelvic floor electrical stimulation，PES）治療作為非手術(shù)治療方法之一，能有效防治SUI，但其治療相關(guān)機制尚未完全闡明［3-4］。研究［5-6］發(fā)現(xiàn)：盆底支持結(jié)構(gòu)細(xì)胞外基質(zhì)（extracellular matrix，ECM）重構(gòu)是SUI 的主要發(fā)病機制，包含Ⅰ型膠原（collagen type Ⅰ，ColⅠ）、Ⅲ型膠原（collagen type Ⅲ，Col Ⅲ）和細(xì)胞內(nèi)Ca2+濃度等一系列變化。T 型鈣通道是一種電壓依賴型Ca2+通道，在盆底組織中廣泛分布，在神經(jīng)電生理、激素分泌和平滑肌收縮等生理過程中發(fā)揮重要作用。T 型鈣通道蛋白包括 Cav 3.1、Cav 3.2 和Cav 3.3，本課題組前期研究［7-8］已經(jīng)證實：在小鼠成纖維細(xì)胞中以Cav 3.2 為主，且Cav 3.2 參與了PES 治療并升高細(xì)胞內(nèi)Ca2+濃度。本研究在野生型和Cav 3.2 基因敲除型小鼠SUI 模型上觀察電刺激產(chǎn)生的盆底膠原水平變化及其與Cav 3.2 基因的作用關(guān)系，進(jìn)一步探討PES 治療SUI 的作用及其相關(guān)機制，為臨床SUI 治療提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 實驗動物、主要試劑和儀器選取8～10 周、體質(zhì)量17～22 g、雌性、未生育的C57BL/6 小鼠30 只，由武漢大學(xué)人民醫(yī)院實驗動物中心提供，動物生產(chǎn)許可證號：SCXK（湘）2019-0004，小鼠Cav 3.2 基因敲除委托北京維通利華實驗動物技術(shù)有限公司進(jìn)行，購自美國Jackson 實驗室（編號：013707）。0.25% 胰蛋白酶、磷……