腫瘤異常蛋白、熱休克蛋白90α聯(lián)合血清腫瘤標(biāo)志物檢測(cè)對(duì)非小細(xì)胞肺癌的診斷價(jià)值

崔翠蓮，趙遷楠

應(yīng)急總醫(yī)院檢驗(yàn)科，北京 100028

肺癌是全球范圍內(nèi)最常見(jiàn)的惡性腫瘤之一，病死率高達(dá)90%，非小細(xì)胞肺癌占所有肺癌的80%，且約75%的患者就診時(shí)已發(fā)展至中晚期，生存率較低[1-2]。因此，早期診斷、及時(shí)治療是降低非小細(xì)胞肺癌患者死亡率的關(guān)鍵。血清腫瘤標(biāo)志物檢測(cè)具有無(wú)不良反應(yīng)、費(fèi)用低及操作簡(jiǎn)便等優(yōu)點(diǎn)，廣泛應(yīng)用于臨床[3]。腫瘤異常蛋白（tumor abnormal protein，TAP）、熱休克蛋白90α（heat shock protein 90α，HSP90α）可作為肺癌的診斷指標(biāo)，且可準(zhǔn)確反映肺癌患者的預(yù)后[4-5]。但目前臨床關(guān)于TAP、HSP90α聯(lián)合血清腫瘤標(biāo)志物檢測(cè)診斷非小細(xì)胞肺癌的研究較少。因此，本研究探討TAP、HSP90α聯(lián)合神經(jīng)元特異性烯醇化酶（neuron specific enolase，NSE）、癌胚抗原（carcinoembryonic antigen，CEA）、細(xì)胞角質(zhì)蛋白19 片段抗原21-1（cyto-keratin 19 fragment antigen 21-1，CYFRA21-1）檢測(cè)對(duì)非小細(xì)胞肺癌的診斷價(jià)值，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2019年5月至2022年4月應(yīng)急總醫(yī)院收治的非小細(xì)胞肺癌患者。納入標(biāo)準(zhǔn)：符合《2015年肺癌診療指南：共識(shí)和爭(zhēng)議》[6]中關(guān)于肺癌的診斷標(biāo)準(zhǔn)，經(jīng)病理學(xué)檢查確診為非小細(xì)胞肺癌；無(wú)放化療史。排除標(biāo)準(zhǔn)：合并肺部感染或肝腎功能不全；存在精神、認(rèn)知功能障礙。依據(jù)納入和排除標(biāo)準(zhǔn)，本研究共納入90 例非小細(xì)胞肺癌患者，作為肺癌組，其中男56 例，女34 例；年齡48～76 歲，平均（56.29±5.41）歲；臨床分期：Ⅰ期12 例，Ⅱ期49 例，Ⅲ期29 例。另選取同期在應(yīng)急總醫(yī)院健康體檢的90 例體檢者，作為對(duì)照組，其中男57 例，女33 例；年齡48～75 歲，平均（56.25±5.38）歲。兩組受試者性別、年齡比較，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P﹥0.05），具有可比性。本研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)通過(guò)，所有患者均知情同意。

1.2 檢測(cè)方法

抽取兩組受試者空腹靜脈血5 ml，4000 r/min離心10 min，離心半徑8 cm，-40 ℃冰箱保存待檢。采用化學(xué)發(fā)光免疫法檢測(cè)兩組受試者血清NSE、CEA、CYFRA21-1 水平，采用酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定檢測(cè)血清HSP90α水平。

采集兩組受試者空腹靜脈血，均勻推片，晾干后每張血片間隔均勻滴加TAP 試劑3 滴，2 h 后測(cè)定TAP 面積。

1.3 觀察指標(biāo)和評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)

①比較兩組受試者血清TAP 面積及HSP90α、NSE、CEA、CYFRA21-1 水平。②以病理學(xué)檢查結(jié)果為金標(biāo)準(zhǔn)，評(píng)估TAP 面積及HSP90α、NSE、CEA、CYFRA21-1 聯(lián)合檢測(cè)對(duì)非小細(xì)胞肺癌的診斷價(jià)值，將對(duì)照組體檢者視為病理結(jié)果陰性。陽(yáng)性判定標(biāo)準(zhǔn)：TAP 面積為1～120 μm2判定為正常或無(wú)明顯凝聚物，TAP 面積為121～225 μm2判定為異常且凝聚物較小，TAP 面積﹥225 μm2判定為異常且凝聚物較大，截?cái)嘀禐?03.96 μm2，HSP90α截?cái)嘀禐?4.61 ng/ml，NSE 截?cái)嘀禐?3.33 ng/ml，CEA 截?cái)嘀禐?.90 ng/ml，CYFRA21-1截?cái)嘀禐?.66 ng/ml，上述指標(biāo)高于截?cái)嘀祫t判定為陽(yáng)性。當(dāng)聯(lián)合檢測(cè)時(shí)，任何一個(gè)指標(biāo)陽(yáng)性即判定為陽(yáng)性。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 21.0 軟件對(duì)所有數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，組間比較采用t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料以例數(shù)和率（%）表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)；以P﹤0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 血清HSP90α、NSE、CEA、CYFRA21-1 水平和TAP 面積的比較

肺癌組患者血清HSP90α、NSE、CEA、CYFRA21-1 水平均明顯高于對(duì)照組，TAP 面積明顯大于對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P﹤0.01）。（表1）

表1 兩組受試者血清HSP90α、NSE、CEA、CYFRA21-1 水平和TAP 面積的比較

2.2 血清TAP 面積、HSP90α、NSE、CEA、CYFRA21-1 單獨(dú)及聯(lián)合檢測(cè)對(duì)非小細(xì)胞肺癌的診斷價(jià)值

五項(xiàng)聯(lián)合檢測(cè)診斷非小細(xì)胞肺癌的靈敏度為93.33%，陰性預(yù)測(cè)值為91.55%，均高于血清CEA、NSE、CYFRA21-1、TAP 面積、HSP90α單獨(dú)檢測(cè)。（表2、表3）

表2 血清TAP面積、HSP90α、NSE、CEA、CYFRA21-1單獨(dú)及聯(lián)合檢測(cè)診斷非小細(xì)胞肺癌的結(jié)果與病理學(xué)診斷結(jié)果的對(duì)照

表3 血清TAP 面積、HSP90α、NSE、CEA、CYFRA21-1 單獨(dú)及聯(lián)合檢測(cè)對(duì)非小細(xì)胞肺癌的診斷價(jià)值

3 討論

非小細(xì)胞肺癌的發(fā)生與吸煙、職業(yè)暴露、環(huán)境污染、肺結(jié)核、遺傳等因素有關(guān)，近年來(lái)，肺癌的發(fā)病率逐年上升，且呈年輕化趨勢(shì)，嚴(yán)重威脅患者的生命健康[7-8]。非小細(xì)胞肺癌多不易診斷，常因發(fā)病隱匿和早期無(wú)明顯癥狀等而延誤診斷。因此，對(duì)非小細(xì)胞肺癌患者進(jìn)行早期診斷已成為當(dāng)今醫(yī)學(xué)研究者的工作重點(diǎn)[9]。

在非小細(xì)胞肺癌的診斷中，細(xì)胞學(xué)檢查必不可少，但該方式屬于有創(chuàng)操作，且樣本采集難度較大，操作復(fù)雜，難以廣泛應(yīng)用于早期腫瘤的篩查中；影像學(xué)檢查有漏診、誤診的風(fēng)險(xiǎn)，血清腫瘤標(biāo)志物可為非小細(xì)胞肺癌的早期診斷提供參考依據(jù)[10-12]。

CEA 是廣譜腫瘤標(biāo)志物，是非小細(xì)胞肺癌最常見(jiàn)的診斷指標(biāo)，在健康者體內(nèi)含量較低，而腫瘤患者可分泌CEA，使血液、體液中的CEA 水平異常升高[13-14]。CEA 在肺癌、胃腸腫瘤及乳腺癌等多種腫瘤組織中高表達(dá)，F(xiàn)erreira 等[15]研究表明，血清CEA 是非小細(xì)胞肺癌患者預(yù)后的獨(dú)立影響因素。王秀梅[16]的研究結(jié)果顯示，乳腺癌患者血清CEA水平明顯升高，且與患者的不良預(yù)后相關(guān)，但CEA單獨(dú)檢測(cè)診斷非小細(xì)胞肺癌的假陽(yáng)性率較高，需聯(lián)合其他腫瘤標(biāo)志物共同檢測(cè)。NSE 是一種神經(jīng)內(nèi)分泌組織中的糖酵解酶，診斷非小細(xì)胞肺癌的靈敏度及特異度均較高，在監(jiān)測(cè)非小細(xì)胞肺癌和神經(jīng)母細(xì)胞瘤病情嚴(yán)重程度、臨床療效和預(yù)后中有重要意義[17-18]。CYFRA21-1 是由細(xì)胞結(jié)構(gòu)中細(xì)胞角蛋白19 的兩個(gè)單克隆抗體組成，當(dāng)腫瘤細(xì)胞溶解或壞死脫落時(shí)，會(huì)釋放大量的CYFRA21-1，因此，CYFRA21-1 可反映腫瘤細(xì)胞活性[19-20]。TAP 與腫瘤的轉(zhuǎn)移關(guān)系密切，當(dāng)腫瘤細(xì)胞分化到一定程度時(shí)，TAP 釋放入血，大量存在于外周血中。宋妍[21]的研究結(jié)果顯示，TAP 聯(lián)合CYFRA21-1、CEA、NSE 診斷肺癌的靈敏度和特異度均較高。HSP90α是應(yīng)激蛋白，機(jī)體受到刺激產(chǎn)生應(yīng)激反應(yīng)時(shí)HSP90α大量分泌，能夠被腫瘤細(xì)胞分泌到細(xì)胞外發(fā)揮作用；且HSP90α具有分子伴侶功能，在細(xì)胞內(nèi)可與多種細(xì)胞周期信號(hào)通路中的關(guān)鍵蛋白酶相互作用，與腫瘤細(xì)胞周期、分化等密切相關(guān)[22-23]。

本研究結(jié)果顯示，肺癌組患者血清HSP90α、NSE、CEA、CYFRA21-1 水平均明顯高于對(duì)照組，TAP 面積明顯大于對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P﹤0.01）；五項(xiàng)聯(lián)合檢測(cè)診斷非小細(xì)胞肺癌的靈敏度為93.33%、陰性預(yù)測(cè)值為91.55%，均高于血清CEA、NSE、CYFRA21-1、TAP 面積、HSP90α單獨(dú)檢測(cè)，特異度有所降低，表明聯(lián)合檢測(cè)可提高非小細(xì)胞肺癌的診斷效能，降低誤診率。

綜上所述，TAP、HSP90α、NSE、CEA、CYFRA21-1 聯(lián)合檢測(cè)可提高對(duì)非小細(xì)胞肺癌的診斷效能。