HIV感染患者血清白細(xì)胞介素與淋巴細(xì)胞水平的關(guān)系

韓陽 葉衛(wèi)豐 侯振宇 朱青 韓強(qiáng)

人類免疫缺陷病毒(human immunodeficiency Virus,HIV)進(jìn)入人體后主要侵犯免疫系統(tǒng),損害機(jī)體細(xì)胞免疫功能,表現(xiàn)為CD4+、CD8+T淋巴細(xì)胞水平不斷降低,最終導(dǎo)致人體免疫功能缺陷,增加各種感染、腫瘤發(fā)生風(fēng)險,已成為重大公共衛(wèi)生挑戰(zhàn)之一[1,2]。血液中CD4+、CD8+T淋巴細(xì)胞水平可有效反映機(jī)體細(xì)胞免疫功能,是HIV感染患者病情判定、臨床進(jìn)展、治療效果的重要評價指標(biāo)[3,4]。積極尋找與T淋巴細(xì)胞相關(guān)的指標(biāo),或可為HIV感染患者的治療提供新的靶點。白細(xì)胞介素是參與機(jī)體免疫激活、免疫應(yīng)答、信息傳遞、免疫調(diào)節(jié)等多種過程的一類細(xì)胞因子。相關(guān)研究指出,HIV感染后,患者體內(nèi)多種白細(xì)胞介素表達(dá)可發(fā)生明顯改變[5]。由此,推測HIV感染患者血清白細(xì)胞介素與T淋巴細(xì)胞水平存在某種聯(lián)系。鑒于此,本研究觀察HIV感染患者血清白細(xì)胞介素、淋巴細(xì)胞水平,并分析其關(guān)系,以期為臨床治療尋找新的靶點。

1 資料與方法

1.1 一般資料 回顧性分析2019年3月至2022年7月醫(yī)院收治的128例HIV感染患者臨床資料。128例HIV感染患者中男102例,女26例;年齡:<60歲119例,≥60歲9例;婚姻狀況:未婚58例,已婚32例,喪偶2例,離異36例;感染途徑:性傳播107例,血液傳播21例。

1.2 納入與排除標(biāo)準(zhǔn)

1.2.1 納入標(biāo)準(zhǔn):①HIV感染符合《中國艾滋病診療指南(2018版)》[6]中相關(guān)診斷標(biāo)準(zhǔn),經(jīng)免疫印跡實驗證實HIV感染;②首次就診;③因機(jī)會性感染入院就診;③臨床資料完整。

1.2.2 排除標(biāo)準(zhǔn):①既往有抗病毒治療史;②近6個月使用免疫抑制劑、干擾素、調(diào)節(jié)劑、糖皮質(zhì)激素等影響機(jī)體免疫狀態(tài)的藥物;③合并嚴(yán)重免疫系統(tǒng)功能異常;③合并嚴(yán)重血液系統(tǒng)疾病;⑤合并嚴(yán)重肝腎功能不全;⑥妊娠期女性。

1.3 方法

1.3.1 血清白細(xì)胞介素檢測:入院24 h內(nèi)采集患者空腹靜脈血3 ml,離心(離心速度3 500 r/min)10 min,取血清,采用酶聯(lián)免疫吸附法測定白細(xì)胞介素-1β(interleukin-1 β,IL-1β)、白細(xì)胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、白細(xì)胞介素-10(interleukin-10,IL-10)水平,嚴(yán)格按照檢測試劑盒(晶美生物科技)說明進(jìn)行相關(guān)操作。

1.3.2 淋巴細(xì)胞水平檢測:取50 μl抗凝全血,加入20 μl CD4-FITC/CD8-PE/CD3-PerCP單克隆混合抗體振蕩混勻,室溫下避光孵育20 min,使用紅細(xì)胞裂解液裂解紅細(xì)胞,經(jīng)流式細(xì)胞儀(BD FACSAria Ⅱ)檢測CD4+、CD8+T淋巴細(xì)胞數(shù)。

1.3.3 資料收集:詳細(xì)記錄患者性別(男、女)、年齡(<60歲、≥60歲)、婚姻狀況(未婚、已婚、喪偶、離異)、感染途徑(性傳播、血液傳播)、病毒載量[取2 ml抗凝全血,離心(離心速度2 000 r/min)10 min,分離血漿并將其移至-76℃無菌凍存管中備用。于37℃下震蕩助融樣本,上機(jī)檢測。取1 100 μl血漿于全自動病毒載量儀上定量檢測HIV RNA。實驗設(shè)強(qiáng)陽性、弱陽性、陰性質(zhì)控品各一個,采用內(nèi)標(biāo)法定量檢測樣本,檢測線性范圍:40～107copies/ml。參照李強(qiáng)等[7]研究,依據(jù)病毒載量分為<40 copies/ml、40～103copies/ml、>103copies/ml]、吸煙史[有、無,吸煙指數(shù)(吸煙支數(shù)×吸煙年限)>200視為有吸煙史]。

2 結(jié)果

2.1 HIV感染患者血清白細(xì)胞介素、淋巴細(xì)胞水平 128例HIV感染患者IL-1β水平(2.92±1.04)pg/ml、IL-6水平為(4.36±1.56)pg/ml、IL-10水平為(3.62±1.13)pg/ml、CD4+水平為(416.41±68.59)個/μl、CD8+水平為(1 418.93±94.18)個/μl。

2.2 不同臨床特征的HIV感染患者CD4+水平比較 病毒載量<40 copies/ml的HIV感染患者CD4+水平高于病毒載量40～103copies/ml及>103copies/ml的患者,有吸煙史的HIV感染患者CD4+水平低于無吸煙史的患者,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05);不同性別、年齡、婚姻狀況、感染途徑的HIV感染患者CD4+水平比較,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。見表1。

表1 不同臨床特征的HIV感染患者CD4+水平比較 個/μl,

2.3 不同臨床特征的HIV感染患者CD8+水平比較 病毒載量<40 copies/ml的HIV感染患者CD8+水平高于病毒載量40～103copies/ml及>103copies/ml的患者,有吸煙史的HIV感染患者CD8+水平低于無吸煙史的患者,差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05);不同性別、年齡、婚姻狀況、感染途徑的HIV感染患者CD8+水平比較,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。見表2。

表2 不同臨床特征的HIV感染患者CD8+水平比較 個/μl,

2.4 HIV感染患者血清白細(xì)胞介素與淋巴細(xì)胞水平的關(guān)系 經(jīng)Pearson相關(guān)性分析,HIV感染患者血清IL-1β、IL-6、IL-10水平與CD4+及CD8+呈負(fù)相關(guān)(P<0.05)。見表3。

表3 HIV感染患者血清白細(xì)胞介素與淋巴細(xì)胞水平的關(guān)系

2.5 病毒載量、吸煙史與HIV感染患者淋巴細(xì)胞水平的關(guān)系 經(jīng)Kendall’stau-b相關(guān)性分析,病毒載量與HIV感染患者CD4+、CD8+水平呈負(fù)相關(guān)(P>0.05);經(jīng)點二列相關(guān)性分析,結(jié)果顯示,吸煙史與HIV感染患者CD4+、CD8+水平呈負(fù)相關(guān)(P<0.05)。見表4。

表4 病毒載量、吸煙史與HIV感染患者淋巴細(xì)胞水平的關(guān)系

3 討論

HIV主要損害靶細(xì)胞為T淋巴細(xì)胞,HIV感染患者CD4+、CD8+T淋巴細(xì)胞的各項功能可受到明顯限制。在HIV感染初期,CD4+、CD8+T淋巴細(xì)胞水平可明顯上升,并分泌多種細(xì)胞以消滅被感染的細(xì)胞,但隨病情進(jìn)展,CD4+、CD8+水平可逐漸降低,引發(fā)免疫系統(tǒng)功能缺陷[8]。

T淋巴細(xì)胞數(shù)量、功能紊亂在HIV感染過程中發(fā)揮核心作用,其中CD4+主要起到協(xié)助細(xì)胞免疫、體液免疫的作用,CD8+主要起到殺傷和抑制的作用,可維持、誘導(dǎo)免疫耐受[9,10]。一般情況下,健康人群的CD4+T淋巴細(xì)胞數(shù)量為500～1 600/ml,但當(dāng)HIV感染時,機(jī)體CD4+T淋巴細(xì)胞數(shù)量可逐漸降低,當(dāng)其降至200/ml時,機(jī)體則可能發(fā)生感染或腫瘤[11]。CD8+T淋巴細(xì)胞屬機(jī)體免疫效應(yīng)因子,可通過T淋巴細(xì)胞效應(yīng)釋放多種因子清除感染靶細(xì)胞的病毒,是抵御HIV感染的重要細(xì)胞[12]。因此,臨床常采用CD4+、CD8+T淋巴細(xì)胞數(shù)量來判斷HIV感染患者預(yù)后情況。

研究指出,IL-1β在健康人群血清中呈低表達(dá),感染、炎性等刺激可誘導(dǎo)IL-1β水平升高[13]。當(dāng)機(jī)體發(fā)生HIV感染時,可對巨噬細(xì)胞、中性粒細(xì)胞等產(chǎn)生刺激,促使IL-1β大量釋放,引起炎性反應(yīng),直接導(dǎo)致炎性損傷;此外,IL-1β還可介導(dǎo)多種促炎性細(xì)胞因子合成,間接起到促炎作用,影響患者預(yù)后[14]。已有研究證實,HIV感染可刺激巨噬細(xì)胞、中性粒細(xì)胞增加IL-6分泌量,即便在病毒抑制條件下,HIV感染患者血清IL-6水平仍處于較高水平[15]。有研究指出,IL-6與HIV感染患者癌癥、心血管疾病、感染性疾病等不良臨床結(jié)局有關(guān)[16,17]。血清IL-6水平異常升高表明存在活動性炎性,可能對患者預(yù)后產(chǎn)生重要影響。IL-10是Th2型細(xì)胞因子,可由多種類型免疫細(xì)胞產(chǎn)生,可對Th1反應(yīng)產(chǎn)生間接抑制的作用。有研究指出,HIV導(dǎo)致的慢性感染狀態(tài)下,IL-10可對T細(xì)胞產(chǎn)生持續(xù)抑制作用,從而促進(jìn)病毒感染活性[18]。

本研究發(fā)現(xiàn),IL-1β、IL-6、IL-10與CD4+、CD8+呈負(fù)相關(guān),即IL-1β、、IL-6、IL-10水平越高CD4+、CD8+水平越低。分析其原因,血清IL-1β、IL-6、IL-10水平異常升高可引起過度炎性反應(yīng),而過度炎性反應(yīng)又可引起免疫功能紊亂,加重機(jī)體免疫損傷,降低CD4+、CD8+T淋巴細(xì)胞水平。而CD4+、CD8+T淋巴細(xì)胞水平降低可導(dǎo)致細(xì)胞溶解功能、殺傷能力降低,致使免疫應(yīng)答負(fù)性調(diào)節(jié)占據(jù)優(yōu)勢,為HIV復(fù)制創(chuàng)造良好條件,進(jìn)而引起炎性介質(zhì)、細(xì)胞因子釋放入血[19]。此外,IL-10可對T細(xì)胞產(chǎn)生直接作用,對其增殖、功能分化產(chǎn)生限制;還可對抗原提呈細(xì)胞產(chǎn)生作用,抑制刺激分子表達(dá),阻礙初始T細(xì)胞成熟,減少CD4+、CD8+T淋巴細(xì)胞數(shù)目[20]。由此可見,白細(xì)胞介素在HIV感染中扮演重要角色,在未來,臨床或許可采取抗炎措施,盡可能降低患者血清炎性因子水平,促進(jìn)CD4+、CD8+T淋巴細(xì)胞水平恢復(fù),從而改善患者預(yù)后。

HIV病毒載量越高則表明患者體內(nèi)復(fù)制數(shù)量越多,在病毒直接或間接作用下,CD4+、CD8+T淋巴細(xì)胞破壞越多,進(jìn)而減少其數(shù)量。此外,本研究結(jié)果還顯示,吸煙史與HIV感染患者CD4+、CD8+水平呈負(fù)相關(guān)。其原因主要是吸煙時多種有害物質(zhì)可反復(fù)刺激呼吸道,長此以往可降低肺功能,影響機(jī)體免疫力,降低CD4+、CD8+T淋巴細(xì)胞水平。因此,針對HIV感染患者,臨床應(yīng)積極給予抗病毒治療及戒煙干預(yù),以改善患者CD4+、CD8+T淋巴細(xì)胞水平,促進(jìn)免疫功能恢復(fù),利于患者預(yù)后。

綜上所述,HIV感染患者血清IL-1β、IL-6、IL-10水平與CD4+、CD8+水平密切相關(guān),深入研究血清IL-1β、IL-6、IL-10影響CD4+、CD8+水平的具體機(jī)制,或許可為HIV感染患者的治療開辟新的思路。