15%吡丙醚·氟啶蟲酰胺懸乳劑高效液相色譜分析

白 亮，馬 超，趙宜君，2，張 喆，張立群，徐 軍，2*，陳 昶,2*

（1.河北中保綠農作物科技有限公司，北京 100193；2.中國農業科學院植物保護研究所，北京 100193)

吡丙醚（Pyriproxyfen）又名蚊蠅醚，是一種由日本住友化學公司開發的殺蟲劑。吡丙醚通過作用于昆蟲的繁殖和蛻變過程，達到有效控制害蟲的目的。其具有光穩定性好、用藥量少、效果佳、對作物安全等特點，符合生態環保的標準[2]。吡丙醚對介殼蟲、煙粉虱（Bemisia tabaci）、甜菜夜蛾（Spodoptera exigua）、小菜蛾（Plutella xylostella）、梨黃木虱（Psylla pyricola）、斜紋夜蛾（Spodoptera litura）、薊馬等有較好的防治效果[3-5]。氟啶蟲酰胺（Flonicamid）是一種由日本石原產業株式會社發現并開發的新型低毒吡啶酰胺類殺蟲劑。其具有內吸和觸殺作用，對蚜蟲等刺吸式口器害蟲有良好的神經毒性和快速拒食活性，且其拒食作用具有不可恢復性，被阻止吸食的害蟲最終因饑餓而導致死亡[6]。氟啶蟲酰胺對蔬菜蚜蟲、蘋果黃蚜（Aphis citricola）、柑橘蚜蟲等均具有較好的防治效果[7]。

15%吡丙醚·氟啶蟲酰胺是一種高效低毒的殺蟲劑，但對其懸乳劑的分析方法目前尚未見報道。本文采用高效液相色譜法對丙醚和氟啶蟲酰胺進行定量分析，旨在挖掘一種操作簡便，分離效果好，檢測結果準確性高的分析方法，為吡丙醚·氟啶蟲酰胺產品的質量控制提供技術支撐。

1 材料與方法

1.1 試劑

甲醇（色譜純），默克（德國）股份有限公司；乙腈（色譜純），美國飛世爾科技公司；吡丙醚標準品（純度98.5%）和氟啶蟲酰胺標準品（純度98.9%），沈陽化工研究院；15%吡丙醚·氟啶蟲酰胺懸乳劑（7.5%吡丙醚＋7.5%氟啶蟲酰胺），河北中保綠農作物科技有限公司；水（新蒸二次蒸餾水），實驗室自制。

1.2 儀器

Waters e2695高效液相色譜儀、2489UV-Vis紫外檢測器，沃特世科技（上海）有限公司；C18色譜柱（4.6 mm×200 mm，5 μm），北京海誠中儀科技有限公司；UV-6100紫外-可見光分光光度計，上海元析儀器有限公司；真空抽濾器（內置孔徑為0.45 μm的水系濾膜），天津科億龍試驗設備有限公司；0.45 μm有機濾膜，上海密粒膜分離技術有限公司；AL104萬分之一電子天平，梅特勒-托利多儀器（上海）有限公司。

1.3 液相色譜分析條件

流動相：甲醇-乙腈-水（20∶55∶25，V/V/V），經濾膜過濾，超聲脫氣后待測；柱溫：室溫；流速：0.8 mL/min，檢測波長：254 nm，進樣量體積：2 μL。

1.4 溶液配制

準確稱取吡丙醚標準品、氟啶蟲酰胺標準品各0.05 g（精確至0.000 2 g），置于100 mL容量瓶中，加入適量甲醇溶解，超聲振蕩20 min后，取出冷卻至室溫，定容，備用。

準確稱取含吡丙醚和氟啶蟲酰胺0.65 g（精確至0.000 2 g）的樣品，置于100 mL的容量瓶中，加入甲醇溶解，超聲振蕩20 min后，取出冷卻至室溫，定容，備用。

1.5 有效成分質量分數測定

在1.3節中檢測樣品有效成分的分析條件下平衡檢測器和色譜柱，使儀器達到最佳使用狀態（基線波動范圍應小于1×10-3），取1.4節中配制好的標準溶液和樣品溶液進行測定。

1.6 計算

樣品中的有效成分吡丙醚和氟啶蟲酰胺的質量分數（w）按式（1）進行計算。

式中：A1為標樣溶液中吡丙醚（氟啶蟲酰胺）峰面積的平均值，mAU·min；A2為試樣溶液中吡丙醚（氟啶蟲酰胺）峰面積的平均值，mAU·min；m1、m2分別為吡丙醚（氟啶蟲酰胺）標樣、試樣的質量，g；P為標樣中吡丙醚（氟啶蟲酰胺）的質量分數，%。

2 結果與分析

2.1 檢測波長的選擇

利用紫外-可見光分光光度計分別對吡丙醚和氟啶蟲酰胺的標準溶液進行全波長掃描，得到在190～300 nm波長范圍內的紫外光譜圖（圖1）。在254 nm波長條件下，吡丙醚和氟啶蟲酰胺均有較強的吸收峰，且吸收比例合適，各種雜質均不影響吡丙醚和氟啶蟲酰胺的測定。因此，本方法選擇254 nm作為檢測波長。

圖1 吡丙醚和氟啶蟲酰胺紫外吸收光譜圖

2.2 流動相的選擇

以甲醇、乙腈和水為流動相，調節三者的比例對試樣進行分離測試。當甲醇、乙腈和水的體積比為20∶55∶25時，有效成分吡丙醚和氟啶蟲酰胺與雜質可以較好地分離開來，且基線平穩，峰型之間互無干擾（圖2、圖3）。

圖2 吡丙醚和氟啶蟲酰胺標樣液相色譜圖

圖3 吡丙醚和氟啶蟲酰胺試樣液相色譜圖

2.3 分析方法的線性關系

配制不同濃度的標樣溶液，在1.3節色譜條件下分別進行分析，以吡丙醚和氟啶蟲酰胺的質量濃度為橫坐標，峰面積為縱坐標，繪制標準曲線，計算2種有效成分的線性回歸方程。吡丙醚的質量濃度在0.5～5.0 mg/mL之間，與其相應的峰面積呈良好的線性關系，線性方程為y=300 083.043 8x＋14 136.106 8，R2=0.999 8；氟啶蟲酰胺的質量濃度在0.5～5.0 mg/mL之間，與其相應的峰面積呈良好的線性關系，線性方程為y=38 283.600 0x-4 732.600 0，R2=0.999 2。

2.4 分析方法的精密度

在1.3所述色譜檢測條件下，對15%吡丙醚·氟啶蟲酰胺懸乳劑試樣進行5次獨立測試，分析方法的精密度由表1結果可知，樣品中吡丙醚的相對標準偏差為0.003%，氟啶蟲酰胺的相對標準偏差為0.004%，分別小于Horwitz公式[8]［2(1-0.5logC)×0.67，其中C為樣品中有效成分含量的平均值］的計算值0.989 5。以上結果均符合分析要求，說明該分析方法的精密度良好。

表1 分析方法的精密度結果（n=5）

2.5 分析方法的準確度

準確稱取5份15%吡丙醚·氟啶蟲酰胺SE樣品再分別加入吡丙醚標準品（0.05 g）和氟啶蟲酰胺標準品（0.05 g），在1.3所述的色譜條件下分別進行分析，結果見表2。吡丙醚和氟啶蟲酰胺的平均回收率分別為99.20%和99.05%，均可以滿足分析方法的要求，說明該分析方法準確度良好。

表2 分析方法的準確度結果（n=5）

3 結論

本文建立了能夠同時對15%吡丙醚·氟啶蟲酰胺SE中的有效成分吡丙醚和氟啶蟲酰胺進行檢測的高效液相色譜分析方法，并對此方法進行合理的方法驗證。結果表明，吡丙醚和氟啶蟲酰胺分離度良好，精密度和準確度高，線性關系良好，相對標準偏差分別為0.003%和0.004%，平均回收率分別為99.20%和99.05%。本方法操作便捷，是進行含有吡丙醚和氟啶蟲酰胺復配樣品質量控制較為理想的分析方法。