基于TLR4/NF-κB信號通路探討肅金方治療感染后咳嗽風邪犯肺證臨床效果及機制

馬 真,張曉陽,楊久清,鄧敬華,王玉棟

感染后咳嗽是臨床常見呼吸系統疾病,主要由上呼吸道感染引起,屬于亞急性咳嗽,指急性期感染得到控制后,咳嗽仍可持續3～8周,且肺部檢查無陽性特征,雖為小恙,卻頗難治愈[1-2]。現感染后咳嗽的致病機制尚未明確,但普遍認為與氣道炎癥、氣道黏膜損傷有關[3-4]。有研究證實,TOLL樣受體4(TLR4)/核因子-κB(NF-κB)信號通路的過度表達可引起炎癥反應,對感染后咳嗽患者病情診斷具有較高敏感性[5]。目前,西醫主要使用中樞性鎮咳藥、糖皮質激素和抗組胺H1受體拮抗劑等治療感染后咳嗽,但此類藥物長期使用患者易產生耐受性,且不良反應較多。中醫將感染后咳嗽歸為“外感咳嗽”范疇,并認為肺為嬌臟,與天氣直接相通,外感風邪,伏于肺絡,肺失宣降,則肺氣上逆,故而發病[6]。鑒于此,本研究在治療上從宣肺化痰、疏風散寒、滋陰補氣入手,基于TLR4/NF-κB信號通路深入挖掘我院中醫師經驗用方肅金方治療感染后咳嗽風邪犯肺證臨床效果及機制,現報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2020年5月—2022年6月來我院就診符合中西醫診斷標準[7-8]的感染后咳嗽100例,按治療方案不同將其分為聯合組和常規組2組各50例。2組性別、年齡和病程等一般資料比較差異無統計學意義(P>0.05),見表1,具有可比性。

表1 2組感染后咳嗽一般資料比較

1.2 治療方法

常規組采用常規藥物治療,給予二氧丙嗪片(國藥準字H14020610,山西國潤制藥有限公司)每次5 mg,每日3次口服;肺力咳膠囊(國藥準字Z20025240,貴州健興藥業有限公司)每次0.9 g,每日3次口服。根據患者臨床癥狀,可適當增減藥物劑量。聯合組采用肅金方聯合常規藥物治療。常規藥物治療方法等同常規組。肅金方處方組成:蜜枇杷葉20 g,蟬蛻8 g,紫菀10 g,白前15 g,僵蠶10 g,烏梅15 g,前胡20 g,荊芥10 g,蘆根30 g,射干15 g,橘紅10 g,防風15 g,牛蒡子10 g,細辛3 g,五味子10 g,甘草10 g。隨癥加減:咽干加麥冬12 g;痰多加浙貝15 g;咽痛加黃芩20 g;咽癢加木蝴蝶3 g;大便發干加炒卜子15 g,瓜蔞30 g,枳實10 g。涼水浸泡1 h后,急火煎開,改慢火煎25 min,將濾液濾出,復加水再煎,二煎混合,分溫再服,每日1劑,緩慢服藥使藥液浸潤咽喉部。2組均連續治療2周。

1.3 觀察指標

治療前、治療1周后和治療2周后評價比較2組中醫證候積分、咳嗽癥狀積分、生活質量和TLR4/NF-κB信號通路相關指標。中醫證候積分參照《中醫病證診斷療效標準》[9]中咳嗽的臨床表現,將主癥咳嗽、咽干、咽癢按嚴重程度分別計0、2、4、6分,次癥咳痰按嚴重程度計0、1、2、3分,分值越高表明相應癥狀越嚴重。咳嗽癥狀積分由患者據自身24 h的咳嗽癥狀進行計分,日間和夜間咳嗽分值范圍均為0～5分,分值越高表明咳嗽越劇烈,總分=日間評分+夜間評分。采用中文版萊徹斯特咳嗽生活質量問卷(LCQ)評價患者生活質量,該問卷包括心理問題(7項)、生理問題(8項)和社會問題(4項)3個維度,19個評價因子,總分與生活質量呈正相關。抽取2組清晨空腹靜脈血3～5 mL,在4 ℃溫度條件下高速離心15 min(3000 r/min),取上清液,應用F.A.M.E.24/30型酶標儀(瑞士哈美頓公司)采用酶聯免疫吸附試驗檢測TLR4、NF-κB、腫瘤壞死因子-α(TNF-α)、白細胞介素-6(IL-6)。

治療2周后,評價比較2組臨床效果。參照中醫癥候積分對2組臨床療效進行評價比較。療效指數=(治療前分數-治療后分數)/治療前分數×100%。總有效率=(治愈+顯效+有效)/總例數×100%[10]。觀察比較2組治療期間不良反應,包括便秘和口干等。

1.4 統計學方法

2 結果

2.1 中醫證候積分比較

2組組內不同時間咳嗽、咽干、咽癢和咳痰積分總體比較差異有統計學意義(P<0.01)。治療1和2周后,咳嗽、咽干、咽癢和咳痰積分2組均低于治療前,且聯合組低于常規組(P<0.05)。見表2。

表2 2組感染后咳嗽不同時間點中醫證候積分比較分)

2.2 咳嗽癥狀積分和LCQ評分比較

2組組內不同時間咳嗽癥狀積分和LCQ評分總體比較差異均有統計學意義(P<0.01)。治療1和2周后,咳嗽日間和夜間積分2組均低于治療前,且聯合組低于常規組;LCQ評分2組均高于治療前,且聯合組高于常規組(P<0.05)。見表3。

表3 2組感染后咳嗽不同時間點咳嗽癥狀積分和LCQ評分比較分)

2.3 TLR4/NF-κB信號通路相關指標比較

2組組內不同時間TLR4/NF-κB信號通路相關指標總體比較差異有統計學意義(P<0.01)。治療1和2周后,TLR4、NF-κB、TNF-α、IL-6 2組低于治療前,且聯合組低于常規組(P<0.05)。見表4。

表4 2組感染后咳嗽不同時間點TLR4/NF-κB信號通路相關指標比較

2.4 臨床療效比較

治療2周后,總有效率聯合組高于常規組(P<0.01),見表5。

表5 2組感染后咳嗽治療2周后臨床效果比較[例(%)]

2.5 不良反應比較

治療期間,聯合組出現口干1例,常規組出現便秘2例,口干1例,2組不良反應比較差異無統計學意義(P>0.05)。

3 討論

《景岳全書·咳嗽篇》中記載:“咳證雖多,無非肺病”,可見咳嗽與肺關系密切[11]。我院王玉棟主任根據感染后咳嗽“風、寒、燥、痰”等病理因素,結合“風為百病之長”“風盛則動,風盛則痙急”的論述,提出“風邪”是感染后咳嗽主要病因。外風侵襲肌表,而風邪為六淫之首,邪氣由皮毛或口鼻而入,伏于肺腑,遏阻肺氣,外邪滯留,久而不去,日久而肺氣不宣,氣機上犯咽喉,故而咳;且風性主動,善行而數變,風盛則癢,癢咳難止,寒熱之象不顯,故治則應以清咽利喉、疏風宣肺為主[12-13]。

肅金方為我院協定處方,強調辨證施治,主要由蟬蛻、僵蠶、前胡、橘紅、紫菀、白前、烏梅、荊芥、蜜枇杷葉和防風等藥物組成,可隨癥加減。方中僵蠶、蟬蛻皆為蟲類,善走竄,性剽悍,可止咳解痙,祛風止癢;前胡苦泄辛散微寒,能散風清熱,降氣化痰;紫菀辛散苦降溫潤,可潤肺下氣,消痰止咳;白前祛痰止咳;烏梅斂肺生津;蜜枇杷葉化痰止咳;荊芥微溫不燥,辛而不烈,疏風止痙,散邪開郁;蘆根味甘性寒,可清熱瀉火,生津止渴;射干性寒微毒,主治咳嗽氣喘,咽喉腫痛;橘紅燥濕化痰;防風疏風解表,祛風解痙;牛蒡子疏風散熱,宣肺利咽;細辛祛風散寒;五味子鎮咳祛痰;甘草不僅能潤肺止咳,還可益氣補中,調和諸藥[14-16]。縱觀此方藥性平和,既無大辛大熱,又無大苦大寒之品,契合感染后咳嗽的病機,可共奏肅肺止咳、疏風清咽之功效。現代藥理學研究證實,蟬蛻中含有多種微量元素和氨基酸,有鎮靜和抗炎等作用;荊芥中的荊芥內酯、桂皮酸等成分能抑菌、抗炎、抗病毒;枇杷葉、甘草等具有止咳、抗氧化,提高機體免疫力等作用;烏梅可改善微循環、擴張血管,有利于調節免疫功能[17-19]。本研究結果顯示,治療1和2周后,咳嗽、咽干、咽癢、咳痰積分和咳嗽日間、夜間積分聯合組低于常規組,LCQ評分聯合組高于常規組;治療2周后,總有效率聯合組高于常規組。說明與常規藥物治療相比,肅金方聯合常規藥物治療感染后咳嗽患者可明顯改善臨床癥狀,提升生活質量,提高臨床效果。分析其原因為肅金方遵循“陽者陰之,上者下之”原則,以肅肺止咳為主,有效緩解了風邪犯肺之證。此外,本研究結果顯示,治療期間2組不良反應發生率比較差異無統計學意義,且2組出現的不良反應均較輕微,不影響日常生活工作,說明肅金方聯合常規藥物治療感染后咳嗽患者安全性較好。

既往研究顯示,TLR4/NF-κB信號通路在氧化應激和炎癥反應等過程中發揮重要作用[20]。病原體侵入呼吸道后可激活機體免疫-炎癥信號通路,間接激活氣道感覺神經,增強氣道高反應性,還可釋放大量炎性介質,損傷氣道黏膜上皮細胞。TLR4是跨細胞膜受體蛋白,廣泛存在于組織細胞中,可特異性識別損傷相關分子模式與病原體相關分子模式,能激活NF-κB導致免疫調節和炎癥的基因轉錄,引起下游信號通路的級聯反應,從而促進IL-6和TNF-α等炎性因子大量釋放,參與氣道炎癥的進展[21-22]。本研究結果顯示,治療1和2周后,TLR4、NF-κB、TNF-α、IL-6聯合組低于常規組,表明肅金方聯合常規藥物治療感染后咳嗽患者能抑制炎性因子分泌,分析原因可能與肅金方能調控TLR4/NF-κB信號通路有關。賈璐等[23]通過小鼠實驗發現,五味子中的五味子乙素能通過抑制TLR4/NF-κB信號通路,發揮免疫和抗炎作用,本研究結論與其一致。

綜上所述,肅金方聯合常規藥物治療感染后咳嗽風邪犯肺證患者效果良好,可改善臨床癥狀,抑制炎性因子表達,提高生活質量,且安全性好;分析原因可能與肅金方能調控TLR4/NF-κB信號通路有關。然而,本研究因時間、經費有限,未能開展臨床試驗研究,今后研究需結合藥理學、藥效學及動物實驗等進一步闡明本研究結論的作用機制,從而為臨床治療感染后咳嗽提供新思路。