農藥在果蔬中的基質效應研究

◎ 吳愛金

（桂平市公共檢驗檢測中心，廣西 桂平 537200）

由于按照《蔬菜和水果中有機磷、有機氯、擬除蟲菊酯和氨基甲酸酯類農藥多殘留的測定》（NY/T 761—2008）標準檢測有機磷農殘時，存在水果、蔬菜基質給農殘分析結果帶來干擾的問題，對分析結果精準性帶來影響，這種因果蔬樣品基體物質帶來的影響和干擾，就是基質效應。而在生物檢測中，常見的色譜、質譜或者色譜-質譜聯用檢測時，基質效應較為常見。按照基質給檢測信號帶來的響應值不同的特點，基質效應可分為增強和減弱兩種效應。因此，在本研究中，將通過基質影響實驗，優化NY/T 761—2008的抽樣檢測方法。

1 材料與方法

1.1 材料與設備

花菜、蘿卜、土豆、蒜苗和蘋果，從梧州市選取市場銷售的陰性果蔬樣品，即果蔬中沒有檢出有機磷農藥；丙酮、乙腈、氯化鈉和農藥標準溶液（9種，分別是甲胺磷、甲基對硫磷、敵敵畏、樂果、氧樂果、馬拉硫磷、三唑磷、毒死蜱和倍硫磷）。氣相色譜儀、氮吹儀、臺式高速冷凍離心機、振蕩器、電子天平、可調移液器、勻漿機、瓶口分液器、超純水機、超聲儀、烘箱以及冰箱[1]。

1.2 實驗方法

1.2.1 試樣處理

根據NY/T 761—2008 標準的抽樣方法，抽取水果和蔬菜樣品，將其縮分切碎后，置于勻漿機打碎，成為待測試樣，并封裝在聚乙烯自封袋中，在-20 ℃環境下保存備用。

1.2.2 配制標準溶液

本研究的標準溶液均為100 μg·mL-1；標準儲備液為10 μg·mL-1。精準移取標準溶液1.00 mL（濃度為100 μg·mL-1）到10 mL 容量瓶中，再添加丙酮稀釋到刻度后，搖勻備用。在配制其他系列標準溶液濃度時，在1.00 μg·mL-1的標準濃度下，取標準溶液200 μL（濃度為10 μg·mL-1），溶劑為基質液1 800 μL；在0.50 μg·mL-1的標準濃度下，從上一級標準溶液取1 000 μL（濃度為1.0 μg·mL-1），溶劑為基質液1 000 μL；在0.20 μg·mL-1的標準濃度下，從上一級標準溶液取800 μL（濃度為0.5 μg·mL-1），溶劑為基質液1 200 μL；在0.05 μg·mL-1的標準濃度下，從上一級標準溶液取500 μL（濃度為0.20 μg·mL-1），溶劑為基質液1 500 μL；在0.02 μg·mL-1的標準濃度下，從上一級標準溶液取400 μL（濃度為0.05 μg·mL-1），溶劑為基質液600 μL。其中，基質液是從多種不同的陰性水果中提取的基體，再將其分別溶解到含有丙酮的溶液中獲取[2]。

1.2.3 有機磷農藥前處理

稱取5.0 g 處理后的樣品，置于50 mL 離心管，再添加10 mL 乙腈，搖勻后，置于振蕩器振蕩5 min，待混合充分后，置于離心機離心處理4 min（離心機轉速4 000 r·min-1）。再取上清液10 mL，將其置于含有氯化鈉（1.0 g·L-1）的離心管（50 mL），置于振蕩器振蕩5 min，再置于離心機離心處理4 min（離心機轉速4 000 r·min-1）。取上清液2 mL，將其置于2 mL離心管中，利用氮吹儀在75 ℃下蒸發近干后，添加1 mL 丙酮于2 mL 離心管中，將其充分均勻振動后，用0.22 μm的濾膜，將其過濾到2 mL進樣瓶中，備測[3]。

1.2.4 氣相色譜條件

本試驗色譜柱為Agilent DB-1（30 m×250 μm，0.25 μm）。柱溫最初為150 ℃，保持2 min 后，按照8 ℃·min-1的速度升高到250 ℃，再保持5 min。色譜柱的流量為2 mL·min-1。進樣口和檢測器的溫度分別為220 ℃與250 ℃。采用火焰光度檢測器與磷濾光片。氫氣、空氣、氮氣的流速分別為75 mL·min-1、100 mL·min-1、100 mL·min-1，采取不分流進樣的方式進樣[4]。

1.2.5 計算定量結果

在試樣中，被測的農殘按照質量分數計算，單位為mg·kg-1，計算公式為

式中：ρ為標準溶液農藥質量濃度，μg·mL-1；A為標準溶液被測農藥峰面積；AS為農藥標準溶液被測農藥峰面積；V1為溶劑提取總體積，mL；V2為用于檢測吸取的溶劑提取體積，mL；V3為樣品溶液的定容體積，mL；m為試樣質量，g。

1.2.6 基質影響實驗

將5 類陰性果蔬樣品均勻制樣后，添加濃度一致（0.20 mg·kg-1）的9 種不同有機磷農藥，按照上述試驗方法進行加標回收試驗。

1.2.7 基質干擾消除實驗

本研究結合以上每種有機磷農藥在每種果蔬中的基質效應，選擇基質匹配標準溶液標準法開展基質干擾消除實驗。選擇蘿卜和蘋果作為樣品，將二者按照1.2.3 所示方法提取陰性空白基質，分別選取丙酮（以下簡稱BTO）、含有蘋果基質的丙酮（以下簡稱BT1）、含有蘿卜基質的丙酮（以下簡稱BT2）作為溶劑標準曲線，標準溶液的濃度從大到小分別為1.00 mg·kg-1、0.50 mg·kg-1、0.20 mg·kg-1、0.05 mg·kg-1和0.02 mg·kg-1，將得到的標準曲線斜率作為縱向坐標，將不同農藥作為橫向坐標，制圖后分析蘋果、蘿卜基質對上述9 種有機磷農藥帶來的基質效應[5]。

2 結果與分析

2.1 基質影響實驗結果

將5 類陰性果蔬樣品均勻制樣后，添加濃度一致（0.20 mg·kg-1）的9 種不同有機磷農藥，按照上述試驗方法和表1 所示的標準添加回收率進行試驗。

表1 果蔬有機磷農藥加標回收率表（單位：%）

由表1 可知，每一種有機磷農藥在不同果蔬樣品的基質效應表現的強度均不同，且每一種果蔬樣品中的每一種有機磷農藥的基質效應影響也不同，按照有機磷農藥加標回收率范圍，得到每種農藥對每種果蔬的基質效應影響水平，具體結果如下。①蒜苗中由于含有硫化物，因此整體回收率較高。②敵敵畏的加標回收率偏低，這與其沸點只有74 ℃有關，前處理時的氮吹溫度為75 ℃，因此會導致損失。③回收率較低的農藥分別為甲基對硫磷、馬拉硫磷、毒死蜱和倍硫磷，即基體效應影響較低。④強基質效應的農藥分別為樂果、氧樂果、三唑磷，即對測定結果有較大影響。⑤甲胺磷的基質效應無明顯規律。

2.2 基質干擾消除實驗結果

根據圖1 得到的農藥在果蔬（蘋果與蘿卜）中的基質效應。再往蘋果和蘿卜的陰性樣品添加濃度為0.2 mg·kg-1的9 種有機磷混合標準（n=2），再分別添加陰性基質的標準曲線對回收率進行計算，得到表2所示結果。

圖1 農藥在果蔬（蘋果與蘿卜）中的基質效應圖

表2 9 種有機磷農藥在蘋果和蘿卜中的加標回收率表（單位：%）

由表2 可知，在標準溶液中加入陰性基質后，校準的曲線結果能確保加標回收率在81%～111%，而只有氧樂果的回收率較低，敵敵畏由于氮吹問題在回收率方面有波動，因此基質匹配標準溶液校準中，能在有機磷農殘測定時應用氣相色譜法，有效消除基質干擾。

3 結論

綜上，本文對農藥在果蔬中的基質效應研究是基于目前檢測標準的基礎上進行的改進和優化，利用氣相色譜法按照基質給檢測信號帶來的響應值不同的特點對抽樣檢測方法進行優化和完善，使檢測效率更高，結果更加精準。