金銀花黃酮苷類化學成分研究

魏曉芳，沈婉瑩，李陽芳，謝秋杰，唐旭東，葛嵐嵐,3*

1. 甘肅中醫藥大學藥學院，甘肅 蘭州 730000

2. 暨南大學第二臨床學院深圳市人民醫院龍華分院 中心實驗室，廣東 深圳 518120

3. 暨南大學第二臨床學院深圳市人民醫院龍華分院 病理科，廣東 深圳 518120

4. 深圳清華大學研究院 創新中藥及天然藥物研究重點實驗室，廣東 深圳 518000

忍冬科（Caprifoliaceae）忍冬屬在全世界約有200 種植物，主要分布在非洲北部、北美、歐洲和亞洲[1]。我國有98 種，以西南部分布最多[2]。金銀花是忍冬屬植物忍冬LonicerajaponicaThunb. 的干燥花蕾或帶初開的花，又名雙花、忍冬花等，分布在我國各省，尤其以河南、山東的野生資源最為豐富[3]。金銀花味甘，性寒，歸肺、心、胃經，具有清熱解毒、疏散風熱之功效，用于治療癰腫疔瘡、喉痹、丹毒、熱毒血痢、風熱感冒、溫病發熱等癥，藥用歷史悠久，有“中藥中的抗生素”之稱[3-4]。作為清熱解毒的良藥，金銀花在新型冠狀病毒肺炎的防治中應用廣泛，表現優異[1,5-6]。首載于梁代陶弘景的《名醫別錄》，既可入藥，亦可做食療[7-8]。現代藥理作用顯示金銀花具有抗菌、抗炎、抗氧化、抗病毒、抗癌以及肝保護等活性[9-13]。迄今為止，從金銀花中分離鑒定的化合物主要為黃酮類、有機酸類、環烯醚萜以及三萜皂苷類化合物[7,14-16]。現代藥理學研究認為，金銀花功效成分可能是其黃酮類活性成分[17-18]。為了更好地闡述金銀花的物質基礎，本課題組在前期的研究基礎[17,19-21]上對金銀花的化學成分進行了進一步的分離和純化，從中分離鑒定了9 個黃酮苷類化合物，分別為3,5-二羥基-3′-甲氧基黃酮-7-O-β-D-葡萄糖苷（3,5-dihydroxy-3′-methoxyflavone-7-O-β-D-glucopyranoside，1）、槲皮素-3-O-葡萄糖苷（quercetin-3-O-glucopyranoside，2 ）、 3,5,3′-三羥基黃酮-7-O-β-D- 葡萄糖苷（3,5,3′-trihydroxyflavone-7-O-β-D-glucopyranoside，3）、棉花苷（quercimeritrin，4）、煙花苷（nicotinflorin，5）、水仙苷（narcissin，6）、蘆丁（rutin，7）、槲皮素-5-O-葡萄糖苷（quercetin-5-O-glucoside，8）、木犀草素-7-O- 新橙皮糖苷（ luteolin-7-Oneohesperidoside，9），結構見圖1。其中，化合物1和3 為新化合物，分別命名為金銀花黃酮F（japoflavone F，1）和金銀花黃酮E（japoflavone E，3）；化合物2、4～6、8、9 為首次從該屬植物中分離得到。為進一步探究金銀花的有效成分，本實驗對化合物1～9 進行了抗腫瘤活性篩選，結果顯示，化合物1 對人肝癌HuH7細胞表現出顯著的抑制活性，其半數抑制濃度（half maximal inhibitory concentration，IC50）為（43.4±1.1）μmol/L。

圖1 化合物1～9 的化學結構Fig. 1 Structure of compounds 1—9

1 儀器與材料

Bruker DPX-400 核磁共振儀（德國Bruker 公司）；Bruker microTOF-QⅡ液相色譜質譜聯用儀（德國Bruker 公司）；半制備高效液相色譜儀（泵LC-20A，檢測器SPD-20A，廣州睿柏公司）；分析高效液相色譜儀（Essentia LC-16，日本島津公司），Cosmosil C18反相制備柱（250 mm×20 mm，5 μm，日本）；YMC-Pack ODS C18分析柱（250 mm×4.6 mm，5 μm，日本）；Sephadex LH-20（北京GE 公司）；薄層硅膠G 和色譜柱硅膠（青島海洋化工廠）；色譜級甲醇購自Sigma-Aldrich 公司（美國St. Louis公司）；D-葡萄糖（批號20171023，質量分數大于99%）購自廣東光華科技股份有限公司；其余試劑皆為分析純，購自上海國藥集團化學試劑公司。

金銀花購自山東省臨沂市平邑縣，經甘肅中醫藥大學唐旭東教授鑒定為忍冬L.japonicaThunb.的花蕾，憑證標本（20170930）保藏于深圳市人民醫院龍華分院中心實驗室標本館。采摘回來的新鮮樣品先在60 ℃干燥箱中烘干，后陰避保存待用。

人肝癌SMCC 7721細胞和人肝癌HuH7細胞購自美國菌種保藏中心（American Type Culture Collection，ATCC）。

2 提取與分離

取干燥后的金銀花（6.5 kg）粉碎，用75%乙醇在室溫下進行多次冷浸、滲漉提取，合并提取液，減壓濃縮得到浸膏（1.5 kg）。將總浸膏混懸于水，依次進行萃取，減壓濃縮后分別得到環己烷部位（130.3 g）、醋酸乙酯部位（93.7 g）和正丁醇部位（199.8 g）。正丁醇部位（180 g）經正相硅膠柱色譜，以二氯甲烷-甲醇系統（0∶1～1∶0）梯度洗脫，合并后得到40 個流分。

Fr. 13（13.1 g）經Sephadex LH-20 凝膠色譜柱分離，二氯甲烷-甲醇（50∶50）等度洗脫，薄層分析合并后得到3 個組分。Fr. 13-3 經半制備高效液相色譜（46%甲醇）分離得到化合物1（1.03 mg，tR＝13.5 min）和2（4.34 mg，tR＝19.6 min）。Fr. 20（5.7 g）經Sephadex LH-20 凝膠色譜柱分離，二氯甲烷-甲醇（70∶30）等度洗脫，合并后得到6 個組分。Fr. 20-5 經半制備高效液相色譜（43%甲醇）分離得到化合物3（5.2 mg，tR＝20.1 min）。Fr. 23（2.6 g）經Sephadex LH-20 凝膠色譜柱分離，二氯甲烷-甲醇（50∶50）等度洗脫，得到10 個組分。Fr. 23-5經半制備高效液相色譜（55%甲醇）分離得到化合物4（1.6 mg，tR＝16.4 min）。Fr. 23-6 經半制備高效液相色譜（43%甲醇）分離得到化合物5（5.25 mg，tR＝10.1 min）和6（1.24 mg，tR＝20.6 min）。Fr. 25（18.5 g）經Sephadex LH-20 凝膠色譜柱分離，二氯甲烷-甲醇（50∶50）等度洗脫，得到3 個組分。Fr. 25-3 經半制備高效液相色譜（43%甲醇）分離得到化合物7（17.7 mg，tR＝11.6 min）和8（6.7 mg，tR＝23.8 min）。Fr. 33（9.6 g）經Sephadex LH-20 凝膠色譜柱分離，二氯甲烷-甲醇（50∶50）等度洗脫，得到3 個組分。Fr. 33-3 經半制備高效液相色譜（43%甲醇）分離得到化合物9（3.52 mg，tR＝13.1 min）。

3 糖構型鑒定

取化合物3（1 mg），溶于4 mL 三氟乙酸（4 mol/L）溶液中，95 ℃條件反應4 h，待反應完成后，冷卻至室溫，用等體積的二氯甲烷（2 mL）萃取3次，水層減壓蒸干，即為單糖酸水解產物，二氯甲烷層為苷元部分。取D-葡萄糖（1 mg）的對照品及上述酸水解產物分別加入0.5 mL 的無水吡啶和2 mg 的L-半胱氨酸甲酯鹽酸鹽，60 ℃條件下加熱1 h，冷卻至室溫，分別加入10 μL 鄰甲苯異硫氰酸酯，60 ℃加熱1 h 后冷卻，將反應液稀釋1 倍后進行HPLC（乙腈-0.1%甲酸水溶液25∶75，1 mL/min，10 μL，分析波長為250 nm）分析，化合物3 的酸水解產物和D-葡萄糖的保留時間均為18.1 min。

4 結構鑒定

4.1 新化合物結構鑒定

化合物3：黃色粉末，TLC 薄層展開UV 下為亮黃色，鹽酸-鎂粉顯色反應為紫紅色，故推斷為黃酮類化合物，HR-ESI-MSm/z: 471.089 8 [M＋Na]+（計算值為 471.090 3）。1H-NMR (400 MHz,DMSO-d6)δ: 7.42 (1H, d,J= 8.0 Hz, H-4′), 7.37 (1H,s, H-2′), 6.79 (1H, t,J= 8.0 Hz, H-5′), 6.78 (1H, d,J=8.0 Hz, H-6′), 6.69 (1H, s, H-8), 6.42 (1H, d,J= 2.0 Hz, H-6), 5.06 (1H, d,J= 7.4 Hz, H-1′′)；13C-NMR(100 MHz, DMSO-d6)δ: 146.1 (C-2), 120.0 (C-3),181.8 (C-4), 162.9 (C-5), 99.5 (C-6), 164.7 (C-7), 94.8(C-8), 161.2 (C-9), 102.7 (C-10), 127.3 (C-1′), 105.3(C-2′), 157.0 (C-3′), 115.9 (C-4′), 124.8 (C-5′), 113.0(C-6′), 100.0 (C-1′′), 73.2 (C-2′′), 76.4 (C-3′′), 69.6(C-4′′), 77.2 (C-5′′), 60.7 (C-6′′)。根據以上數據，判斷該黃酮類化合物含有1 個四元取代A 環和1 個1, 3-二取代B 環。糖端基信號δH5.06 (1H, d,J= 7.4 Hz,H-1′′) 以及δC100.0 (C-1′′) 提示該化合物還含有一個連氧糖苷。通過與已知文獻葡萄糖的信號對比[22]，并根據糖端基氫的偶合常數（J= 7.4 Hz），以及水解后糖殘基的HPLC 分析（tR＝18.1 min），最終判斷該糖為β-D-葡萄糖。HMBC 信號（圖2）顯示，H-6/8 與C-10 相關，H-8 與C-7 相關，H-6′與C-2/3相關，H-5′與C-3′相關，H-2′與C-3′/4′相關，H-4′與C-6′相關，H-1′′與C-7 相關。綜合以上結果，最終鑒定化合物3 為3,5,3′-三羥基黃酮-7-O-β-D-葡萄糖苷，經SciFinder 數據庫檢索，為1 個新化合物，命名為金銀花黃酮E。

圖2 化合物3 的重要HMBC 相關Fig. 2 Key HMBC of compound 3

化合物1：黃色粉末，TLC 薄層展開UV 下為亮黃色，鹽酸-鎂粉顯色反應為紫紅色，故推斷為黃酮類化合物，HR-ESI-MSm/z: 485.142 0 [M＋Na]+（計算值為 485.106 0），1H-NMR (400 MHz,DMSO-d6)δ: 7.57 (1H, d,J= 8.0 Hz, H-4′), 7.56 (1H,s, H-2′), 6.93 (1H, d,J= 8.0 Hz, H-6′), 6.92 (1H, t,J=8.0 Hz, H-5′), 6.85 (1H, s, H-8), 6.43 (1H, d,J= 2.0 Hz, H-6), 5.04 (1H, d,J= 7.4 Hz, H-1′′), 3.87 (3H, s,3′-OCH3)；13C-NMR (100 MHz, DMSO-d6)δ: 148.2(C-2), 120.6 (C-3), 174.1 (C-4), 164.2 (C-5), 99.5(C-6), 165.4 (C-7), 95.0 (C-8), 162.6 (C-9), 103.2(C-10), 132.2 (C-1′), 110.3 (C-2′), 156.9 (C-3′), 115.9(C-4′), 122.4 (C-5′), 111.3 (C-6′), 56.0 (3′-OCH3),100.1 (C-1′′), 73.1 (C-2′′), 76.5 (C-3′′), 69.6 (C-4′′),77.3 (C-5′′), 60.6 (C-6′′)。結合1H-NMR 與13C-NMR信號，該化合物與化合物3 信號相似，僅多了1 個甲氧基的信號，通過比對黃酮母核環上氫信號，發現H-2′和H-4′的信號向低場位移了δ0.15 左右，說明該甲氧基連在B 環的3′位，最終鑒定化合物1 為3,5-二羥基-3′-甲氧基黃酮-7-O-β-D-葡萄糖苷，經SciFinder 數據庫檢索，為1 個新化合物，命名為金銀花黃酮F。

4.2 已知化合物結構鑒定

化合物2：黃色粉末，TLC 薄層展開UV 下為亮黃色，鹽酸-鎂粉顯色反應為紫紅色，故推斷為黃酮類化合物，1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6)δ: 7.58(1H, d,J= 8.0 Hz, H-6′), 7.57 (1H, s, H-2′), 6.84 (1H,d,J= 8.0 Hz, H-5′), 6.39 (1H, s, H-8), 6.19 (1H, s,H-6), 5.46 (1H, d,J= 7.2 Hz, H-1′′)；13C-NMR (100 MHz, DMSO-d6)δ: 156.3 (C-2), 133.3 (C-3), 177.4(C-4), 161.2 (C-5), 98.7 (C-6), 164.3 (C-7), 93.5(C-8), 156.1 (C-9), 103.9 (C-10), 121.2 (C-1′), 116.2(C-2′), 144.8 (C-3′), 148.2 (C-4′), 115.2 (C-5′), 121.6(C-6′), 100.9 (C-1′′), 74.1 (C-2′′), 76.5 (C-3′′), 69.9(C-4′′), 77.6 (C-5′′), 61.0 (C-6′′)。以上數據與文獻數據[23]進行對比，鑒定化合物2 為槲皮素-3-O-葡萄糖苷。

化合物4：黃色粉末，TLC 薄層展開UV 下為亮黃色，鹽酸-鎂粉顯色反應為紫紅色，故推斷為黃酮類化合物，1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6)δ: 7.72(1H, d,J= 2.0 Hz, H-2′), 7.55 (1H, dd,J= 2.0, 8.0 Hz, H-6′), 6.90 (1H, d,J= 8.0 Hz, H-5′), 6.77 (1H, d,J= 2.0 Hz, H-8), 6.42 (1H, d,J= 2.0 Hz, H-6), 5.08(1H, d,J= 7.2 Hz, H-1′′)；13C-NMR (100 MHz,DMSO-d6)δ: 147.6 (C-2), 136.1 (C-3), 176.0 (C-4),160.4 (C-5), 98.8 (C-6), 162.7 (C-7), 94.3 (C-8), 155.7(C-9), 104.7 (C-10), 120.0 (C-1′), 115.6 (C-2′), 145.1(C-3′), 147.9 (C-4′), 115.4 (C-5′), 121.8 (C-6′), 99.9(C-1′′), 73.1 (C-2′′), 76.4 (C-3′′), 69.6 (C-4′′), 77.2(C-5′′), 60.6 (C-6′′)。以上數據與文獻數據[22]進行對比，鑒定化合物4 為棉花苷。

化合物5：黃色粉末，TLC 薄層展開UV 下為亮黃色，鹽酸-鎂粉顯色反應為紫紅色，故推斷為黃酮類化合物，1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6)δ: 7.98(2H, d,J= 9.0 Hz, H-2′, 6′), 6.88 (2H, d,J= 9.0 Hz,H-3′, 5′), 6.41 (1H, d,J= 2.0 Hz, H-8), 6.20 (1H, d,J= 2.0 Hz, H-6), 5.31 (1H, d,J= 7.0 Hz, H-1′′), 4.37(1H, s, H-1′′′), 0.98 (3H, d,J= 6.2 Hz, H-6′′′)；13C-NMR (100 MHz, DMSO-d6)δ: 156.5 (C-2), 133.2(C-3), 177.4 (C-4), 161.2 (C-5), 98.8 (C-6), 164.2(C-7), 93.8 (C-8), 156.8 (C-9), 104.0 (C-10), 120.9(C-1′), 130.9 (C-2′), 115.1 (C-3′), 159.9 (C-4′), 115.1(C-5′), 130.9 (C-6′), 100.8 (C-1′′), 74.2 (C-2′′), 75.7(C-3′′), 69.9 (C-4′′), 76.4 (C-5′′), 66.9 (C-6′′), 101.3(C-1′′′), 70.3 (C-2′′′), 70.3 (C-3′′′), 71.8 (C-4′′′), 68.2(C-5′′′), 17.7 (C-6′′′)。以上數據與文獻數據[24]進行對比，鑒定化合物5 為煙花苷。

化合物6：黃色粉末，TLC 薄層展開UV 下為亮黃色，鹽酸-鎂粉顯色反應為紫紅色，故推斷為黃酮類化合物，1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6)δ: 7.83(1H, s, H-2′), 7.49 (1H, d,J= 8.0 Hz, H-6′), 6.88 (1H,d,J= 8.0 Hz, H-5′), 6.34 (1H, s, H-8), 6.12 (1H, s,H-6), 5.39 (1H, d,J= 7.0 Hz, H-1′′), 4.40 (1H, s,H-1′′′), 3.81 (3H, s, OCH3), 0.96 (3H, d,J= 6.1 Hz,H-6′′′)；13C-NMR (100 MHz, DMSO-d6)δ: 156.6(C-2), 132.9 (C-3), 177.2 (C-4), 161.1 (C-5), 100.9(C-6), 166.3 (C-7), 94.0 (C-8), 156.2 (C-9), 103.5(C-10), 121.1 (C-1′), 113.3 (C-2′), 146.9 (C-3′), 149.4(C-4′), 115.3 (C-5′), 122.2 (C-6′), 55.7 (3′-OCH3),101.4 (C-1′′), 74.3 (C-2′′), 76.4 (C-3′′), 70.1 (C-4′′),75.9 (C-5′′), 66.9 (C-6′′), 100.9 (C-1′′′), 70.3 (C-2′′′),70.6 (C-3′′′), 71.8 (C-4′′′), 68.3 (C-5′′′), 17.7 (C-6′′′)。以上數據與文獻數據[25]進行對比，鑒定化合物6 為水仙苷。

化合物7：黃色粉末，TLC 薄層展開UV 下為亮黃色，鹽酸-鎂粉顯色反應為紫紅色，故推斷為黃酮類化合物，1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6)δ: 7.53(1H, d,J= 8.0 Hz, H-6′), 7.52 (1H, s, H-2′), 6.83 (1H,d,J= 8.0 Hz, H-5′), 6.38 (1H, s, H-8), 6.18 (1H, s,H-6), 5.33 (1H, d,J= 7.2 Hz, H-1′′), 4.37 (1H, s,H-1′′′), 0.98 (1H, d,J= 6.2 Hz, H-6′′′)；13C-NMR (100 MHz, DMSO-d6)δ: 156.6 (C-2), 133.3 (C-3), 177.4(C-4), 161.2 (C-5), 98.7 (C-6), 164.1 (C-7), 93.6(C-8), 156.4 (C-9), 104.0 (C-10), 121.2 (C-1′), 116.3(C-2′), 144.8 (C-3′), 148.4 (C-4′), 115.2 (C-5′), 121.6(C-6′), 100.7 (C-1′′), 74.1 (C-2′′), 75.9 (C-3′′), 70.0(C-4′′), 76.5 (C-5′′), 67.0 (C-6′′), 101.2 (C-1′′′), 70.6(C-2′′′), 70.4 (C-3′′′), 71.9 (C-4′′′), 68.2 (C-5′′′), 17.7(C-6′′′)。以上數據與文獻數據[26]進行對比，鑒定化合物7 為蘆丁。

化合物8：黃色粉末，TLC 薄層展開UV 下為亮黃色，鹽酸-鎂粉顯色反應為紫紅色，故推斷為黃酮類化合物，1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6)δ: 7.56(1H, d,J= 8.0 Hz, H-6′), 7.55 (1H, s, H-2′), 6.77 (1H,d,J= 8.0 Hz, H-5′), 6.20 (1H, s, H-8), 6.01 (1H, s,H-6), 5.39 (1H, d,J= 7.2 Hz, H-1′′)；13C-NMR (100 MHz, DMSO-d6)δ: 142.3 (C-2), 133.2 (C-3), 175.0(C-4), 156.6 (C-5), 99.5 (C-6), 161.1 (C-7), 94.0 (C-8),158.7 (C-9), 109.6 (C-10), 121.7 (C-1′), 115.2 (C-2′),145.0 (C-3′), 145.0 (C-4′), 115.3 (C-5′), 116.0 (C-6′),101.3 (C-1′), 74.2 (C-2′′), 76.6 (C-3′′), 70.0 (C-4′′), 77.5(C-5′), 61.0 (C-6′)。以上數據與文獻數據[27]進行對比，鑒定化合物8 為槲皮素-5-O-葡萄糖苷。

化合物9：黃色粉末，TLC 薄層展開UV 下為亮黃色，鹽酸-鎂粉顯色反應為紫紅色，故推斷為黃酮類化合物，1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6)δ: 7.41(1H, d,J= 8.0 Hz, H-6′), 7.37 (1H, s, H-2′), 6.85 (1H,d,J= 8.0 Hz, H-5′), 6.72 (2H, s, H-3, 8), 6.35 (1H, s,H-6), 5.23 (1H, d,J= 7.4 Hz, H-1′′), 5.11 (1H, s,H-1′′′), 1.19 (3H, d,J= 6.0 Hz, H-6′′′)；13C-NMR (100 MHz, DMSO-d6)δ: 164.6 (C-2), 103.0 (C-3), 181.8(C-4), 162.5 (C-5), 99.3 (C-6), 161.2 (C-7), 94.4(C-8), 157.0 (C-9), 105.4 (C-10), 120.7 (C-1′), 113.2(C-2′), 146.0 (C-3′), 150.7 (C-4′), 116.0 (C-5′), 119.3(C-6′), 97.8 (C-1′′), 77.0 (C-2′′), 76.3 (C-3′′), 70.4(C-4′′), 77.2 (C-5′′), 60.5 (C-6′′), 100.5 (C-1′′′), 69.7(C-2′′′), 70.5 (C-3′′′), 71.9 (C-4′′′), 68.4 (C-5′′′), 18.1(C-6′′′)。以上數據與文獻數據[28]進行對比，鑒定化合物9 為木犀草素-7-O-新橙皮糖苷。

5 體外抗腫瘤活性

將SMCC 7721 細胞和HuH7 細胞接種于96 孔細胞培養板，每孔200 μL（含有1×105個腫瘤細胞），在37 ℃、5 % CO2培養箱中，并且在含10%FBS 的DMEM 培養基中，培養24 h，加入不同質量濃度（100、75、50、25、0 mg/mL）的黃酮苷類化合物，繼續培養48 h；實驗結束前4 h 加20 μL的MTT（5 mg/mL），繼續在37 ℃、5% CO2條件下孵育4 h，吸取培養液后加入二甲基亞砜150 μL，振搖至結晶完全溶解，然后于酶標儀檢測其吸光度（A）值，檢測波長570 nm，參考波長630 nm，根據吸光值計算黃酮苷類化合物對SMCC 7721 和HuH7 細胞的抑制率及IC50。

A0為空白組A值；A為樣品組A值

共檢測了12 個金銀花黃酮苷類化合物的抗肝癌活性，包括此前從金銀花中分離的3 個黃酮苷類化合物，分別為紫云英苷、槲皮素-3-O-(6-香豆酰基)-β-D-葡萄糖苷和異鼠李素-3-O-(6-香豆酰基)-β-D-葡萄糖苷[17,19]。實驗結果發現，紫云英苷和槲皮素-3-O-(6-香豆酰基)-β-D-葡萄糖苷對SMCC 7721 細胞有顯著的抑制活性，IC50值分別為（66.4±2.9）、（73.5±4.8）μmol/L，其他10 個化合物的IC50值均大于100 μmol/L。而對HuH7 細胞，槲皮素-3-O-(6-香豆酰基)-β-D-葡萄糖苷和3,5-二羥基-3′-甲氧基黃酮-7-O-葡萄糖苷（1）顯示出優異的抗肝癌活性，IC50值分別為（75.7±2.7）、（43.4±1.1）μmol/L，其余10 個化合物的IC50值均大于100 μmol/L。

6 討論

本研究從金銀花正丁醇部位分離鑒定了9 個黃酮苷類化合物，其中化合物1 和3 為新化合物，其他化合物（除化合物7 以外）均為首次從該屬植物中分離得到。在此前的研究中，課題組已經從金銀花中分離鑒定了18 個黃酮類化合物，包括3 個黃酮苷類[17,19]，并驗證了金銀花黃酮類化合物具有較好的抗肝癌活性，其中japoflavone D 可通過誘導細胞發生凋亡發揮抗肝癌活性[21]。而本研究的結果進一步證明了黃酮類化合物的抗肝癌活性。金銀花自古就有治療“肝積”“腫毒”的記載[29]，因此加強從金銀花中分離鑒定藥理活性顯著的黃酮類成分研究是非常有意義的。

利益沖突所有作者均聲明不存在利益沖突