混滅威的液相色譜分析方法研究

吳晗，徐成辰，王坤，劉貝妮，唐慧敏

(江蘇省農產品質量檢驗測試中心，南京 210000)

混滅威學名為混二甲苯基-N-甲基氨基甲酸酯[1]，是由3,5-二甲基苯基甲氨基甲酸酯(滅除威)和3,4-二甲基苯基甲氨基甲酸酯(滅殺威)2 種同分異構體混合而成。CAS 號2686-99-9，ISO 通用名稱為dimethacarb[2]。工業品混滅威原油(含量88%~91%)為淡黃色至棕黑色黏稠的油狀液體[2-3]?；鞙缤蝗苡谒?，微溶于石油醚、汽油，易溶于乙醇、苯、丙酮、甲醇、甲苯等有機溶劑，遇堿或強酸易分解[1,3]。

混滅威具有強烈的觸殺活性，作用迅速，但殘效期短[2]?；鞙缤缥眯Ч@著，對稻飛虱、稻葉蟬和茶小綠葉蟬等有很好的防效，亦可防治棉鈴蟲[1,4-6]。閆莉等[7]發現混滅威與其他類型農藥混配后，其殘留量小于單劑農藥衛生標準。

目前關于混滅威登記的農藥產品有10 余種(中國農藥信息網www.icama.org.cn/hysj/index.jhtml)，但現有混滅威的分析方法的研究甚少，導致混滅威長期處于監管盲區，產品質量也無法得到保障?；诖?，本文采用液相色譜法對混滅威原藥及50%混滅威乳油進行了分析研究，以期為該藥劑產品質量控制及標準制定提供技術支撐。

1 材料與方法

1.1 樣品

93.0%混滅威原藥和50%混滅威乳油(江蘇常隆農化有限公司)。

1.2 試劑和溶液

乙腈，色譜純；水，超純水或新蒸二次蒸餾水；混滅威標樣，已知質量分數ω≥98.0%[沈陽農藥質量檢驗中心(混滅威含量為滅殺威和滅除威2 個組分含量之和)]。

1.3 儀器設備

高效液相色譜儀1290(安捷倫科技有限公司)；XP-205 自動分析天平[梅特勒托利多科技(中國)有限公司]。

1.4 高效液相色譜分析條件

試樣用乙腈溶解，以乙腈∶水=30∶70(體積比)為流動相(表1)，以C18為填料的不銹鋼柱(150 mm×4.6 mm i.d.，5 μm)和紫外檢測器，在波長264 nm 下對試樣中的混滅威進行反相高效液相色譜分離，外標法定量。流速：1.0 mL/min；柱溫：室溫(溫度變化不大于2 ℃)；進樣體積：10 μL。在此色譜條件下，滅殺威約13.3 min，滅除威約14.6 min(圖1)。

圖1 混滅威的高效液相色譜圖

表1 流動相梯度

1.5 測定步驟

1.5.1 標樣溶液的制備

稱取0.10 g(精確至0.000 1 g)混滅威標樣于50 mL容量瓶中，加入20 mL 乙腈，超聲波振蕩5 min，冷卻至室溫，用乙腈稀釋至刻度，搖勻。

1.5.2 試樣溶液的制備

稱取含0.10 g(精確至0.000 1 g)混滅威的試樣于50 mL容量瓶中，加入20 mL乙腈，超聲波振蕩5 min，冷卻至室溫，用乙腈稀釋至刻度，搖勻，過濾。

1.5.3 測定

在上述儀器設置條件下，待儀器基線穩定后，連續注入數針標樣溶液，直至相鄰2 針混滅威峰面積相對變化小于1.2%后，按照標樣溶液、試樣溶液、試樣溶液、標樣溶液的順序進行測定。

1.5.4 計算

將得到的2 針試樣溶液及試樣溶液前后2 針標樣溶液中混滅威峰面積分別進行平均。試樣的混滅威含量按公式⑴計算：

式中：ω1為試樣中混滅威含量，以%表示；A2為試樣溶液中混滅威峰面積的平均值；m1為混滅威標樣的質量，單位為克(g)；ω為樣中混滅威含量，以%表示；A1為標樣溶液中混滅威峰面積的平均值；m2為試樣的質量，單位為克(g)。

2 結果與分析

2.1 色譜條件

從混滅威的紫外光譜圖(圖2)可以看出，混滅威2 個峰的最大吸收波長264 nm，在該波長處干擾較少，靈敏度高，滿足分析要求，因此確定檢測波長為264 nm。

圖2 混滅威[13.3 min(左)和14.6 min(右)]的紫外光譜圖

依據混滅威物化性質和溶劑的紫外吸收波長，選定乙腈為溶劑溶解樣品，并以乙腈和水作為流動相。將流動相按不同配比在液相色譜上進行試驗，當乙腈與水比例為30∶70 時，雜質峰與混滅威完全分離，峰形較好，且峰純度高，完全達到試驗要求，因此選擇乙腈∶水=30∶70(體積比)作為流動相，流速1.0 mL/min。

2.2 特異性試驗

試驗采用HPLC-DAD 峰純度分析法來鑒別混滅威。混滅威標樣、混滅威原藥、50%混滅威乳油中的混滅威HPLC-DAD 峰純度均大于990，有效成分處無其他物質干擾，符合定量分析要求。峰純度色譜圖見圖3~5。

圖3 混滅威標樣HPLC-DAD 峰純度色譜圖

圖4 混滅威原藥HPLC-DAD 峰純度色譜圖

圖5 50%混滅威乳油HPLC-DAD 峰純度色譜圖

圖6 混滅威峰面積與質量濃度關系圖

2.3 線性關系試驗

按1.5.1 節標樣溶液的制備方法配制5 個不同質量濃度的有效成分線性溶液，在上述色譜條件下，待儀器基線穩定后測定，以混滅威質量濃度為橫坐標，峰面積為縱坐標繪制標準曲線。當混滅威質量濃度為953.44~3 059.70 mg/L 時，回歸方程為y=1.02x-102.42，相關系數r=0.998。

2.4 方法精密度試驗

按1.5.2 節試樣溶液的制備方法配制5 個混滅威原藥和5 個50%混滅威乳油精密度溶液。

以有效成分線性溶液STD3 為標樣溶液，在上述色譜條件下，按標樣溶液、精密度溶液、精密度溶液、標樣溶液的順序進行測定，結果見表2、表3。

表2 混滅威原藥中混滅威精密度試驗結果

表3 50%混滅威乳油中混滅威精密度試驗結果

得到混滅威原藥和50%混滅威乳油中混滅威質量分數測定結果的變異系數(RSD)分別為0.13%和0.21%，均小于修改的Horwitz 公式2(1-0.51ogC)×0.67=1.35 和1.48，表明有效成分分析方法的精密度結果滿足質量控制的基本要求。

2.5 方法準確度試驗

稱取含0.05 g(精確至0.000 1 g)混滅威的50%混滅威乳油于50 mL 容量瓶中，再稱取混滅威標樣0.05 g(精確至0.000 1 g)，按1.5.2 節試樣溶液的制備方法配制5 個有效成分準確度溶液。

以線性溶液STD3 為標樣溶液，計算混滅威的回收率，結果見表4。50%混滅威乳油中混滅威平均回收率為100.34%，符合準確度要求。

表4 50%混滅威乳油回收率試驗結果

3 結論

本研究結果表明，采用本分析方法測定混滅威原藥、50%混滅威乳油的有效成分，檢測結果符合性良好，精密度和準確度高，線性關系良好，分離效果佳，且方法操作簡便、快捷。故本研究建立的混滅威液相色譜分析方法可以滿足日常檢測工作需要。