淺談大口黑鱸無病毒親本選育技術

■ 文｜仲愷農業工程學院動物科技學院 余明海

中國水產科學研究院珠江水產研究所 林強 付小哲 羅霞 梁紅茹 牛銀杰 李寧求

廣東德權漁業發展有限公司 鄧德基

大口黑鱸，近年來正如火如荼地在全國推廣養殖，據《2022中國漁業統計年鑒》統計，2021年全國養殖產量已突破70萬噸。目前苗種繁育企業、養殖戶平均育苗成活率不足10%；其中，親魚產卵期間的損耗成為直接導致苗種繁育企業虧損的主要原因。如何做好后備親魚選擇以及親魚產前營養強化、減少親魚損耗、增加產卵數量，公開研究報道較少。本研究選用：復合維生素、黃芪多糖、甘草提取物，制成復方強化劑；利用現代分子生物技術，通過突破大口黑鱸病原阻斷技術、無病毒親魚培育、親魚無創檢測、活體原位消殺、生物安保、工廠化繁育等關鍵技術，加州鱸親魚成活率維持在95%以上，總結出一些經驗，供大家參考。

親魚培育及繁殖期間主要疾病

1.病毒性疾病

目前針對大口黑鱸病毒性疾病，還沒有特效藥物，傳染性強、死亡率高。主要種類有：大口黑鱸虹彩病毒（LMBV）、傳染性脾腎壞死病毒（ISKNV）、神經壞死病毒（VNN）、鱸彈狀病毒（SCRV）。其中，大口黑鱸虹彩病毒和傳染性脾腎壞死病毒在中大魚發病較多，提升魚體自身免疫力是控制病毒性疾病的關鍵（圖1）。

圖1 攜帶大口黑鱸虹彩病毒（LMBV）的魚體

2.細菌性疾病

大口黑鱸主要細菌性病原有：柱狀黃桿菌（Flavobacterium columnare）、諾卡氏菌（Nocardia）、維氏氣單胞菌（Aeromonas Veronii）等，保持水質清爽、控制放養密度、定期檢測是防控關鍵（圖2）。

圖2 感染諾卡氏菌（Nocardia）的大口黑鱸

3.營養性疾病

營養性病變主要因為飼料原料霉變、配方不科學、投喂不合理等，導致苗種、成魚飼養過程中，畸形、發育不全、肝膽病變、腸道炎癥、代謝功能障礙等病癥。合理投喂、定期補充維生素、微量元素、中草藥等，保肝護膽、腸胃護理是關鍵應對策略（圖3）。

圖3 發生肝臟病變的大口黑鱸

4.水質病

水質病主要指：由于水質理化指標不適宜魚類生長而引起的疾病，例如：氨氮、亞硝酸鹽、pH值、透明度、總硬度、總堿度、藍綠藻和水華等。另外，水體總堿度過高，塘水長期偏瘦、渾濁更容易引起錨頭鳋（釘蟲）滋生、亞硝酸鹽超標、魚類攝食減弱等問題。適當交換新鮮水源、定期補充微生態制劑和有益藻類維持水體菌藻平衡，是穩定水質的關鍵。

主要技術措施

1.生產區域隔離與布局

在后備親魚進入養殖場前，首先應當確定好后備親魚培育基地和產卵池塘選址，要求周邊20km內無加州鱸、鱖魚、生魚、蛙、蝦類養殖為宜。繁殖基地設置暫養區、繁育區、后備親魚培育區，中間應有一定隔離區域。養殖用水以井水、山泉水為宜，經專用沉淀池、預處理池、儲水池三級處理后再使用，并設置獨立的進排水系統，產卵池一般選擇規格在5～8畝/口，水深1.5～2.0米為宜。

2.無病毒后備親魚選擇

目前大口黑鱸在市面上已經形成幾大種系，代表品種有：優鱸、加得豐、皖鱸一號、臺鱸、廣種等。從有資質的品牌苗企、種苗來源清晰的基地，直接采購現成的商品魚作為后備親魚，時間短、成本低、易操作。為保證后期品質不退化，有規模的企業，還應當詳細標注親魚不同來源池塘編號，以便后期的配對雜交。后備親魚的選擇：建議選擇養殖池塘遠離主養區；近3年無重大疾病發生；投苗為正季早春苗，規格在150g～500g之間。苗種采購前每口池塘選擇不低于10尾魚，采用熒光定量PCR方法檢測主要病原：大口黑鱸虹彩病毒（LMBV）、傳染性脾腎壞死病毒（ISKNV）、神經壞死病毒（VNN）、鱸彈狀病毒（SCRV）、諾卡氏菌（Nocardia），且建議每月1次，連續監測3個月，檢測結果要求陰性。后備親魚經徹底消毒后用專用運輸車，運送到暫養區，暫養一個月后再抽樣進行病原檢測，存在風險隱患及時淘汰，并對場地進行徹底消殺，確保種魚安全轉運至后備親魚養殖區。

3.后備親魚營養強化

開展無病毒親本篩選可杜絕85%的重大傳染性疾病，是保障苗種繁育和親魚成活率的關鍵步驟，有條件的企業，還可以選擇對親魚進行疫苗接種。大口黑鱸同鱖魚、生魚等肉食性魚類相似，糖代謝能力較弱，長期食用全價高蛋白膨化飼料，常表現出“二型糖尿病”特征，肝膽容易受到損傷、腸道結構發生改變，進而引起腸道菌群失調誘發腸道疾病。所以加強后備親魚的培育和產前營養強化尤為重要。本方案選用復合維生素、黃芪多糖、甘草提取物，按質量比為1∶2∶2的比例混合成為親魚營養強化劑并長期投喂，親魚肝臟紅潤、脾臟體積適中，腸道結構完整且富有彈性，親魚培育、繁殖期間健康情況均較好。

4.親魚飼養和苗種繁殖管理技術

水溫在18～30℃時是大口黑鱸適宜的產卵水溫，華南地區一般在每年10月至次年5月都可以實現自然產卵，經人為干預調節出合適的環境，可以實現反季節繁殖。繁殖前對后備親魚進行一次病原檢測，挑選1冬齡以上，規格在750g以上、體型健碩、肥滿度在2.5左右、尾柄長3～5cm以上、無典型畸形個體，抽樣觀察性腺發育時相達到Ⅳ期以上進入待選（圖4）。檢測合格的后備親魚，按照雌雄1.2～1.5∶1進行配對轉運至繁殖池，每畝魚塘350～400組親魚為宜，工廠化繁育放養密度一般為每1.5～1.8m3水體1組親魚。為避免親魚打斗過激，規格應當盡量統一。繁殖期間選擇飼料粗蛋白在42%～45%之間為宜，每日早、晚各1餐，投喂率控制在2%以內，池塘定期補充微生態制劑控制水質，并維持適當的肥力以穩定藻相，繁殖期間還應當每口池塘配備1臺水車式增氧機加強水流刺激。

圖4 強化后即將繁殖的大口黑鱸

5.繁殖結束后的養殖管理

一般一個繁殖高峰期持續時間在25-40天，魚類相對懷卵量在123±29粒/g體重，大口黑鱸屬于分批產卵魚類，在一個產卵高峰期結束后，應當及時轉運親魚，淘汰產卵后病、殘個體，并將雌雄親魚分開飼養，投喂率恢復到體重的2.5%～3%，做好消毒和抗真菌處理，同時內服5-7日抗菌素配合亞硫酸甲萘醌、免疫增強中草藥等，緩解性腺炎癥，盡快恢復體質，并維持水質清新。

魚類性腺發育研究，目前主要依靠組織學、組織化學以及電鏡、免疫、分子生物學和離體培養等來實現，水生動物魚類產前強化培育較少關注。魚類性腺發育，受機體內部的生理機制和外部環境雙重調節。影響魚類性腺發育的生態因素包括：營養、溫度、鹽度、光照、水流和溶氧量等。親魚產前強化培育，主要通過投喂冰鮮魚作補充營養，促進親本性腺發育，提高卵子和精子質量，然而該方法存在病原交叉污染和不符合漁業健康養殖指南規范的問題。

本研究按照無病毒苗種繁育標準，開展大口黑鱸親魚培育及苗種繁殖，極大降低了親魚損耗，保證苗種不帶病毒，提高了苗種質量，促進了大口黑鱸產業高質量發展。2020-2023年期間，該項技術已經在廣東德權漁業發展有限公司投入實踐生產應用。成功篩選出8萬余組親魚，實現連續三年生產，親魚損耗率在5%以內，培育無特定病毒大口黑鱸水花超10億尾，規格朝苗3000余萬尾。