胡 佳,戴 丹,彭新紅,孫 鵬,陳緒濤,王 振,熊澤亞,劉穎聰,魏云輝**
(1.江西省農業科學院農業應用微生物研究所,江西 南昌 330200;2.江西農業大學農學院,江西 南昌 330045)
靈芝(Ganodermaspp.)在我國民間有仙草的美稱,是歷史悠久的著名食(藥)兼用真菌。其含有多糖、萜類物質等多種活性成分,具有抗氧化、抗癌、免疫調節、降血糖等功能,藥用價值非常高。靈芝的開發利用早已成為備受關注的課題[1-4]。
基于形態學研究,對食用菌的農藝性狀進行評價具有簡單、快速等優點,在品種鑒定、栽培條件篩選等試驗中被廣泛使用。蘭玉菲等[5]基于農藝性狀對29 個靈芝屬(Ganoderma)菌株進行了遺傳多樣性和聚類分析。李學龍等[6]對國內8 個主栽靈芝菌株開展了農藝性狀評價,發現在相同栽培條件下,不同菌株子實體的農藝性狀存在一定差異。金鑫等[7]對4 個靈芝菌株在不同栽培模式下的農藝性狀進行了比較研究,發現不同的靈芝品種適宜不同的栽培模式。
廣義的靈芝包括靈芝屬許多種類,如赤靈芝(Ganoderma lucidum)、紫靈芝(Ganoderma sinense)、四川靈芝(Ganoderma sichuanense)、松杉靈芝(Ganoderma tsugae)等[8]。為選育優良靈芝品種,以赤靈芝、紫靈芝、樹靈芝(Ganoderma sessile)、南方靈芝(Ganoderma austral)等40個靈芝屬菌株為材料,開展菌種培育和栽培出芝試驗。觀察對比不同菌株的菌絲生長形態,對其菌絲生長速率進行測定,對產量和農藝性狀進行了評價,為靈芝品種的進一步開發利用提供了參考依據。
1.1.1 供試菌株
試驗供試菌株包括采集的9 個野生靈芝屬菌株G01~G09 和收集的31 個國內栽培靈芝菌株G10~G40,供試菌株基本信息見表1。

表1 供試菌株Tab.1 Tested strains
1.1.2 培養基
PDA 培養基:去皮馬鈴薯(煮汁)200 g·L-1、葡萄糖20 g·L-1、瓊脂粉20 g·L-1,pH 自然。
1.1.3 栽培料
栽培料配方:雜木屑78%、麥麩20%、石膏1%、白砂糖1%,含水量控制在60%~65%。
1.2.1 菌絲生長情況比較
從供試菌株母種斜面轉接一小塊菌塊至PDA平板上進行活化。待菌絲長滿平板后,使用直徑為0.5 cm 的打孔器取圓整的菌塊,轉接至新的PDA平板中央,置于25 °C 培養箱中避光培養。待菌絲萌發后,采用“十”字交叉法測定菌絲生長速率,并記錄菌絲狀態。
1.2.2 代料栽培和管理
使用聚乙烯栽培袋(15 cm×55 cm×0.005 cm),栽培料裝袋后常壓蒸汽滅菌24 h,冷卻至室溫后于無菌室中接種。用打孔器在料袋表面均勻打3 個接種穴,接入菌種后套保水袋扎口。將菌袋移入培養室進行培養,溫度控制在25~28 °C,相對濕度控制在60%~70%。待菌絲滿袋后移入大棚出芝,除去保水袋,溫度控制在25~30 °C,采用微噴方式補水,相對濕度控制在85%~90%。
1.2.3 子實體采收和農藝性狀評價
當靈芝子實體成熟后,進行采收并測定產量。生物學效率為靈芝子實體鮮質量與培養料干質量的百分比。使用游標卡尺測量子實體菌蓋的長徑與短徑、菌蓋厚度、菌柄長度、菌柄直徑等,觀察記錄菌蓋形狀、顏色等。
供試的40個靈芝屬菌株中,部分菌株的菌絲生長形態見圖1。觀察統計得到的所有菌絲特征見表2(表中數值為3 組平均值±標準差),

圖1 部分靈芝屬菌株的菌落形態Fig.1 Colony morphology of some Ganoderma strains

表2 40個靈芝屬菌株菌絲特征Tab.2 Mycelial characteristic of 40 Ganoderma strains
由圖1、表2 可知,不同菌株菌絲生長速率差距較大。菌株G23 菌絲的平均生長速率最快,為3.11 cm·d-1;其次為菌株G06、G17、G15、G16,平均生長速率為2.67~2.87 cm·d-1,菌絲萌發均較晚,但后期生長較快。菌株G22 菌絲平均生長速率最慢,為0.97 cm·d-1。40 個菌株菌絲體顏色均潔白,多數菌絲較濃密且均勻。
40 個菌株的子實體產量和生物學效率(表中數值為3 組平均值±標準差)統計見表3。

表3 40個靈芝屬菌株產量和生物學效率Tab.3 Yield and biological efficiency of 40 Ganoderma strains
由表3 可知,G33 的產量最高,生物學效率為36.49%;其次為G32、G16 和G11,生物學效率在34.86%以上;G28 的產量最低,生物學效率僅為13.66%。在野生菌株中,G09 的產量最高,生物學效率為27.46%;G01 的產量最低,生物學效率僅為15.10%。
40 個菌株子實體農藝性狀(表中數值為3 組平均值±標準差)見表4,部分子實體形態見圖2。

圖2 部分靈芝屬菌株的子實體形態Fig.2 Fruit body morphology of some Ganoderma strains

表4 40個靈芝屬菌株子實體農藝性狀Tab.4 Agronomic characters of fruit body of 40 Ganoderma strains
由表4 和圖2 可知,不同菌株子實體形態差異較大,且在不同種間差異明顯,紫芝、赤芝、樹舌亞屬之間子實體形態各有特點。栽培菌株中,菌蓋最大的是G31,最小的是G21;菌蓋厚度最大的是G28,最小的是G37;菌柄最長的是G36,最短的是G28;菌柄直徑最大的是G13,最小的是G20。野生菌株中菌蓋最大的是G07,最小的是G04;菌蓋厚度最大的是G07,最小的是G02;菌柄最長的是G09,最短的是G05;菌柄直徑最大的是G06,最小的是G01。不同菌株菌蓋顏色也有較大差異,主要有紫褐色、灰褐色、紅褐色、黃褐色、淺灰色等。菌蓋形狀主要有腎形和扇形,少數為近圓形。
以40個靈芝屬菌株為材料開展了產量和農藝性狀評價。結果表明,40 個菌株菌絲生長速率差異較大,野生菌株G06、G04、G03 和栽培菌株G23、G17、G15 菌絲生長速率較快,菌絲密度、均勻度較理想。在栽培出芝試驗中,結合產量和農藝性狀兩方面進行評價,野生赤芝G06 和G09 產量和商品性中等。目前對于觀賞用靈芝種質資源的評價較少[9]。在本試驗樣品中,G01 為野生紫芝,雖然產量不高,但是形態美觀,具有較高的觀賞價值,可作為觀賞用靈芝菌株。野生菌株G01、G06 和G09 均具有較大的馴化潛力。栽培菌株G33、G32、G11、G12、G30 的產量較高,商品性較好,可作為優良品種進一步開發利用。
試驗結果還表明,子實體產量、農藝性狀與菌絲生長速率并不完全正相關。有些菌株菌絲生長較快,但產量和農藝性狀未必表現優異。因此,對靈芝種質資源的評價應從多方面系統開展。在今后的研究中,可開展分子水平的親緣關系評價、子實體和孢子粉的藥用成分評價,以完善靈芝種質資源評價體系,為靈芝種質資源開發利用奠定基礎[10-12]。