生科SK-800 全自動血型分析儀的輸血相容性檢測性能評價

顏林林（通信作者），陳美紅，丘麗萍

福建省立醫院南院 （福建 福州 350028）

隨著醫學學科的不斷發展，輸血已成為臨床搶救危重患者的常用治療方法[1]。為保證臨床輸血安全，減少輸血不良反應的發生，ABO/Rh（D）血型鑒定、交叉配血和不規則抗體篩查已成為輸血相容性檢測的重要項目[2-3]。面對日益增多的工作量，各類全自動血型儀陸續被投入臨床使用，逐漸實現了輸血相關檢測過程的標準化、自動化和網絡化，同時，可有效避免手工操作所帶來的差異[4-5]。根據最新版ISO 15189《醫學實驗室質量和能力認可準則在輸血醫學領域的應用說明》對檢驗設備的要求：應至少對分析設備的溫控系統、加樣系統、檢測系統進行校準（適用時）[6]。但由于輸血相容性定性檢測結果的特殊性，目前，相關部門尚未提供針對全自動血型分析儀臨床性能評價的公認評價流程。因此，本研究結合儀器自身特點和實驗室條件，分別從準確度、穩定性、抗體檢出限及干擾試驗4 各方面對本實驗室新引進的中山生科SK-800 全自動血型分析儀在ABO/Rh（D）血型鑒定、交叉配血和不規則抗體篩查中的性能進行了評價，現報道如下。

1 材料與方法

1.1 樣本

收集2021 年3—5 月我院門診與手術共225 份備血患者的EDTA-K2 抗凝全血樣本，其中，合格樣本200 份，不合格樣本25 份（包括溶血、脂血及黃疸樣本）。

1.2 儀器和試劑

1.2.1 儀器

儀器名稱及型號：中山生科SK-800 全自動血型分析儀（生產廠家：中山市生科試劑儀器有限公司），TD-2Y 醫用多功能離心機（生產廠家：中山市生科試劑儀器有限公司）。

1.2.2 試劑

試劑名稱：ABO/Rh（D）正反定型血型檢測卡（生產廠家：中山市生科試劑儀器有限公司），抗人球蛋白檢測卡（生產廠家：中山市生科試劑儀器有限公司），抗篩細胞（Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ）（生產廠家：中山市生科試劑儀器有限公司），反定型試劑A1 細胞、B 細胞、O 細胞（生產廠家：中山市生科試劑儀器有限公司），抗-A、抗-B 血型定型試劑（單克隆抗體）（生產廠家：上海血液生物醫藥有限責任公司），Rh（D）（IgM）血型定型試劑（單克隆抗體）（生產廠家：上海血液生物醫藥有限責任公司），血型鑒定及不規則抗體篩查質控品（生產廠家：北京金豪制藥股份有限公司），交叉配血質控品（生產廠家：北京金豪制藥股份有限公司）。

1.3 方法

凝集強度的判斷標準：正定型凝集強度一致；反定型、交叉配血和不規則抗體篩查凝集強度差異≤1+；陰性試驗無陽性結果出現，陽性試驗無陰性結果出現。

1.3.1 準確度

1.3.1.1 室間質評樣本留樣再測

留取國家衛生健康委臨檢中心2021 年第1 次輸血相容性室間質控品，包括5 份ABO/Rh（D）血型樣本、5 份交叉配血樣本和5 份不規則抗體篩查樣本。所有樣本均使用儀器配套凝膠卡進行手工卡式法檢測，檢測結果與臨檢中心發布的質評結果相比，相符則為通過。

1.3.1.2 比對試驗

分別采用儀器法和手工試管法對200 份臨床樣本進行ABO/Rh（D）血型鑒定，檢測間隔時間不超過24 h，手工試管法作為參考方法，一致率≥80%為通過。

1.3.2 穩定性

1.3.2.1 批內穩定性

留取已確定的ABO/Rh（D）血型鑒定、交叉配血和不規則抗體篩查臨床樣本各1 份，同一天內在儀器上連續檢測20 次，計算重復率，重復率≥80%判斷為通過。

1.3.2.2 批間穩定性

以室內質控品為待測樣品，每天檢測2 次，連續檢測10 d，項目包括ABO/Rh（D）血型鑒定、交叉配血和不規則抗體篩查，計算重復率，判斷標準同“1.3.2.1”。

1.3.3 抗體檢出限

1.3.3.1 手工試管法抗體效價檢測

將抗-A、抗-B、抗-D 抗體試劑進行倍比稀釋，分別取100 μl 不同稀釋度的抗體溶液與相應的50 μl 含3%A1 型、B 型和O 型紅細胞的0.9%氯化鈉溶液懸液混勻，室溫孵育15 min，3 500 rpm離心15 s，肉眼判讀凝集強度。

1.3.3.2 卡式法抗體效價檢測

使用配套抗人球蛋白檢測卡做間接抗人球蛋白試驗，向各反應腔中依次加入中山生科SK-800 全自動血型分析儀配套的1%A1 型、B 型和O 型紅細胞試劑懸液50 μl，以及稀釋好的相應抗體溶液100 μl，室溫孵育15 min，置中山生科SK-800 全自動血型分析儀專用離心機以1 800 rpm 離心1 min、2 500 rpm 離心1 min，肉眼判讀凝集強度。

1.3.4 干擾試驗

取輕度、中度、重度溶血樣本各5 份以及脂血、黃疸樣本各5 份，在儀器上進行ABO/Rh（D）血型鑒定，觀察溶血、脂血、黃疸對血型結果判讀的影響。

1.4 統計分析

應用Excel 軟件進行數據統計分析。

2 結果

2.1 準確度

對比國家衛生健康委臨檢中心2021 年第1 次輸血相容性室間質評反饋結果，針對ABO/Rh（D）血型鑒定、交叉配血和不規則抗體篩查檢測等項目，以中山生科SK-800 全自動血型分析儀配套試劑卡進行手工卡式法檢測，肉眼判讀結果均為合格，滿足室間質評要求，見表1。

表1 2021 年第1 次輸血相容性檢測室間質評檢測結果

200 份臨床樣本的檢測結果顯示，手工試管法與儀器法對ABO/Rh（D）血型鑒定的一致率均為100%，見表2。

表2 儀器法與手工試管法的血型檢測結果比較

2.2 穩定性

在ABO/Rh（D）血型鑒定、交叉配血和不規則抗體篩查檢測項目中，批內和批間重復試驗均顯示出良好的重復性，重復率均為100%，見表3～4。

表3 批內穩定性驗證結果

表4 批間穩定性驗證結果

2.3 抗體檢出限

針對IgM 型抗體效價檢測的結果顯示，抗-A抗體、抗-B 抗體、抗-D 抗體的卡式法效價分別為1∶2 048、1∶1 024、1∶1 024，而手工試管法的效價分別為1∶1 024、1∶512、1∶512，可見對于IgM 型血型抗體，SK-800 抗人球蛋白試劑卡相較于手工試管法具有更低的抗體檢出限，見表5。

表5 抗體效價檢測結果

2.4 干擾試驗

輕度溶血、脂血和黃疸樣本并不影響ABO/Rh（D）血型鑒定的結果判讀，但當出現中、重度溶血時，儀器提示溶血，結果無法判讀，需進行手工復核，見表6。

表6 ABO/Rh（D）血型鑒定干擾試驗結果

3 討論

全自動血型分析儀采用了創新性的運載加樣系統、機械轉卡系統，嚴格按照紅細胞凝集法的原理進行布局，設計合理，具有穩定性高、可減少手工操作誤差和主觀判讀誤差等優點，實現了輸血相關檢測的自動化操作[7-8]。輸血相容性檢測包括ABO/Rh（D）鑒定、交叉配血和不規則抗體篩查，是確保臨床輸血安全的重要檢測環節。為此，本研究從準確度、穩定性、抗體檢出限及干擾試驗4 個方面對SK-800 全自動血型分析儀的檢測性能進行綜合評價。

在ABO/Rh（D）血型鑒定、交叉配血以及不規則抗體篩查3 個檢測項目中，SK-800 全自動血型分析儀的檢測結果均可滿足室間質評評價的要求。同時，SK-800 全自動血型分析儀在ABO/Rh（D）血型鑒定方面與手工試管法的檢測結果具有較高的一致性。由于精密度指標并不適用于輸血相容性定性檢測結果的評價[9]，因此，本研究以室內質控品為檢測對象，以批內及批間穩定性來判斷儀器的精密度，結果顯示，批內及批間穩定性試驗重復率均為100%，能夠滿足臨床檢測要求。

在IgM 型抗體效價的檢測中，與手工試管法相比，SK-800 全自動血型分析儀的檢出限更低，且有研究表明，生科SK-800 全自動血型分析儀在IgM 類型的不規則抗體的檢測方面具有更好的靈敏度[10]。此外，在開展檢測時，應盡量使用配套細胞試劑或調整合適的細胞濃度，以避免細胞濃度對檢測結果的準確性造成不利影響[11]，同時，還需注意對加樣槍進行定期清潔和校準維護[12]。干擾試驗結果顯示，輕度溶血、脂血和黃疸對血型檢測無影響，但中、重度溶血可導致結果無法判讀，提示樣本溶血對檢測結果的影響最為顯著。

綜上所述，生科SK-800 全自動血型分析儀的抗體檢出限低、抗干擾能力強、穩定性和準確度均較高，可滿足臨床檢測要求。但對于儀器無法判讀的結果，仍需對比不同方法或不同儀器進一步復查，保障臨床輸血安全。此外，由于生科SK-800 全自動血型分析儀均使用一次性加樣耗材，在運行期間無需對加樣針進行清洗，具備無攜帶污染和檢測速度快等優點，可有效提高工作效率，具有較高的臨床應用價值。