高效液相色譜法測定復方氨基酸膠囊(8-11)中氨基酸的含量
2023-05-14 11:37:22全迎新鄧代武金彪金東日
延邊大學學報(自然科學版)
2023年1期
全迎新, 鄧代武, 金彪, 金東日
( 1.延邊大學 理學院, 吉林 延吉 133002; 2.延邊大學 分析測試中心, 吉林 延吉 133002 )
0 引言
氨基酸是人體蛋白質的主要組成部分,具有促進大腦發育、防止細胞退化等生理功能[1].研究顯示,人體缺乏氨基酸會引發多種疾病[2].復方氨基酸膠囊(8-11)含有8種人體必需氨基酸(亮氨酸、異亮氨酸、賴氨酸、苯丙氨酸、蘇氨酸、纈氨酸、色氨酸和甲硫氨酸)和11種維生素,對促進營養組織細胞生長和由氨基酸缺乏導致的蛋白質合成障礙等具有良好的改善效果[3].目前,測定氨基酸的方法主要有高效液相色譜法(HPLC)[4]、薄層色譜法(TLC)[5]、毛細管電泳法(CE)[6]等,其中HPLC因具有靈敏度高和適用范圍廣等優點而被廣泛應用[7].但由于氨基酸具有極性高、揮發性低以及大部分氨基酸不具有生色基團的特性,因此對其分離和檢測存在一定困難[8].目前,一般采用衍生化試劑對氨基酸進行衍生化來提高其檢測靈敏度,通常使用的衍生化試劑主要有異硫氰酸苯酯[9-10]、鄰苯二甲醛[11-12]、2,4-二硝基氟苯[13-14]等.其中2,4-二硝基氟苯也稱為桑格(Sanger)試劑,目前已被用于鑒定多肽或蛋白質的N-末端氨基酸[15-16].2020年,鄧紅英等[8]采用桑格試劑測定了復方氨基酸注射液中的氨基酸含量,但由于該衍生化試劑存在副產物干擾較強等問題而限制了其在氨基酸分析中的應用.為此,本文采用類桑格試劑1-(5-氟-2,4-二硝基-苯基)-4-甲基哌嗪(PPZ)作為衍生化試劑,并以此建立了一種測定氨基酸含量的柱前衍生化的高效液相色譜法.