LC-MS/MS 測定氨磺樂靈在水和土壤中的殘留量

黃 慧，張 武，閆妮娜

(浙江長三角化學品安全評價有限公司，杭州 310023)

氨磺樂靈(oryzalin)，又名氨磺靈、黃草消，化學名稱為3,5-二硝基-N′,N′-二丙基對氨基苯磺酰胺，是一種低毒選擇性芽前除草劑，其通過破壞幼苗分生細胞的有絲分裂，從而抑制雜草幼芽及幼根的生長，主要用于大豆、花生、棉花、果樹等作物田防除一年生禾本科和闊葉雜草，也可用于水稻等作物田的雜草[1～3]。

氨磺樂靈在國內(nèi)已獲得登記[4]，但對于氨磺樂靈在環(huán)境中的檢測方法鮮有報道[5]。本研究擬采用高效液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用法建立氨磺樂靈在土壤和水等環(huán)境介質(zhì)中的殘留檢測方法，相對于目前已報導的高效液相色譜法[6]具有靈敏度高、可靠性強的特點，可為該除草劑在環(huán)境中的安全監(jiān)測提供科學指導。

1 材料與方法

1.1 供試樣品與材料

98.0%氨磺樂靈標準品(CAS 號19044 88 3，上海源葉生物科技有限公司)；乙腈、甲酸(均為色譜純，美國TEDIA 公司)；自來水；潮棕土：自然風干后過2 mm 篩。

1.2 儀器

LCMS 8040 高效液相質(zhì)譜聯(lián)用儀(日本島津公司)；XSE205DU 電子天平(美國梅特勒 托利多公司)；VELOCITY 14 Pro 離心機(英國Dynamica 公司)；MS 3 BASIC 渦旋混合器(德國艾卡公司)。

1.3 試驗設(shè)計

依據(jù)《農(nóng)藥登記 土壤和水中化學農(nóng)藥分析方法建立和驗證指南》(NY/T 3151—2017)[7]、《農(nóng)作物中農(nóng)藥殘留試驗準則》(Y/T 788—2018)[8]，分別進行水、土中的添加回收試驗。

準確稱取標準物質(zhì)，用乙腈溶解配制儲備液；用乙腈/水(1∶1，體積比)混合溶液逐步稀釋配制系列標準溶液。以氨磺樂靈的質(zhì)量濃度為橫坐標，峰面積為縱坐標，繪制標準曲線。并以水/土中的基質(zhì)溶液配制基質(zhì)標準溶液，分別考察基質(zhì)效應(yīng)；當基質(zhì)效應(yīng)＜20%，可使用溶劑標準曲線進行計算，否則需用基質(zhì)標準曲線進行計算。

1.4 試驗方法

1.4.1 溶液配制

以乙腈為溶劑，配制得到質(zhì)量濃度為1 000 mg/L的儲備液1。

溶劑標準曲線：以乙腈/水(1∶1，體積比)混合溶液為溶劑，逐級稀釋配制質(zhì)量濃度為0.5、1.0、2.0、5.0、10.0、20.0、50.0μg/L 的系列標準溶液，待儀器穩(wěn)定后依次連續(xù)注入上述標準溶液，以峰面積對質(zhì)量濃度回歸分析，制得標準曲線。

水中基質(zhì)標準曲線：以空白自來水為溶劑，制得0.5、1.0、2.0、5.0、10.0、20.0、50.0μg/L 的基質(zhì)標準溶液。以峰面積對質(zhì)量濃度回歸分析，制得標準曲線。

土中基質(zhì)標準曲線：以空白土壤提取液為溶劑，制得0.5、1.0、2.0、5.0、10.0、20.0、50.0μg/L 的基質(zhì)標準溶液。以峰面積對質(zhì)量濃度回歸分析，制得標準曲線。

用乙腈/水(1∶1，體積比)混合溶液稀釋制得質(zhì)量濃度為0.1 mg/L的儲備液2 和1.0 mg/L 的儲備液3，待用。

1.4.2 水中添加回收試驗

分別設(shè)置1.0、10μg/L 2 個添加水平，每個添加水平設(shè)置5 個平行，同時設(shè)置1 個空白對照。

量取10 mL 空白自來水，分別加入質(zhì)量濃度為0.1 mg/L 的儲備液2 和1.0 mg/L 的儲備液3 各100 μL，使添加水平分別為1.0、10μg/L，搖晃混勻。靜置片刻后，過0.22μm 濾膜，LC MS/MS 測定。

1.4.3 土壤中添加回收試驗

分別設(shè)置0.001、0.01 mg/kg 2 個添加水平，每個添加水平設(shè)置5 個平行，同時設(shè)1 個空白對照。

稱取空白土壤10.0 g 于100 mL 離心管中，分別加入質(zhì)量濃度為0.1 mg/L 的儲備液2 和1.0 mg/L 的儲備液3 各100μL，使添加水平分別為0.001、0.01 mg/kg。待溶劑揮發(fā)后，加入5 mL乙腈和5 mL水，超聲10 min，180 r/min 振蕩20 min 混勻，然后1 000 r/min 離心5 min，取上層提取液過0.22μm 濾膜，LC MS/MS測定。

1.4.4 檢測條件

液相色譜條件：色譜柱：Agilent ZORBAX Extend C18(2.1 mm×50 mm，3.5μm)；柱溫：30 ℃；進樣體積：10 μL；流速：0.4 mL/min。

表1 流動相洗脫程序

MS 條件：掃描模式：ESI MRM Negative，噴霧氣流速：3 L/min，DL 溫度：250 ℃，加熱塊溫度：400 ℃，干燥氣流速：15 L/min。

表2 離子對及參數(shù)

2 結(jié)果與分析

2.1 重復(fù)性

將5.0μg/L 氨磺樂靈標準溶液重復(fù)進樣7 次，檢測該方法中保留時間和響應(yīng)值(峰面積)的重復(fù)性。試驗結(jié)果見表3，保留時間平均值為0.487 0 min，RSD 為0.110%；峰面積平均值為1.06×105，RSD 為1.91%。符合分析方法質(zhì)量控制要求。

表3 氨磺樂靈檢測重復(fù)性

2.2 水中添加回收試驗

溶劑配標為0.5～50.0μg/L 時，氨磺樂靈的峰面積與質(zhì)量濃度呈線性相關(guān)，標準曲線方程為y=1.68×104x+4.01×103(r=0.999 9)，各質(zhì)量濃度點準確度范圍為90.8%～111.0%；基質(zhì)配標為0.5～50.0μg/L時，氨磺樂靈的峰面積與質(zhì)量濃度呈線性相關(guān)，標準曲線方程為y=1.14×104x+3.28×103(r=0.999 1)，各質(zhì)量濃度點準確度范圍為88.5%～109%。

利用斜率計算基質(zhì)效應(yīng)，結(jié)果為31.9%，基質(zhì)效應(yīng)>20%，因此以基質(zhì)配標得到的標準曲線進行定量。基質(zhì)效應(yīng)的計算結(jié)果見表4。

表4 基質(zhì)效應(yīng)結(jié)果

水中添加回收試驗分別設(shè)置1.0、10μg/L 2 個添加水平，每個添加水平設(shè)置5 個平行，同時設(shè)1 個空白對照，空白自來水在目標出峰處無干擾。1.0、10 μg/L 添加水平的平均回收率分別為104%和109%，RSD 分別為4.62%和2.40%。試驗結(jié)果見表5 及圖1。

圖1 水中添加回收試驗質(zhì)譜圖

表5 氨磺樂靈水中加標回收率

2.3 土壤中添加回收試驗

溶劑配標為0.5～50.0μg/L 時，氨磺樂靈的峰面積與質(zhì)量濃度呈線性相關(guān)，標準曲線方程為y=1.80×104x+4.24×103(r=0.999 9)，各質(zhì)量濃度點準確度范圍為86.9%～107%。基質(zhì)配標為0.5～50μg/L時，氨磺樂靈的峰面積與質(zhì)量濃度呈線性相關(guān)，標準曲線方程為y=7.60×103x+2.21×103(r=0.999 3)，各質(zhì)量濃度點準確度范圍為86.9%～113%。利用斜率計算基質(zhì)效應(yīng)，結(jié)果為57.8%，基質(zhì)效應(yīng)>20%，因此以基質(zhì)配標得到的標準曲線進行定量?；|(zhì)效應(yīng)計算結(jié)果見表6。

表6 基質(zhì)效應(yīng)結(jié)果

土壤中添加回收試驗分別設(shè)置0.001、0.01 mg/kg 2 個添加水平，每個添加水平設(shè)置5 個平行，同時設(shè)1 個空白對照，空白土壤提取液在目標出峰處無干擾。0.001、0.01mg/kg 的平均回收率分別為94.8%和85.4%，RSD 分別為3.53%和4.78%。試驗結(jié)果見表7 及圖2。

表7 氨磺樂靈土壤中添加回收率

圖2 土壤中添加回收試驗質(zhì)譜圖

3 結(jié)論

對氨磺樂靈在水和土壤中的殘留量檢測研究中，建立了高效液相液質(zhì)聯(lián)用儀(LCMS/MS)的分析方法。測得在水中1.0、10.0μg/L 和土壤中0.001、0.01 mg/kg 共4 個添加水平下平均回收率和相對標準偏差，均符合《農(nóng)藥登記 土壤和水中化學農(nóng)藥分析方法建立和驗證指南》(NY/T 3151—2017)和《食品安全國家標準食品中農(nóng)藥最大殘留限量》(GB 2763—2012)要求。該方法靈敏、有效，適合實驗室大批量檢測。