祛風(fēng)扶正散調(diào)控TLR4/NF-κB信號(hào)通路治療周圍性面癱的作用機(jī)制

［摘要］ 目的 探討祛風(fēng)扶正散調(diào)控Toll樣受體4（TLR4）/核轉(zhuǎn)錄因子κB（NF-κB）信號(hào)通路治療周圍性面癱的作用機(jī)制。

方法 建立RAW264.7細(xì)胞炎癥模型，用不同濃度祛風(fēng)扶正散受試物處理炎癥模型細(xì)胞，采用Griess reagent法檢測(cè)細(xì)胞一氧化氮（NO）的分泌量，酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）法檢測(cè)細(xì)胞上清中腫瘤壞死因子α（TNF-α）、白細(xì)胞介素1β（IL-1β）、白細(xì)胞介素6（IL-6）、前列腺素2（PEG2）的水平，活性氧熒光探針（DCFH-DA）法檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)活性氧（ROS）的水平，實(shí)時(shí)熒光定量PCR（RT-PCR）檢測(cè)細(xì)胞TNF-α、IL-1β mRNA的表達(dá)，蛋白印跡法（Western blot）檢測(cè)細(xì)胞p65、磷酸化p65（p-p65）、IκBα、磷酸化IκBα（p-IκBα）蛋白表達(dá)。

結(jié)果 祛風(fēng)扶正散可顯著降低炎癥模型細(xì)胞NO、ROS、TNF-α、IL-1β、IL-6及PEG2表達(dá)水平（F=338.731～5 790.712，Plt;0.01），下調(diào)TNF-α、IL-1β mRNA表達(dá)（F=134.430、168.217，Plt;0.01），抑制p-p65和p-IκBα蛋白表達(dá)、IκBα降解及p65核易位（F=17.793～97.613，Plt;0.01）。

結(jié)論 祛風(fēng)扶正散治療周圍性面癱的作用機(jī)制可能與抑制本病相關(guān)TLR4/NF-κB信號(hào)通路的活化及其下游促炎性細(xì)胞因子、炎癥遞質(zhì)的釋放有關(guān)。

［關(guān)鍵詞］ 面神經(jīng)麻痹；中藥；祛風(fēng)扶正散；Toll樣受體4；NF-κB

［中圖分類號(hào)］ R745.12;R285

［文獻(xiàn)標(biāo)志碼］ A

［文章編號(hào)］ 2096-5532（2023）01-0073-06

doi：10.11712/jms.2096-5532.2023.59.030

［網(wǎng)絡(luò)出版］ https：//kns.cnki.net/kcms/detail/37.1517.r.20230314.2037.001.html;2023-03-16 11：42：26

MECHANISM OF ACTION OF QUFENG FUZHENG POWDER IN TREATMENT OF PERIPHERAL FACIAL PARALYSIS BY RE-

GULATING THE TOLL-LIKE RECEPTOR 4/NUCLEAR FACTOR-KAPPA B SIGNALING PATHWAY

ZHOU Lihua， ZHOU Changkai， SHANG Xiuling， JING Fanbo

（College of Pharmacy， Qingdao University， Qingdao 266071， China）

; ［ABSTRACT］ "Objective "To investigate the mechanism of action of Qufeng Fuzheng powder in the treatment of peripheral facial paralysis by regulating the Toll-like receptor 4 （TLR4）/nuclear factor-kappa B （NF-κB） signaling pathway.

Methods

RAW264.7 cells were used to establish an inflammation model， and then the cells were treated with different concentrations of Qufeng Fuzheng powder. The Griess reagent method was used to measure the secretion of nitric oxide （NO）; ELISA was used to measure the levels of tumor necrosis factor-α （TNF-α）， interleukin-1β （IL-1β）， interleukin-6 （IL-6）， and prostaglandin-2 （PEG2） in cell supernatant; the DCFH-DA fluorescent probe was used to measure the level of reactive oxygen species （ROS） in cells; quantitative real-time PCR was used to measure the mRNA expression levels of TNF-α and IL-1β， and Western blot was used to mea-

sure the protein expression levels of p65， phosphorylated p65 （p-p65）， nuclear factor of kappa light polypeptide gene enhancer in B-cells inhibitor， alpha （IκBα）， and phosphorylated IκBα （p-IκBα）.

Results "Qufeng Fuzheng powder significantly reduced the le-

vels of NO， ROS， TNF-α， IL-1β， IL-6， and PEG2 in cells （F=338.731-5 790.712，Plt;0.01） and downregulated the mRNA expression levels of TNF-α and IL-1β （F=134.430，168.217;Plt;0.01）. Moreover， it also inhibited the protein expression of p-p65 and p-IκBα， the degradation of IκBα， and the nuclear translocation of p65 （F=17.793-97.613，Plt;0.01）.

Conclusion "Qufeng Fuzheng powder exerts a therapeutic effect on peripheral facial paralysis possibly by inhibiting activation of the TLR4/NF-κB signaling pathway and the release of its downstream proinflammatory cytokines and inflammatory mediators.

［KEY WORDS］ "facial paralysis; traditional Chinese drugs; Qufeng Fuzhegn powder; Toll-like receptor 4; NF-kappa B

周圍性面癱為現(xiàn)代醫(yī)學(xué)病名，是由莖乳孔及以下部位面神經(jīng)發(fā)生急性非化膿性炎癥所致［1-3］。據(jù)統(tǒng)計(jì)，周圍性面癱在我國的發(fā)病率為34/10萬，遠(yuǎn)高于歐美國家的5/10萬，男女發(fā)病率相同［4］。祖國醫(yī)學(xué)認(rèn)為，本病是因人體正氣不足，衛(wèi)外功能不固，脈絡(luò)空虛，外邪乘虛而入，傷及頭面陽明脈絡(luò)，使顏面一側(cè)營(yíng)衛(wèi)不和、氣血痹阻、經(jīng)脈失養(yǎng)所致［5-6］。祛風(fēng)扶正散為源自唐代經(jīng)方，憑借對(duì)周圍性面癱的確切

療效被后人沿用［7-9］。然而，本方治療該病作用機(jī)制仍不明確，在一定程度上制約了經(jīng)方現(xiàn)代制劑的開發(fā)創(chuàng)制。既往研究表明，Toll樣受體4（TLR4）/核轉(zhuǎn)錄因子κB（NF-κB）信號(hào)通路或?yàn)楸静〉挠行Ц深A(yù)靶點(diǎn)［10-11］。本研究通過建立RAW264.7細(xì)胞炎癥模型，初步探討本方對(duì)周圍性面癱相關(guān)TLR4/NF-κB信號(hào)通路的調(diào)控機(jī)制，以期為經(jīng)方制劑開發(fā)與臨床精準(zhǔn)治療提供理論參考。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)材料

RAW264.7小鼠巨噬細(xì)胞購自武漢普諾賽生命科技公司。脂多糖（LPS）購自Sigma公司；CCK8購自MCE公司；DMEM培養(yǎng)液、胎牛血清、青鏈霉素雙抗、乙二胺四乙酸（EDTA）均購自Gibco公司；酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）試劑盒購自伊萊瑞特公司；一氧化氮（NO）試劑盒購自南京建成生物工程研究所；RNA提取試劑盒和反轉(zhuǎn)錄試劑盒均購自VAZYME公司；活性氧（ROS）檢測(cè)試劑盒購自碧云天生物技術(shù)公司；二抗購自武漢博士德生物工程有限公司；兔多抗p65購自Abcam公司；兔單抗磷酸化p65（p-p65）、兔多抗磷酸化IκBα（p-IκBα）均購自Affinity公司；兔多抗IκBα購自武漢三鷹生物技術(shù)有限公司；其他試劑均為國產(chǎn)分析純。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 祛風(fēng)扶正散受試物的制備 稱取制川烏中粉20 g，置于圓底燒瓶中，加入體積分?jǐn)?shù)0.75的乙醇500 mL，回流提取1.5 h，濾過后得提取液。殘?jiān)凑盏谝淮蔚奶幚矸椒ㄖ貜?fù)操作，合并兩次提取液，50 ℃減壓濃縮至0.5 kg/L，加入10 g皂礬混勻后，得受試物樣品，終質(zhì)量濃度為0.75 kg/L（以相當(dāng)于生藥材質(zhì)量/液體體積計(jì)）。

1.2.2 RAW264.7細(xì)胞的培養(yǎng)及傳代 將細(xì)胞從液氮中取出，用含體積分?jǐn)?shù)0.10胎牛血清的完全培養(yǎng)液，在37 ℃、體積分?jǐn)?shù)0.05 CO2恒溫培養(yǎng)箱中進(jìn)行常規(guī)培養(yǎng)。當(dāng)細(xì)胞密度達(dá)到80%時(shí)，按1∶4的比例傳代，在37 ℃、體積分?jǐn)?shù)0.05 CO2、飽和濕度條件下擴(kuò)大培養(yǎng)。

1.2.3 CCK8方法檢測(cè)不同濃度的受試物對(duì)細(xì)胞增殖的影響 取處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期、生長(zhǎng)狀態(tài)良好的RAW264.7細(xì)胞，用培養(yǎng)液將細(xì)胞密度調(diào)整到108/L，接種于96孔板，每孔100 μL細(xì)胞懸液，于37 ℃、體積分?jǐn)?shù)0.05 CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)過夜。加入不同濃度（0、3.75、7.50、15.00、22.50、30.00、37.50、60.00、75.00 g/L）的受試物培養(yǎng)1 h后，更換新鮮DMEM培養(yǎng)液，并加入CCK8溶液每孔10 μL，繼續(xù)培養(yǎng)2 h后，用酶標(biāo)儀測(cè)定各孔在450 nm波長(zhǎng)下的吸光度。

1.2.4 Griess reagent法測(cè)定NO的含量 根據(jù)CCK8實(shí)驗(yàn)結(jié)果，設(shè)置空白組、LPS（1 mg/L）組、藥物低劑量（3.75 g/L）組和藥物高劑量（15.00 g/L）組。空白組不做任何處理，LPS組只加入LPS，各藥物組加入不同濃度受試物1 h后再加入LPS共同培養(yǎng)細(xì)胞24 h。然后，加入50 μL Griess試劑與50 μL培養(yǎng)液在96孔板中混合反應(yīng)5 min。收集上清液并按照NO試劑盒操作說明測(cè)定細(xì)胞NO的分泌量。

1.2.5 ELISA法檢測(cè)細(xì)胞上清液中炎癥因子的含量 設(shè)置空白對(duì)照組（A組）、LPS（1 mg/L）組（B組）和藥物低、中、高劑量（3.75、7.50、15.00 g/L）組（C、D、E組）。將處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的RAW264.7細(xì)胞接種于96孔板，置37 ℃、體積分?jǐn)?shù)0.05 CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)過夜，空白對(duì)照組不做任何處理，LPS組只加入LPS，各藥物組加入不同濃度受試物1 h后再加入LPS共同培養(yǎng)24 h。離心收集細(xì)胞上清液，按照ELISA試劑盒操作說明檢測(cè)腫瘤壞死因子α（TNF-α）、白細(xì)胞介素1β（IL-1β）、白細(xì)胞介素6（IL-6）、前列腺素2（PEG2）含量。

1.2.6 活性氧熒光探針（DCFH-DA）法檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)ROS含量 實(shí)驗(yàn)分組與給藥同1.2.5，培養(yǎng)24 h后去除細(xì)胞培養(yǎng)液，加入1 mL稀釋好的DCFH-DA，置37 ℃細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)孵育20 min，充分洗滌后，使用奧林巴斯BX53熒光顯微鏡（日本奧林巴斯）檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)ROS含量，檢測(cè)所用激發(fā)和發(fā)射波長(zhǎng)分別為488 nm和525 nm。

1.2.7 實(shí)時(shí)熒光定量PCR（RT-PCR）檢測(cè)TNF-α、IL-1β mRNA的表達(dá) 實(shí)驗(yàn)分組與給藥同1.2.5，處理24 h后采用Trizol法提取細(xì)胞總RNA。采用Primer5軟件進(jìn)行引物設(shè)計(jì)，引物序列見表1。按照反轉(zhuǎn)錄試劑盒操作說明進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄。PCR反應(yīng)條件：95 ℃預(yù)變性10 min；95 ℃變性15 s，60 ℃退火60 s，95 ℃退火15 s，40個(gè)循環(huán)。每個(gè)樣品設(shè)3個(gè)復(fù)孔，TNF-α、IL-1β mRNA表達(dá)水平以相對(duì)表達(dá)量表示。

1.2.8 蛋白印跡法（Western blot）檢測(cè)TLR4/NF-κB信號(hào)通路相關(guān)蛋白的表達(dá) 參照1.2.5中的方法培養(yǎng)和處理各組RAW264.7細(xì)胞，吸掉各孔細(xì)胞培養(yǎng)液，以PBS液清洗3次，采用RIPA裂解法提取各孔細(xì)胞總蛋白，用BCA試劑盒測(cè)定蛋白濃度。蛋白樣品煮沸變性后，進(jìn)行SDS-PAGE電泳，轉(zhuǎn)膜，用含50 g/L脫脂奶粉的TBST封閉液封閉2 h后加入一抗，4 ℃孵育過夜，以TBST搖洗5次，每次5 min；加入二抗，室溫孵育2 h，以TBST搖洗5次，每次5 min。用ECL顯色，凝膠成像系統(tǒng)顯像，采用BandScan軟件分析膠片灰度值。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

采用SPSS 19.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，應(yīng)用Graphpad prism 6.0軟件繪圖。所得實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)以±s表示，組間比較采用One-way ANOVA檢驗(yàn)，以Plt;0.05為差異有顯著性。

2 結(jié)" 果

2.1 不同濃度的受試物對(duì)RAW264.7細(xì)胞增殖的影響

CCK8法檢測(cè)結(jié)果顯示，受試物濃度在3.75～15.00 g/L時(shí)，對(duì)RAW264.7細(xì)胞活力沒有明顯影響，而其他濃度組與空白組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（F=14.052，Plt;0.01），故選擇3.75、7.50、15.00 g/L作為受試物的低、中、高劑量濃度進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)。見圖1。

2.2 受試物對(duì)炎癥模型細(xì)胞分泌NO的影響

Griess reagent檢測(cè)結(jié)果顯示，與空白組相比較，LPS組RAW264.7細(xì)胞NO的分泌量顯著增加（F=338.731，Plt;0.01）；與LPS組細(xì)胞相比較，藥物低劑量組RAW264.7細(xì)胞NO的分泌量顯著降低（Plt;0.05），藥物高劑量組細(xì)胞NO的分泌量極顯著降低（Plt;0.01）。見圖2。

2.3 受試物對(duì)炎癥模型細(xì)胞TNF-α、IL-1β、IL-6、PGE2分泌的影響

ELISA檢測(cè)結(jié)果顯示，與空白對(duì)照組相比較，LPS組細(xì)胞上清液中TNF-α、IL-1β、IL-6、PGE2含量顯著升高（F=343.345～5 790.712，Plt;0.01）；與LPS組相比，藥物低、中、高劑量組細(xì)胞TNF-α、IL-1β、IL-6、PGE2的分泌呈劑量依賴性受到抑制（Plt;0.01）。見表2。

2.4 受試物對(duì)炎癥模型細(xì)胞ROS分泌的影響

DCFH-DA檢測(cè)結(jié)果顯示，與空白對(duì)照組相比，LPS組細(xì)胞ROS分泌量顯著增加；與LPS組相比，經(jīng)受試物預(yù)處理后，藥物低、中、高劑量組ROS的分泌量均顯著降低。見圖3。

2.5 受試物對(duì)炎癥模型細(xì)胞TNF-α、IL-1β表達(dá)的影響

RT-PCR檢測(cè)結(jié)果顯示，與空白對(duì)照組相比較，LPS組細(xì)胞TNF-α、IL-1β mRNA的表達(dá)水平顯著升高（F=134.430、168.217，Plt;0.01）；與LPS組相比較，藥物低、中、高劑量組細(xì)胞的TNF-α、IL-1β mRNA表達(dá)水平顯著降低，而且受試物對(duì)TNF-α、IL-1β mRNA表達(dá)的抑制作用呈劑量依賴性（Plt;0.05）。見表3。

2.6 受試物對(duì)炎癥模型細(xì)胞TLR4/NF-κB信號(hào)通路相關(guān)蛋白表達(dá)的影響

Western blot檢測(cè)結(jié)果表明，與空白對(duì)照組相比，LPS組細(xì)胞IκBα蛋白表達(dá)水平顯著降低，核內(nèi)p65、p-p65和p-IκBα蛋白表達(dá)水平顯著升高（F=17.793～97.613，Plt;0.01）；與LPS組相比，藥物低劑量組細(xì)胞p-IκBα蛋白表達(dá)水平顯著降低，藥物中、高劑量組細(xì)胞IκBα蛋白表達(dá)水平顯著升高，核內(nèi)p65、p-p65、p-IκBα蛋白表達(dá)水平顯著降低（Plt;0.05）。見圖4和表4。

3 討" 論

周圍性面癱是臨床常見病、多發(fā)病，可發(fā)生于任何季節(jié)，常以春秋季節(jié)多發(fā)，臨床表現(xiàn)為一側(cè)面部表情肌癱瘓、額紋變淺、眼裂增大、眼瞼不能閉合、鼻唇溝變淺等癥狀［12-13］。目前該病的發(fā)病原因尚不明確，西醫(yī)臨床針對(duì)周圍性面癱尚無特異性治療手段，多以皮質(zhì)類固醇激素抗炎消腫和抗病毒治療為主。中醫(yī)認(rèn)為，周圍性面癱屬于“口僻”范疇，多因機(jī)體正氣不足、脈絡(luò)虧虛，外感風(fēng)寒、風(fēng)熱、火毒之邪或內(nèi)生痰濕乘虛侵襲、痹阻經(jīng)脈，肌肉經(jīng)筋失養(yǎng)、縱緩不收所致［5-6］。祛風(fēng)扶正散之經(jīng)方治療周圍性面癱臨床療效確切，方中君藥川烏為毛茛科植物烏頭的干燥母根，具有祛風(fēng)除濕、溫經(jīng)止痛的功效，被廣泛應(yīng)用于炎癥疾病的治療［14-15］。川烏有大毒，未經(jīng)炮制服用可出現(xiàn)中毒，重者會(huì)導(dǎo)致死亡［16-17］。現(xiàn)代臨床多使用制川烏，本課題組前期采用正交試驗(yàn)優(yōu)化了制川烏功效成分的提取工藝［18］。本研究應(yīng)用此提取工藝獲得受試物樣品。

跨膜Toll樣受體（TLRs）作為信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)蛋白，是一類模式識(shí)別受體，TLR4為其家族成員之一，可特異性識(shí)別LPS［19-21］。TLR4/NF-κB信號(hào)通路是炎癥反應(yīng)中主要的信號(hào)通路［22-23］。LPS刺激活化的TLR4經(jīng)MyD88依賴性信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑，導(dǎo)致NF-κB激活并入核啟動(dòng)炎癥因子基因表達(dá)。NF-κB是一種核轉(zhuǎn)錄激活因子，主要由p65和p50兩個(gè)亞基組成［24-25］。生理情況下，NF-κB磷酸化位點(diǎn)被IκB抑制蛋白結(jié)合封閉，處于無活性狀態(tài)；在各種炎性損傷中，IκB被磷酸化降解，釋放和活化NF-κB，使p50的核定位信號(hào)暴露，攜帶p65迅速轉(zhuǎn)移至核內(nèi)，p65可以識(shí)別特定的DNA序列，誘導(dǎo)多種細(xì)胞因子過量表達(dá)［26］。NF-κB通過激活、擴(kuò)大炎癥反應(yīng)以及調(diào)控細(xì)胞因子的轉(zhuǎn)錄和表達(dá)，影響周圍神經(jīng)的再生與修復(fù)，臨床研究發(fā)現(xiàn)其在細(xì)胞凋亡與增殖、免疫應(yīng)答、炎癥反應(yīng)調(diào)節(jié)等過程中均發(fā)揮重要作用［27-28］，近年來已發(fā)展為炎癥疾病的重要治療靶點(diǎn)。

周圍性面癱病人體內(nèi)TLR4/NF-κB信號(hào)通路發(fā)生活化，TLR4蛋白與NF-κB p65磷酸化水平升高，下游炎癥因子TNF-α和IL-1β的表達(dá)水平上升，提示TLR4/NF-κB信號(hào)通路可能在周圍性面癱的發(fā)生發(fā)展中具有重要作用［10-11］。既往研究表明，周圍神經(jīng)損傷后，損傷應(yīng)激反應(yīng)會(huì)迅速激活雪旺細(xì)胞內(nèi)的NF-κB信號(hào)通路，NF-κB被激活后進(jìn)一步誘導(dǎo)內(nèi)源性巨噬細(xì)胞產(chǎn)生TNF-α、IL-1β、IL-6等炎癥因子［29-30］。這些炎癥因子的上調(diào)進(jìn)一步激活NF-κB信號(hào)通路，引起炎癥級(jí)聯(lián)放大反應(yīng)，誘導(dǎo)單核細(xì)胞表達(dá)趨化因子，使各種炎性細(xì)胞聚集到病變部位，導(dǎo)致神經(jīng)纖維脫髓鞘、軸索變性、神經(jīng)細(xì)胞損傷，最終促進(jìn)周圍神經(jīng)病變的發(fā)生發(fā)展；另一方面，這些炎癥因子可以刺激巨噬細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞高表達(dá)一氧化氮合酶（iNOS）、環(huán)氧合酶2（COX-2），導(dǎo)致NO和PGE2大量合成與釋放，引起周圍神經(jīng)功能障礙［31］。同時(shí)，周圍神經(jīng)損傷后，組織內(nèi)ROS生成增加，高濃度的ROS可以通過影響血管平滑肌和炎癥細(xì)胞的增殖及遷移、內(nèi)皮細(xì)胞的凋亡、轉(zhuǎn)錄因子的活化、炎癥細(xì)胞因子和黏附分子的過度表達(dá)，介導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞損傷，從而促進(jìn)周圍神經(jīng)病變的發(fā)展［32］。

既往尚無祛風(fēng)扶正散治療周圍性面癱作用機(jī)制相關(guān)報(bào)道，這在一定程度上影響了相關(guān)制劑的開發(fā)創(chuàng)制。本研究通過建立體外細(xì)胞模型首次對(duì)其作用機(jī)制進(jìn)行探討，結(jié)果提示，LPS可誘導(dǎo)RAW264.7細(xì)胞TNF-α、IL-1β、IL-6、NO、PGE2和ROS等炎性因子和炎癥遞質(zhì)分泌增加，TNF-α、IL-1β mRNA表達(dá)水平升高，不同濃度的祛風(fēng)扶正散受試物預(yù)處理可顯著抑制LPS誘導(dǎo)的RAW264.7細(xì)胞炎癥因子和炎癥遞質(zhì)的分泌，降低TNF-α、IL-1β mRNA的表達(dá)水平，且以高劑量組的效果最佳。Western blot檢測(cè)結(jié)果表明，祛風(fēng)扶正散受試物可有效抑制LPS誘導(dǎo)的RAW264.7細(xì)胞TLR4/NF-κB信號(hào)通路中p65和IκBα的磷酸化，減少IκBα的降解，降低核內(nèi)p65、p-p65的表達(dá)水平。上述結(jié)果表明，祛風(fēng)扶正散可調(diào)控周圍性面癱相關(guān)的TLR4/NF-κB信號(hào)通路，其治療本病的機(jī)制可能與該通路有關(guān)。

綜上所述，TLR4/NF-κB信號(hào)通路是周圍性面癱發(fā)生發(fā)展中重要的信號(hào)通路，祛風(fēng)扶正散是一種良好的TLR4/NF-κB調(diào)節(jié)劑，可抑制TLR4/NF-κB信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的活化，降低LPS誘導(dǎo)的RAW264.7細(xì)胞TNF-α、IL-1β mRNA的表達(dá)以及TNF-α、IL-1β、IL-6、NO、PGE2、ROS的產(chǎn)生水平，提示其治療周圍性面癱的機(jī)制可能與抑制TLR4/NF-κB信號(hào)通路的活化有關(guān)。本研究?jī)H在體外細(xì)胞水平上對(duì)TLR4/NF-κB信號(hào)通路的表達(dá)變化進(jìn)行了探討，初步研究結(jié)論為將來在動(dòng)物水平上開展相關(guān)機(jī)制研究提供了一定的數(shù)據(jù)支持，但關(guān)于祛風(fēng)扶正散治療周圍性面癱的分子作用機(jī)制仍需更深入的研究。

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（本文編輯 馬偉平）