液氮冷凍療法在老齡犬體表增生的臨床應用

李岳奇，張 毅，趙國春，費思菡，王菊梅

（新疆農業大學動物醫學學院，烏魯木齊 830052）

犬腫瘤類疾病是臨床上寵物高發的一類疾病，引起犬腫瘤的病因與犬品種、性別、年齡、機體免疫力以及遺傳等因素有關，老齡犬腫瘤發病率是幼齡和成年的3 倍［1］。動物臨床上主要通過病理組織學方法進行診斷，治療方面根據腫瘤性質及生長部位多采用外科手術切除、放療、化療等方法。液氮冷凍法是指通過-196 ℃的液氮對患病的組織進行反復冷凍，促使冷凍部位的皮膚或組織長期處于冰晶狀態，導致組織內細胞蛋白質變性，組織結構破壞，誘發組織細胞逐漸死亡后萎縮或壞死而被機體清除。液氮冷凍治療有療效良好、不良反應輕微、易于操作和價格低廉等優勢，有廣泛的臨床應用報道。液氮冷凍療法也廣泛應用于臨床治療人類各類疾病，如面部廣泛性扁平疣、傳染性軟疣、跖疣、斑禿、雀斑、外耳道乳頭狀瘤、嬰兒皮膚草莓狀血管瘤以及牙髓炎等疾病均有相關報道［2-9］。因液氮具有一定的揮發性，且需要在專門的容器中保存，需要相應的液氮冷凍儀器治療，在寵物臨床上應用較少。2022 年7月，新疆農業大學動物中心醫院接診1 例13 歲老齡犬，該犬體表有多處大小不一的增生物，肩胛處增生物發生潰爛，破潰處流出新鮮血液，該犬有心臟疾病，全身麻醉風險較大，為解決體表增生物問題，綜合評估，選擇了液氮冷凍方法進行治療，取得了較好的臨床效果。

1 基本信息及病史

13 歲土種犬，已絕育，10.6 kg，定期免疫及驅蟲，中等強度運動后有張嘴喘氣現象。2021 年7 月，該犬肩胛部發現黃豆樣大增生物，未到醫院治療。2022 年5 月發現增生物在不斷變大，且在腰部皮膚發現3 處黃豆樣大小增生物，到醫院進行治療。經醫院初步診斷為腫瘤，但考慮到該犬年齡大，聽診心音異常，增生物生長較為緩慢，且不影響正常吃喝，建議寵物主人繼續觀察，未進行任何治療。2022 年7 月12 日，該犬肩胛部位腫塊及皮膚部近期增生物均生長較快，且肩胛部腫塊發生了破潰，流鮮紅血液，遂來醫院就診。

2 臨床檢查

2.1 體格檢查

患犬體溫38.3 ℃，呼吸32 次/min，心跳120 次/min。精神狀態良好，無脫水，肩胛周圍有鮮紅色血液污染，肩胛處可見突出于體表4 cm×3 cm×3 cm 腫塊，邊緣有破潰。背部有3 處2 cm×2 cm×1 cm 腫塊，觸診所有腫塊均在皮膚及皮下，未見深部生長跡象。聽診心音有雜音，可視黏膜淡粉色，其余未見明顯異常。

2.2 實驗室檢查

2.2.1 血常規及C-反應蛋白檢查 結果顯示血常規結果在正常范圍內（表1）。C-反應蛋白（C-reactive protein，CRP）檢測結果為154.9 mg/L（參考值0～10 mg/L，＜10 mg/L 為正常，10～35 mg/L 為偏高或輕度炎癥，＞35 mg/L 明顯炎癥）。

表1 血液常規檢查結果

2.2.2 血生化檢查 血液生化檢查結果未見明顯異常（表2）。

表2 血液生化檢查結果

2.2.3 X 光檢查 X 光檢查顯示椎膈區肺紋理增粗，心臟影像增大，胸腔、腹腔未見明顯類似腫瘤類影像，其余未見明顯異常。

3 診斷

根據體表多處增生，判斷為犬體表增生物引起，因寵物主人不同意進行病理切片檢查及犬身體等原因，無法進一步診斷。

4 治療

按寵物主人意愿，不進行全身麻醉，以止血、控制腫塊為根本原則進行治療。

在寵物主人安撫情況下對肩胛部及背部剃毛，在所有腫塊周圍用鹽酸利多卡因局部封閉，動物趴臥于手術臺上，腫塊周圍由外向內碘伏消毒3 次，后用75%乙醇脫碘。增生物周圍皮膚用脫脂棉和滅菌紗布隔離，露出增生物，術者帶上棉手套，將液氮冷凍治療儀中注滿液氮，將液氮噴出口對準增生物正中心，可見增生處變白，結冰，待冷凍處周圍1 mm結冰變白時，暫停冷凍，有解凍跡象時再次冷凍，持續時間2 min 左右。等完全解凍5 min 后再次按照上述程序進行冷凍，共進行3 次冷凍后結束治療。

術后2 d 冷凍組織周圍用1.0 g 頭孢曲松鈉、5 mg 地塞米松磷酸鈉注射液、4 mL 鹽酸普魯卡因及滅菌用水封閉治療，2 mL 酚磺乙胺注射液頸部皮下注射，45 mg 卡洛夫注射液皮下注射。1 次/d，連續3 d。匹莫苯丹5 mg 口服，2 次/d。佩戴伊莉莎脖圈，用碘伏消毒冷凍處，2 次/d。

5 轉歸及預后

治療第二天，患犬冷凍組織周圍出現水泡，碘伏消毒后干燥，大小未見明顯變化，冷凍增生物表面發黑，較大冷凍腫塊周圍有少量粉紅色滲出液。第三天冷凍組織周圍縮小約1/3，表面干燥，發黑。第七天，小的冷凍組織周圍痂皮脫落。第九天，較大冷凍組織脫落萎縮，形成新的瘢痕，逐漸愈合。15 d 后回訪，冷凍部位皮膚恢復正常，原腫塊周圍有類似瘢痕組織樣凸起。5 個月后回訪，該犬原冷凍部位恢復良好，冷凍組織周圍及全身皮膚無新發的增生物，冷凍治療效果良好。

6 討論

腫瘤類疾病已經成為世界各地引發犬死亡的重要原因，其中位于皮膚的腫瘤發生率達40%～50%，乳腺類腫瘤、血管瘤、骨瘤等腫瘤也可在軟組織、造血組織、淋巴組織、消化器官、骨骼等［10］處發生。該病例從最初肩胛部發現小增生物到腰薦部逐漸出現多個增生物，且存在逐漸變大的現象，雖沒有進行病理學檢查，無法確診，但由于一處增生物增大發生破潰出血后不得不進行治療，該犬心臟功能不好，寵物主人不同意進行麻醉手術切除，選擇液氮冷凍方法進行治療具有現實意義，能為類似病例的治療提供一種新的治療思路。

液氮冷凍療法在人類醫學上應用較為廣泛。自19 世紀以來，低溫冷凍技術就開始應用于如肺癌、肝癌等各類良性和惡性腫瘤的治療［11］。王莉娜［12］報道超低溫冷凍對低位直腸癌安全有效，尤其是對中晚期患者，不愿接受傳統手術和不耐受手術的患者，能很好地減輕患者痛苦，提高患者生命質量。超低溫冷凍消融技術可作為肉瘤患者無法再次手術的有效治療手段。姜淑敏等［13］報道采用液氮冷凍術治療眼部腫瘤良性31 例（32 只眼），惡性3 例（3 只眼）。患者傷口愈合好，觀察6～12 個月惡性腫瘤均無復發及轉移，總有效率為100%。采用液氮治療時，因液氮溫度低至-196 ℃，且在一般情況下很容易揮發，需要進行多次操作，持續時間較長。本次治療使用的是人用500 mL 液氮冷凍治療儀，根據冷凍直徑可選擇1.0、1.8、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0 mm 的冷凍槍頭，能保證最佳冷凍范圍。

冷凍消融技術不僅可以對腫瘤組織進行反復凍融循環造成局部損傷，而且可引起機體的抗腫瘤免疫反應，在治療中發揮著越來越重要的作用［14］。對腫瘤組織進行低溫冷凍，可以促進腫瘤釋放大量抗原，有效激活T 細胞對腫瘤的識別；利用冷凍消融除了可以控制原發腫瘤，還可增強全身抗腫瘤免疫反應，在機體內產生原位腫瘤疫苗，進而抑制殘留腫瘤的轉移和復發［15］。該病例雖然未能確定是否與皮膚類腫瘤發病相關，但采用液氮冷凍治療，增生物脫落，6 個月后回訪未出擴散，恢復良好，為寵物臨床上部分惡行腫瘤提供一個輔助治療的思路，對腫瘤進行冷凍或對切除腫瘤部位進行淺冷凍，有效激活T 細胞，增強全身抗腫瘤免疫反應。

翟翊然等［16］報道用液氮冷凍輔助治療皮膚鱗狀細胞癌時，會出現水腫、疼痛、局部潰瘍等不良反應。超低溫冷凍治療后可能出現的并發癥有冷休克、出血、多器官衰竭及冷凍臨近器官組織損傷等［17］。本次治療過程中，無論從冷凍時間和冷凍次數來看都相對較長、較多，但該病例第2 天冷凍部位均較為干燥，且隨著時間推移，冷凍組織逐漸萎縮變小，可能因為術后連續3 d 在冷凍組織周圍用頭孢曲松鈉、地塞米松、鹽酸普魯卡因進行封閉治療，并用碘伏消毒，2 次/d，局部封閉消炎后，控制冷凍組織周圍的炎癥，防止冷凍部位出現水泡。