水質環境監測中微生物檢測技術及其質量控制研究

賀莉明

（山西來澤檢測技術有限公司，山西 太原 030006）

引言

微生物檢測技術作為水質環境檢測中常用檢測技術，其在具體應用中仍然存在諸多檢測質量影響因素，如樣品采樣技術、實驗設備及器材、實驗工作人員、材料品質、分析測試步驟等。針對此種情況，應對微生物檢測技術進行全方位質量控制，進而保障水質環境檢測中微生物檢測結果的精準性。因此，對水質環境監測中微生物檢測技術及其質量控制進行研究分析，將有著一定的現實意義。

1 水質環境檢測中微生物樣品采集階段的質量控制

在不同的時間及空間范圍內，水質環境檢測中采集的水體樣品也存在一定差異，所以為保障所采集的水樣具有較強的代表性，應在水樣采集前合理設置固定取水點和取樣時間。水樣采集過程中應確保所采集水量為容量瓶容量的80%，盡可能避免水樣量過多或者過少，以便于檢測時水樣的充分混勻，提高水樣微生物檢測質量。具體水樣采集方法應為直接采集，嚴禁使用采集點水樣清洗無菌采樣瓶，避免其他物品對采樣瓶進行污染。采樣過程中應保證水樣的清澈，盡可能采集上層水樣[1-2]。

供水管網水樣采集前應對取水點的金屬水龍頭進行火燒灼3～5 s，然后放水5～10 min，完成以上操作后再進行水樣采集。農村生活用水采集則應采用清潔干凈水桶進行提水，此過程中盡可能不取表面水，提水后將水樣灌入采樣瓶中，并注意勿用手指或者其他物品接觸采樣瓶瓶口，避免對水樣造成污染。所有采集的水樣均需要在有效固定條件下低溫冷藏保存，并在采集后立即運至實驗室進行實驗檢測。

2 水質環境檢測中實驗準備階段質量控制

2.1 儀器設備校檢

水質環境檢測中微生物檢測技術常用儀器設備包括溫度計、pH 計、天平、滅菌箱、濾膜裝置、培養箱、紫外燈以及其他儀器設備等。為保障各類儀器設備的精準性，避免因儀器設備精準性問題而導致的檢測精度下降情況，應在實驗開始前定期對儀器設備進行校檢，若是發現儀器設備存在精度問題，應對問題進行及時解決。此外，在日常保管過程中應重視儀器設備的保養處理。例如，針對紫外燈保養，應每間隔一個月使用紫外光度計對紫外燈進行測量，保證紫外燈所釋放出的紫外光強度可以達到紫外燈出廠時紫外光強度的70%以上，確保紫外燈的殺菌使用效果；再比如，針對培養箱，應以每天兩次的頻率對培養箱的使用溫度進行檢驗，最佳使用溫度應控制在16～27 ℃區間范圍內。若是在儀器設備校檢中發現儀器設備存在損壞、老化以及其他無法使用情況，應及時對問題設備進行及時檢修和更換，避免后續使用精度受到影響[3]。

2.2 實驗室環境控制

實驗室應具有良好的通風措施，并且能夠有效避免實驗室內存在灰塵、溫度以及濕度變化，為實驗中微生物培養提供最佳環境支持，減少環境因素對實驗中微生物培養穩定性的影響，提高實驗精度。其次，在實驗前，應根據實驗室工作特點，合理設置人員管理原則，并由此保障所有實驗室進出人員均按照要求進行消毒殺菌處理，避免人員進出所導致的實驗室環境污染問題。再次，實驗室內墻壁應遵循光滑、易于清洗和消毒等要求，并且地面、工作臺均需要采用實驗室專用材料，其中工作臺還需要落實光滑、無縫、抗滲透、不透水等要求。最后，實驗室內應采用RODAC 平皿、細菌密度平皿等多種方法對實驗室內部空氣質量以及臺桌面污染情況進行檢測分析，確保空氣及臺桌面污染問題的及時發現和解決。

3 水質環境檢測中實驗階段質量控制

3.1 已制培養基控制

微生物水樣在采集后應立即送至水質檢測室進行實驗檢測。整個實驗中所采用的各類儀器設備均需要在使用前進行徹底清洗及殺菌，然后嚴格按照操作流程要求進行水質微生物樣品檢測操作。此過程中所涉及的培養基和稀釋液均需要通過高壓蒸汽滅菌，避免雜余細菌對整個培養基環境造成污染。針對已制成培養基，應通過標簽在培養基上直接注明培養基的配制人、配置時間、配置批次、配置數量、滅菌溫度、滅菌時間、培養基、pH 值名稱等諸多信息，為后續培養基檢驗匹配提供重要信息支持[4-5]。

3.2 檢測菌落總數控制

在對培養基進行菌落接種前，應將待檢測水樣進行充分搖勻，促使水樣中細菌能夠均勻分布在水中。水樣稀釋過程中，應將水樣沿管壁進行緩慢加入，并且水樣加入過程中要避免吸管端部與管內稀釋液接觸，以此來避免吸管沾有管內檢液。在將水樣注入到培養皿中時，應確保水樣在培養皿側邊處加入，并且加入時僅需要揭開一部分培養皿蓋，不應完全揭開培養皿蓋，然后將吸管以直立滴入方式保證吸管內水樣完全排空，并且此過程中應避免吸管出現吹出等情況，避免后續培養皿培養時出現片狀菌落。在水樣加入培養皿中20 min 后，應在培養皿中加入營養瓊脂，并立即對培養皿進行混勻處理。待培養皿中營養瓊脂完全凝固后，將培養皿進行翻轉培養，避免培養皿中細菌培養過程中出現蔓延生長情況。針對菌落質量控制，則應在培養后的菌落中合理挑取典型菌落，若是沒有典型菌落，則應合理選擇多個菌落進行實驗檢測分析，避免實驗結果出現假陰性情況。

4 水質環境檢測中結果評價系統質量控制

4.1 操作方法精度控制

在某批次水樣中，優先選擇若干個巖性水樣進行雙樣分析。在對數據的對數進行計算分析時，若某一雙樣分析結果存在任一為零情況，則需要在該雙樣分析結果所對應的雙樣進行加1 處理，然后再進行對數值計算。在計算出對數值以后，對每一雙對數的差域進行計算，此差域值可采用R 進行表示，并計算出相關對數差域的平均值。此外，精度控制中還需要取10%左右的例行水樣中進行雙樣分析，若是例行水樣的雙樣分析結果差域平均值大于3.27R，則說明實驗中化驗員的操作精度控制不足，需要分析實驗操作中存在的問題，并對問題進行及時應對解決，避免重新實驗后再出現同樣問題。

4.2 無菌性檢查

每完成一次實驗以后，化驗員應以滅菌水為水樣，對實驗中所使用的培養基、濾膜、稀釋水、沖洗用水等諸多儀器設備及材料進行無菌性檢查，若是發現相關儀器設備及采用存在雜菌感染情況，則應否定以上過程實驗中所獲取的數據信息結果，保障研究的精準性和有效性。此外，原則上來說，為保障實驗結果的可重復性，在下一次實驗過程中應對上一次實驗中所采用的水樣中的10%水樣進行重復檢測，并通過重復檢測結果與上一次檢測結果進行匹配對比，以此來檢驗上一次分析結果的精準性。

5 結語

近些年來，隨著社會對于水質環境安全問題的日益關注，如今水質環境監測相關技術得到快速發展，提高監測精度及效率的同時，也逐步開始實現智能化、自動化發展。但無論如何發展，為保障水質環境監測中微生物檢測技術的應用效果，就必須要提高微生物檢測技術應用時的質量控制工作，具體質量控制內容包括微生物樣品采集階段的質量控制、實驗準備階段質量控制、實驗階段質量控制以及結果評價系統質量控制，相關質量控制成效將會直接影響到水質環境監測中微生物檢測技術應用成效，所以必須要提高相關重視，最終為后續水質環境安全保障提供重要支持。