雞傳染性法氏囊病的臨床鑒定方法及防控

陳圓圓，沈丹丹，李雙雙，周欣，李厚偉，李倩倩，張先鋒，張真真，常照鋒★

（1.商丘美蘭生物工程有限公司，河南 商丘 476000；2.河南普華基因科技有限公司，河南 鄭州 450000）

雞傳染性法氏囊病 （infectious bursal disease，IBD）首次發生于美國甘布洛鎮的60 年代，如今已遍及世界，它是一種雙鏈RNA 病毒，屬于雙RNA 病毒科，無囊膜，即傳染性法氏囊病病毒（IBDV）主要引起以法氏囊內淋巴組織損傷為主的一種疾病，主要侵害雛雞，以法氏囊腫脹、出血壞死為主要特征，引起被感染雞的免疫抑制和死亡，部分雞在發病初期出現自啄肛門羽毛的現象。該病毒在一般環境中比較穩定，能在雞舍內存活122 天。對物理和化學因素具有較強的抵抗力，75℃高溫30 分鐘、0.5%氯化銨作用10 分鐘即可殺滅病毒。

近年來，因IBD 疫苗的廣泛使用，臨床上該病的流行暴發明顯減少，但卻出現了混合感染、區域流行、疫苗免疫失敗等新的特點，分子流行病學研究結果表明，各地IBDV 毒株來源復雜，不同地區、不同時間分離的流行毒株在抗原性、致病性和毒力方面均存在不同的差異。因此，IBD 的防控也面臨著新的挑戰。

2022 年5 月，山東某家養雞場發現發病雞啄肛現象，法氏囊有明顯的腫大、出血和炎性滲出物等病變。臨床癥狀疑似雞傳染性法氏囊病感染。取商品雞法氏囊組織裂解液，并進行瓊脂擴散試驗、血凝試驗、動物感染試驗進行鑒定，具體試驗情況如下。

1 血凝試驗

采取3 月齡雞全血與等量抗凝劑混合，然后用生理鹽水洗滌3 次，每次以1500 轉/分鐘離心10 分鐘，將沉積的紅細胞配制成1%懸液，即為1%雞紅細胞。取雞傳染性法氏囊病病毒裂解液，按常規方法進行血凝試驗，觀察是否有紅細胞凝集，同時用NDV 作陽性對照。結果顯示，分離株樣品沒有出現紅細胞凝集，而新城疫陽性對照有明顯的紅細胞凝集，表明無NDV 污染。

2 瓊脂擴散試驗

甲液：取Na2HPO4·12H2O 3.85 克，加水至1000 毫升。乙液：取KH2PO41.36 克，加水至1000 毫升充分溶解。

瓊脂板制備：將甲液24 毫升、乙液76 毫升加到三角瓶內混勻，再加入1.0 克瓊脂糖，8.0 克氯化鈉，待瓊脂糖完全融化。取滅菌的直徑90毫米平皿，每個平皿中加20 毫升，待凝固后封裝，置2℃～8℃保存備用。

用梅花打孔器進行打孔。中心孔加入雞傳染性法氏囊標準陽性血清，外周孔中加入不同倍比稀釋的組織裂解液上清，同時設立陰性對照。置37℃恒溫培養箱中，經24～48 小時觀察結果。試驗結果顯示，該病雞的組織裂解液上清與雞傳染性法氏囊標準陽性血清之間有明顯的白色沉淀線，而陰性對照未出現，詳見圖1。

圖1 瓊脂擴散試驗鑒定

3 動物回歸試驗

取反復凍融的組織液上清接種25 日齡雞，感染組10 只，每只經點眼、滴鼻接種0.1 毫升，每天觀察并記錄雞的臨床癥狀和發病情況。同時設立空白對照組10 只。

對照組雞全部健活，而感染組雞于接種后第3 天開始出現典型的IBD 臨床癥狀，精神萎靡，羽毛松亂，第4 天開始出現死亡，法氏囊嚴重水腫，內含淡黃色膠凍樣滲出物，胸肌、腿肌有片狀出血；腎臟輕度腫脹，感染雞10 只，死亡2 只，死亡率為20%，對照雞未見明顯變化，詳見圖2。

圖2 感染組雞法氏囊病變照片、對照組雞法氏囊照片

4 結果說明

該分離株病毒不具有凝集雞紅細胞的特性，能與雞傳染性法氏囊標準陽性血清出現明顯的沉淀線，雞感染試驗證實了感染組能出現與臨床自然發病雞相同的癥狀與病變。因此該病雞感染的確為雞傳染性法氏囊病毒。

5 臨床防控措施

5.1 加強飼養管理

在養殖過程中，盡可能做到全進全出，保證飼料質量，盡可能降低更換飼料次數，減少人為的或外界因素的刺激可能引起的雞群發生應激反應導致的免疫力下降。做好日常打掃和定期消毒工作。對圈舍定期進行清掃消毒，進雛前對基隆料槽水線等進行清洗消毒。

5.2 做好疫苗免疫

目前免疫接種是預防該病最有效的方法，市面上比較常見的主要有滅活苗和弱毒苗。所以制定合理的免疫程序，做好免疫接種工作，在免疫接種過程中盡可能保證一針一雞，確保所有的雞只免疫。在發病區和發病季節做好疫苗接種。另外，本病目前沒有特效療法。在發病初期用高免血清和卵黃抗體治療，搭配抗生素可預防繼發感染。