衡水地區宮頸病變篩查人群HPV 感染基因型、陰道清潔度與宮頸病變程度的關系

呂春亮，夏金多，閆萍，王娓娓，王麗麗，康文艷，于晨芳

1 衡水市第四人民醫院婦科，河北衡水 053000；2 衡水市第四人民醫院手術科；3 衡水市第四人民醫院醫務處

人乳頭瘤病毒（HPV）為宮頸癌發生的常見危險因素，長期持續高危HPV 感染可誘發癌前病變、宮頸癌等疾病。然而，HPV 基因型多達上百種，其致病力及致癌危險性存在一定差異［1］。如何評估不同類型HPV 感染對不同程度宮頸病變的影響仍然是臨床研究的熱點問題。相關研究指出，陰道微生態的失衡與HPV 感染密切相關［2］，不同人群及地域中HPV 分型存在一定的差異［3］，了解不同地域感染人群HPV 分型對擬定當地宮頸癌防治策略有重要意義。為此，本文對衡水地區宮頸病變篩查人群HPV感染基因型、陰道清潔度、宮頸病變程度的相關性進行了研究。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選取2019 年1 月—2020 年8 月接受宮頸病變篩查人群500 例。納入標準：①均為衡水地區婦女；②年齡34～65歲；③均有性生活史。排除標準：①既往有宮頸手術者；②哺乳期或妊娠期婦女；③存在認知障礙或精神疾病無法溝通者。本研究獲得衡水市第四人民醫院醫學倫理委員會批準（2019014062Z），接受宮頸病變篩查人群對該研究內容知情同意。

1.2 宮頸HPV 檢測及分型 檢測前擦拭接受篩查者宮頸表面的分泌物，隨后將HPV 專用宮頸刷放置在宮頸口，順時針轉動宮頸刷4～5 圈。隨后將宮頸刷緩慢取出，于管口位置將多余的刷柄折斷，將刷頭放置在樣本管中（裝有細胞保存液），旋緊管蓋，并做好標記。通過PCR-反向點雜交法（PCR-RDB）對宮頸HPV 感染情況進行檢測，試劑盒購自北京義翹神州科技股份有限公司。除膜條含內照質控點（IC）呈現顯色信號外，其余位點均沒有顯色出現，記為HPV 陰性；除IC 外，相應HPV 基因型位點出現顯色信號，記為HPV 陽性［4］。通過基因芯片分型法對上述HPV 陽性者進行HPV 基因分型，包括9 種低危型HPV（HPV6、11、42、43、44、81、53、73、82）和14 種高危型HPV（HPV16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59、66和68）。

1.3 宮頸細胞TBS 分級 采用液基薄層細胞學方法檢查宮頸細胞并進行TBS 分級，包括無上皮內病變和惡性病變（NILM）、上皮細胞異常。上皮細胞異常又分為無明確診斷意義的非典型鱗狀細胞（ASCUS）、低級別鱗狀上皮內病變（LSIL）、高級別鱗狀上皮內病變（HSIL）、鱗狀細胞癌（SCC）。將NILM記為宮頸正常，將ASCUS、 LSIL、 HSIL 及SCC 記為宮頸病變。

1.4 陰道清潔度的檢測 取膀胱截石位，于陰道上1/3 側壁位置采用干棉簽刮取分泌物并均勻涂抹在清潔載玻片上，加生理鹽水1 滴，涂片后高倍鏡觀察。根據所見上皮細胞、白細胞（或膿細胞）、陰道桿菌與雜菌的數量進行判斷，并劃分清潔度。清潔度Ⅰ～Ⅱ度為正常，Ⅲ～Ⅳ度為異常。Ⅰ度：鏡下以陰道桿菌為主，并可見大量上皮細胞；Ⅱ度：有部分陰道桿菌，上皮細胞亦可見，也有部分膿細胞和雜菌；Ⅲ度：只見少量陰道桿菌和上皮細胞，但有大量膿細胞和其他雜菌；Ⅳ度：鏡下無陰道桿菌，幾乎全是膿細胞和大量雜菌。

1.5 統計學方法 采用SPSS20.0 統計軟件。計數資料采用例數或百分比表示，組間比較采用χ2檢驗。P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 宮頸HPV 陽性感染及基因型 500 例接受宮頸病變篩查人群中，HPV 陽性47 例，HPV 陽性感染率 為9.40%（47/500），其 中HPV 單 一 感 染 占74.47%（35/47），多重感染占25.53%（12/47）。47例HPV 陽性者中，高危基因型感染42 例，前4 種HPV52、HPV58、HPV16、HPV18 感染分別為10 例（占21.28%）、6 例（占12.77%）、5 例（占10.64%）、4例（占8.51%），其余10種合計為17例（占36.16%）；低危基因型感染5 例，分別為HPV6、HPV11 感染3例（占6.38%）、2例（占4.26%）。

2.2 宮頸細胞TBS 分級情況 500 例接受宮頸篩查人群中，NILM 466例，宮頸病變34例（占6.80%），其中ASCUS 14例、LSIL 12例、HSIL 6例、SCC2 例。

2.3 宮頸細胞TBS 分級與高危HPV 基因型感染的關系 500 例接受宮頸篩查人群中，發現高危HPV基因型感染42 例，其中宮頸細胞TBS 分級NILM 19例、ASCUS 7 例、LSIL 9 例、HSIL 5 例、SCC 2 例，NILM、ASCUS、LSIL、HSIL、SCC 人群高危HPV 基因型感染率分別為4.08%（19/466）、50.00%（7/14）、75.00%（9/12）、83.33%（5/6）、100.00%（2/2），隨著TBS 分級升高，高危HPV 感染率呈上升趨勢，NILM人群高危HPV 基因型感染率低于ASCUS、LSIL、HSIL、SCC，差異有統計學意義（P 均＜0.05），ASCUS、LSIL、HSIL、SCC 人群高危HPV 基因型感染率比較差異無統計學意義（P均＞0.05）。

2.4 陰道清潔度與宮頸HPV 感染基因型的關系 500 例接受宮頸篩查人群中，陰道清潔度Ⅰ～Ⅱ度463 例，Ⅲ～Ⅳ度37 例。其中低危HPV 感染5 例，陰道清潔度Ⅲ～Ⅳ度1 例；高危HPV 感染42例，陰道清潔度Ⅲ～Ⅳ度36例。高危HPV感染者陰道清潔度Ⅲ～Ⅳ度占比（85.71%）高于低危HPV 感染者（20.00%），差異有統計學意義（P＜0.05）。

2.5 陰道清潔度與宮頸細胞TBS 分級的關系 接受宮頸篩查人群陰道清潔度Ⅲ～Ⅳ度37 例中，宮頸細胞TBS 分級NILM 16 例、ASCUS 6 例、LSIL 8 例、HSIL 5 例、SCC 2 例，NILM、ASCUS、LSIL、HSIL、SCC人群陰道清潔度3～4 度占比分別為3.23%（16/466）、42.68%（6/14）、66.67%（8/12）、83.33%（5/6）、100.00%（2/2）。隨著TBS 分級的升高，陰道清潔度Ⅲ～Ⅳ度占比呈上升趨勢，NILM 人群陰道清潔度Ⅲ～Ⅳ度占比低于ASCUS、LSIL、HSIL、SCC（P 均＜0.05），ASCUS、LSIL、HSIL、SCC陰道清潔度Ⅲ～Ⅳ度占比比較差異無統計學意義（P均＞0.05）。

3 討論

宮頸癌是一種常見的女性惡性腫瘤，特別在發展中國家，發病率較高［5］。HPV 是一種具有雙鏈閉合環狀結構的DNA 病毒，根據其致病力、結構、功能不同將其分為低危型與高危型兩種［6］。目前研究認為，HPV 是癌前病變及宮頸癌發生的危險因素，HPV 感染持續時間及基因型與宮頸癌的發生、發展以及預后密切相關。有研究指出，HPV 感染與陰道微生態改變顯著相關［7］，地域不同、種族不同，HPV感染情況也存在顯著差異［8］。因此，探討衡水地區宮頸病變篩查患者HPV 感染基因型、陰道清潔度與宮頸病變程度的相關性具有重要意義。

本研究顯示，500 例接受宮頸病變篩查人群中，HPV 陽性感染率為9.40%，此與李樂等［9］研究結果類似。本研究47例HPV陽性感染中，高危基因型前四位分別為HPV52、HPV58、HPV16、HPV18，此與佛山地區15 867例女性HPV 感染情況［10］類似，未顯示出不同地域HPV感染率存在一定差異［11］。隨著TBS分級的升高，本研究顯示高危HPV 感染率呈上升趨勢。既往研究同樣證實，宮頸病變與高危型HPV 感染率密切相關［12］。在宮頸癌的發生發展過程中，多重感染的危險度明顯高于HPV 單一感染，另外多重感染患者HPV 持續感染的發生風險相對較高［13］。張旭梅等［14］研究證實，陰道清潔度與pH值存在顯著相關性。正常生育期的婦女的陰道清潔度多為Ⅰ～Ⅱ度，pH 值為3.8～4.4。陰道微生態的菌群構成與HPV 感染密切相關，乳酸桿菌在維持陰道正常酸性環境及清潔度方面起重要作用。當陰道微生態菌群失衡時，可導致陰道清潔度、pH 值異常，誘發宮頸部位感染HPV，從而引起宮頸病變［15］，以至于發展為宮頸癌［16-17］。本研究顯示，高危HPV 感染者陰道清潔度Ⅲ～Ⅳ度占比顯著高于低危HPV 感染者，且隨著TBS分級的升高，陰道清潔度Ⅲ～Ⅳ度占比呈上升趨勢，提示陰道清潔度與HPV 致病性及宮頸細胞TBS 分級密切相關，陰道清潔度分級較高人群更易導致高危HPV 感染及宮頸病變。但本研究中，NILM 人群高危HPV 基因型感染率低于ASCUS、LSIL、HSIL、SCC，NILM 人群陰道清潔度Ⅲ～Ⅳ度占比低于ASCUS、LSIL、HSIL、SCC ，但ASCUS、LSIL、HSIL、SCC 人群陰道清潔度Ⅲ～Ⅳ度占比、高危HPV感染率比較差異無統計學意義，可能與本研究選取樣本較小有關。因此，宮頸病變篩查人群不同宮頸病變程度與HPV 感染基因型、陰道清潔度的相關性仍需要擴大樣本量繼續研究。