河北某規(guī)?；i場(chǎng)藍(lán)耳病抗原抗體檢測(cè)報(bào)告分析

劉英杰 ，齊六衛(wèi)，董彥龍，羿 巖

（沈陽偉嘉生物技術(shù)有限公司，遼寧 沈陽 110027）

豬藍(lán)耳病是由高致病性豬藍(lán)耳病毒（PRRSV）引起的一種豬場(chǎng)常見疾病，又稱豬呼吸與繁殖系統(tǒng)綜合征，具有高傳播性、高致病性、高死亡性的特點(diǎn)。該病主要影響妊娠后期母豬和仔豬，會(huì)造成妊娠母豬大范圍流產(chǎn)，引發(fā)仔豬呼吸系統(tǒng)疾病、生長發(fā)育遲緩甚至死亡，成為目前制約集約化生豬養(yǎng)殖發(fā)展的一大阻礙。日常防治措施包括疫苗的定期免疫和藥物治療。藥物治療主要包括以黃芪多糖、杜仲提取物為主的增強(qiáng)免疫力的藥物和以泰萬菌素、替米考星等防止繼發(fā)感染的抗生素。本文就河北某規(guī)模化豬場(chǎng)使用杜仲提取物治療藍(lán)耳病前后抗原抗體檢測(cè)報(bào)告為例展開討論，旨在給生豬集約化養(yǎng)殖過程中一些新的意見和方向。

1 材料與方法

1.1 豬場(chǎng)背景

河北省唐山市豐潤區(qū)某豬場(chǎng)，母豬存欄50頭，保育豬存欄210頭，采取自繁自養(yǎng)模式，場(chǎng)內(nèi)母豬在2周前注射藍(lán)耳病疫苗，因怕出現(xiàn)排毒感染，故保育豬沒有注射疫苗。后續(xù)保育豬出現(xiàn)咳嗽癥狀，推測(cè)為藍(lán)耳病。

1.2 血樣采集

治療方式采取杜仲提取物連續(xù)飼喂21 d，隨機(jī)選擇取整齊度差，精神狀態(tài)差的保育豬15頭進(jìn)行抗原抗體檢測(cè)分析。具體方法如下：并分別于藥前、給藥后，進(jìn)行豬前腔靜脈采血3～5 mL，按3 000 rpm/min離心10 min，分離血清。

1.3 檢測(cè)方法

通過熒光定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)檢測(cè)豬繁殖與呼吸綜合征病毒核酸（藍(lán)耳病毒抗原），采用酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒方法檢測(cè)抗體（藍(lán)耳病毒抗體），操作方法和結(jié)果判定標(biāo)準(zhǔn)均參照試劑盒說明書。

1.4 判定方法

藍(lán)耳病抗體的判定：通過藍(lán)耳病抗體檢測(cè)到樣本和對(duì)照的吸光度值換算出每個(gè)樣本的樣本/陽性對(duì)照比率（S/ P），根據(jù)S/ P值進(jìn)行判定抗體。當(dāng)S/P值大于等于0.4判定為陽性；當(dāng)S/ P值小于0.4判定為陰性，體內(nèi)無抗體的存在。

藍(lán)耳病抗原CT值的判定：通過試劑盒CT值及曲線形狀對(duì)標(biāo)本結(jié)果進(jìn)行判定。當(dāng)標(biāo)本檢測(cè)結(jié)果CT值≤35或有明顯指數(shù)增長期時(shí)判定為陽性；當(dāng)標(biāo)本檢測(cè)結(jié)果CT值在35-38范圍內(nèi)。此時(shí)應(yīng)對(duì)標(biāo)本進(jìn)行重復(fù)檢測(cè)，如重復(fù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果CT值仍在35～38范圍內(nèi)，有明顯的指數(shù)增長期，則判定為陽性，否則為陰性；當(dāng)樣本檢測(cè)結(jié)果CT值>38或無CT值判定為陰性。

2 檢測(cè)結(jié)果與統(tǒng)計(jì)分析

2.1 給藥前抗原抗體檢測(cè)報(bào)告結(jié)果分析

見表1 ，在給杜仲提取物治療藍(lán)耳病之前，抗原檢測(cè)報(bào)告結(jié)果顯示：15份血清經(jīng)合樣之后形成3份報(bào)告，3份均為陽性；抗體分析結(jié)果顯示：所檢測(cè)的15份血清樣本，血清抗體陽性率為100%。因?yàn)楸Ｓi并沒有注射過藍(lán)耳疫苗，故血液中檢測(cè)出抗原可以分析出保育豬群暴發(fā)了藍(lán)耳病感染，機(jī)體因藍(lán)耳病毒的存在，產(chǎn)生了部分抗體。具體結(jié)果如表2、表3。

表1 檢測(cè)報(bào)告結(jié)果

表2 給藥前豬繁殖與呼吸障礙綜合征抗原熒光PCR定量檢測(cè)明細(xì)

2.2 連續(xù)飼喂21 d杜仲提取物后抗原抗體檢測(cè)報(bào)告結(jié)果

連續(xù)飼喂 21 d 杜仲提取物后抗原抗體檢測(cè)報(bào)告結(jié)果見表4、表5、表6。

表4 檢測(cè)報(bào)告結(jié)果

表5 給藥后豬繁殖與呼吸障礙綜合征抗原熒光PCR定量檢測(cè)明細(xì)

表6 給藥后豬繁殖與呼吸障礙綜合征抗體酶聯(lián)免疫吸附檢測(cè)明細(xì)

2.3 連續(xù)飼喂21 d杜仲提取物后抗原抗體檢測(cè)統(tǒng)計(jì)分析結(jié)果

連續(xù)飼喂 21 d 杜仲提取物后抗原抗體檢測(cè)統(tǒng)計(jì)分析結(jié)果見表7和圖1。

圖1 給藥前后抗原抗體變化情況

表7 連續(xù)飼喂21天杜仲提取物后抗原抗體檢測(cè)統(tǒng)計(jì)分析結(jié)果

2.4 抗體值spss分析結(jié)果

抗體值 spss 分析結(jié)果見表8、表9、表10。

表8 成對(duì)樣本統(tǒng)計(jì)量

表9 成對(duì)樣本相關(guān)系數(shù)

表10 成對(duì)樣本檢驗(yàn)

3 討論與分析

因15號(hào)豬只人為原因淘汰，剩余14頭試驗(yàn)豬只前后抗體結(jié)果對(duì)比分析：（1）抗原由100%的陽性率降低到35%，使用杜仲提取物后對(duì)于豬群更好的清除藍(lán)耳病毒具有一定的促進(jìn)作用。（2）抗體的離散度從38%降低到19%，降低了19個(gè)百分比，說明豬群的整個(gè)抗體水平更趨于一致，更有利于大群的整體藍(lán)耳防控。（3）從統(tǒng)計(jì)分析的結(jié)果看，給藥前與給藥后抗體值差異極顯著（P＜0.05）也充分證明在用藥前后抗體水平有顯著變化。

4 小結(jié)

該試驗(yàn)通過檢測(cè)使用杜仲提取物前后豬群抗原抗體的變化情況，進(jìn)一步證明了當(dāng)藍(lán)耳病毒暴發(fā)時(shí)豬群出現(xiàn)病毒血癥后表現(xiàn)出呼吸困難，咳嗽，流產(chǎn)等情況時(shí)藥物治療的必要性。

使用藥物治療藍(lán)耳病時(shí)應(yīng)遵循兩個(gè)原則：（1）使用增強(qiáng)免疫力藥物，加快機(jī)體清除藍(lán)耳病毒，減少血液中藍(lán)耳病毒滴度，縮短病毒血癥時(shí)間；（2）使用抗生素快速控制因藍(lán)耳病毒引起的繼發(fā)感染。

除了選擇合適的藥物減少藍(lán)耳病毒引起的損失外，還應(yīng)該做好綜合防控。首先應(yīng)做好環(huán)境衛(wèi)生和消毒工作，其次做好豬群藍(lán)耳疫苗的科學(xué)免疫，還要注意引種及病死豬的處理問題。只有做到綜合防控，綜合管理，才能在藍(lán)耳病毒活躍時(shí)獲得最大的養(yǎng)殖效益。