閆雪崧
(山東省濱州市沾化區海洋和漁業發展服務中心,山東濱州 256600)
南美白對蝦(Penaeus vannamei,也被稱為凡納濱對蝦)不僅肉質鮮美、蛋白含量高,而且富含不飽和脂肪酸和多種維生素和礦物質,受到廣大消費者的喜愛(房媛等,2022)。同時南美白對蝦飼養周期短,食性廣,抗病強,除了沿海地區還可以利用純淡水或半咸水等池塘養殖,養殖要求相對較低,目前已成為我國養殖產量、養殖面積最大的蝦類品種。《中國漁業統計年鑒》統計表明,南美白對蝦占我國海水養殖蝦類的80.52%,是僅次于克氏原螯蝦的第二淡水養殖蝦類品種。我國南美白對蝦蝦苗需要量大,2019年達到15070億尾,較2018年相比增加47.36%(王丹等,2021)。與成蝦相比,蝦苗對環境要求高,蝦苗質量直接影響養殖產量和經濟效益。作為變溫動物,南美白對蝦適應的溫度范圍較廣,25~30℃生長性能最佳,溫度過高存活率顯著下降(肖善勢等,2016)。南美白對蝦經歷無節幼體(Nauplius stage,N)、溞狀幼體(Zoea stage,Z)、糠蝦幼體(Mysis stage,M)和仔蝦(Post larval stage,P)4個階段完成變態,各階段的習性及生長性能存在差異(楊章武等,2011)。南美白對蝦適宜高密度養殖,但養殖密度過高時會導致群體內競爭增加,平均餌料系數和抗病能力降低(陳亞坤等,2011)。目前養殖密度對生長性能的影響主要集中于成蝦,幼蝦階段的密度要求及其對后續生長的影響報道較少。
南美白對蝦工業化養殖不斷普及,蝦苗需求量大,但成活率低、生長能力差等問題影響了后續的養殖工作。本研究分析溫度及養殖密度對南美白對蝦幼體成活率的影響,并對蝦苗后續生長性能及消化道酶進行分析,明確育苗條件對后續養殖的影響。
1.1 試驗材料 采用同一批南美白對蝦群體的親蝦的F1代無節幼體,使用餌料為蝦片、藻粉、豐年蟲、BP粉等。試驗用水為經沉淀、砂濾、消毒的海水[pH=(8.0±0.2)、鹽度(30±1)%],使用前曝氣、檢測余氯并涂板檢測弧菌數量。所有試驗均在0.3 m3的可控溫不透明玻璃鋼桶中進行。
1.2 試驗方法
1.2.1 試驗設計 試驗分別設置3種溫度處理[(27±0.5)℃、(30±0.5)℃、(33±0.5)℃],在每種溫度處理下設置3種培育密度(15、25、35萬尾/m3),共9組不同處理,每組設計3個平行。幼蝦投餌6次/d,每個階段的投餌量不同:ZⅠ期投餌(1.5±0.5)g/m3·次,ZⅡ和ZⅢ期投餌(3±0.5)g/m3·次,M期投餌(4±0.5)g/m3·次,P期投餌(5±0.5)g/m3·次,在M和P期適量添加豐年蟲,以保證其營養要求,記錄不同處理組幼蝦各階段的存活率。
對上述各組獲得的蝦苗進行蝦苗標粗,10 d后在每個處理組中隨機選取蝦苗,31℃下300尾/m3繼續養殖6周,每組處理設計3個平行。養殖階段投餌4次/d,初次投喂量為平均體重的3%,后續根據攝食情況適當調整。6周后停止投喂,1 d后各組隨機選取30只對蝦,記錄并計算平均身長和體重。
為明確造成差異的原因,對不同溫度、密度培育的各組仔蝦中隨機取樣10只剝取肝胰臟,利用液氮速凍后于-80℃保存,用于測定胰蛋白酶(Trypsin)、脂肪酶(Lipase)和淀粉酶(Amylase),每組設計3個平行。
1.2.2 幼蝦各階段存活率的測定 利用顯微鏡觀察上述組中幼蝦的變態階段,當各組處理90%以上幼蝦處于ZⅠ后開始計算時間,當其中90%以上幼蝦進入下一個發育階段后計算存活率。在不同位置隨機取樣3次,每次取樣500 mL,利用水體比例法計數,并計算對應階段幼體數量的平均值及存活率。
1.2.3 消化酶活性指標分析 準確稱取等量上述各組仔蝦的肝胰臟樣本,在冰浴下進行勻漿及離心,取上清液等比例混合,使用試劑盒測定消化酶活性(上海通蔚生物,TW30161、TW30674、TW30561),具體方法見相關說明書。
1.3 數據統計分析 利用GraphPad Prism 8軟件處理上述各組數據,結果用“平均值±標準差”表示;同時利用SPSS 20.0軟件進行單因素方差分析,P<0.05表示組間差異顯著。
2.1 不同溫度、密度對南美白對蝦幼蝦各發育階段存活率的影響 由表1可知,隨著溫度的提高,南美白對蝦各階段的存活率降低。當培育密度較高時(25和35萬尾/m3),30和33℃的溫度對仔蝦存活率均顯著低于對應密度下27℃時的存活率(P<0.05)。尤其是當溫度33℃時,當培育密度達到35萬尾/m3時,各階段的存活率均為最低。但MⅢ期以后,30和33℃兩組培育溫度下的幼蝦存活率差異不顯著。大部分發育階段15和25萬尾/m3培育時存活率無顯著差異(P>0.05)。

表1 溫度、培育密度對南美白對蝦幼蝦不同階段存活率的影響
2.2 蝦苗培育的溫度和密度對后續養殖生長性能的影響 由圖1可知,蝦苗培育密度對體長的影響較小,但對后期飼養過程中成蝦平均體重的影響較為明顯,結果顯示,當蝦苗培育密度達到35萬尾/m3時,同樣狀態下飼養的成蝦體重均為同溫度3組中的最低值(P<0.05)。蝦苗培育溫度較高時(33℃)對后續飼養中成蝦的體重影響較大,尤其是當33℃時培育密度達到35萬尾/m3得到的蝦苗經6周養殖平均體重最低,僅為2.67 g;而當蝦苗培育溫度為30℃,培育密度為25萬尾/m3時平均體重最高,達到3.75 g。

圖1 蝦苗培育溫度和密度對南美白對蝦體長及體重的影響
2.3 蝦苗培育的溫度和密度對消化酶的影響由圖2可知,仔蝦肝胰臟的3種消化酶酶活在15和25萬尾/m3時均表現為隨著溫度增加而增加,但溫度對脂肪酶的影響較小。在27℃時培育密度對淀粉酶和脂肪酶的影響較小,當溫度處于30℃時,提高密度到25萬尾/m3以上對胰蛋白酶和脂肪酶的影響無顯著差異,但當培育溫度升高到33℃時,高密度(35萬尾/m3)育苗導致仔蝦消化酶活性不同程度地下降,尤其是胰蛋白酶下降顯著(P<0.05)。

圖2 蝦苗培育溫度和密度對消化酶的影響
南美白對蝦在我國養殖規模大,蝦苗需要量已達到1.5千億尾以上,因此,蝦苗質量直接影響了其產量和經濟效益(王丹等,2021)。與成蝦相比,蝦苗對環境要求更高,工業化育苗不受天然環境條件的影響,可以對溫度、密度、鹽度、溶氧等多條件進行精準控制。溫度通過影響酶活性、機體代謝等方面可以影響蝦類變溫動物的生長發育(馮旭等,2022)。而較高的養殖密度容易造成密度脅迫,影響應激相關蛋白的表達,導致其抗逆性降低,生長速率和存活率降低(Yang等,2017)。但也有報道顯示,不同生長發育階段的適應性可能存在差異,如南美白對蝦的最適溫度在成蝦和幼蝦期存在差異(歐黃思,2015);非洲鯰魚(Clarias lazera)成魚高密度養殖導致攻擊性增加,生長性能降低,但幼魚階段可以適當提高密度(劉洪軍等,2010)。本研究結果顯示,南美白對蝦育苗過程中溫度及密度存在交互作用。隨著溫度增加,幼蝦各階段的存活率降低,但糠蝦生長后期對溫度的適應性明顯增強,提高溫度后存活率無顯著差異。育苗溫度較低(27℃),培養密度為25萬尾/m3時部分發育階段的存活率高于15萬尾/m3(表2),這可能是由于適當的種間競爭對南美白對蝦幼蝦的存活具有促進作用。
由于溫度增加會縮短蝦的變態發育時間,因此,工業化育苗過程中經常采用提高水溫的方法來縮短周期,但這是否對蝦苗后續養殖造成影響尚不清楚。本文同時進行了蝦苗生長試驗,結果發現,蝦苗培育的溫度和密度對后續成蝦的平均體重具有一定影響,發現蝦苗培育溫度和密度過高(33℃35萬尾/m3)會影響蝦苗后續生長,但27和30℃對蝦苗體重的影響沒有差異。為了分析引起差異的原因,本文對仔蝦消化酶進行了分析。消化酶可以反映蝦類攝食情況和對營養物質的利用程度,溫度及密度均影響消化酶活性(周元雪,2014)。研究發現,低密度培育時,溫度升高可導致仔蝦肝胰臟淀粉酶、胰蛋白酶和脂肪酶酶活增加,但育苗條件為33℃、35萬尾/m3時會導致胰蛋白酶酶活顯著下降。這表明高水溫和高密度培育得到的蝦苗其機體代謝受到影響,導致后續生長性能下降。
本文著重探討了溫度和培育密度對南美白對蝦幼蝦的影響,進一步驗證了不同培育條件獲得的蝦苗在后續養殖過程中生長特性等方面的差異,結果顯示,33℃、35萬尾/m3的條件不利于南美白對蝦蝦苗的培育,而且會影響蝦苗質量。本文結果為南美白對蝦養殖技術的完善提供了理論參考。