鎮(zhèn)寧小黃姜脫毒原原種繁育技術(shù)

吳家麗，牛力立，譚體瓊，鮑菊

（安順市農(nóng)業(yè)科學(xué)院，貴州，561000）

小黃姜（Globba racemosaSmith），姜科姜屬植物，辛辣味濃，肉細(xì)嫩，味香，纖維較細(xì)[1]，具有多種藥理活性，具有抗氧化、抗炎、抗癌、降血糖和保護(hù)心血管功效性[2]，是安順市農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)結(jié)構(gòu)調(diào)整中藥食兼用的重要經(jīng)濟(jì)作物之一。鎮(zhèn)寧小黃姜作為安順地方特色品種，根莖黃色或淺黃色，具有強(qiáng)烈辛辣味，味美品質(zhì)佳，2020年獲得國家地理標(biāo)志農(nóng)產(chǎn)品認(rèn)證[3]，2021年種植規(guī)模達(dá)11 053.33 hm2。但由于采用塊莖無性繁殖、反復(fù)重茬生產(chǎn)等原因，小黃姜主產(chǎn)區(qū)姜瘟病、莖基腐病等病害盛行，病毒積累多，導(dǎo)致近年來品質(zhì)降低、產(chǎn)量和種植面減少的現(xiàn)象逐步顯現(xiàn)，同時(shí)大量外地品種占據(jù)部分種植面積，使地方特色品種市場(chǎng)受到嚴(yán)重威脅。采用熱處理結(jié)合莖尖分生組織培養(yǎng)，可脫除生姜病菌，進(jìn)而建立種苗、種姜快繁體系，是防止病害和提高繁殖系數(shù)的有效技術(shù)措施[4]。我國山東、浙江、江蘇、山西、廣西、云南、安徽等省份的科研人員針對(duì)生姜莖尖脫毒、組培快繁體系建立、高產(chǎn)栽培技術(shù)、增產(chǎn)、抗病性等開展了大量的試驗(yàn)研究，在山東、云南等地進(jìn)行了大面積推廣應(yīng)用，增產(chǎn)效果明顯[5～15]，但在貴州省針對(duì)小黃姜原原種繁育技術(shù)研究詳細(xì)報(bào)道少。筆者自2019年開始針對(duì)鎮(zhèn)寧小黃姜組培脫毒及原原種繁育技術(shù)進(jìn)行系統(tǒng)研究，旨在恢復(fù)和提高鎮(zhèn)寧小黃姜優(yōu)良種性，建立鎮(zhèn)寧小黃姜脫毒種姜繁育技術(shù)體系，發(fā)展安順市特色優(yōu)勢(shì)產(chǎn)業(yè)，助力鄉(xiāng)村振興。

1 培育脫毒試管苗

1.1 姜塊催芽及熱處理

選取皮色光亮、肉黃飽滿、無病蟲害的鎮(zhèn)寧小黃姜健康塊莖，沖洗干凈，用0.5%代森錳鋅浸泡30 min撈出晾干，放在高壓滅菌后的無土栽培基質(zhì)中，置于光照培養(yǎng)箱內(nèi)進(jìn)行恒溫（28℃）催芽，保持無土栽培基質(zhì)濕潤。姜芽萌動(dòng)后，于40～45℃（8 h/d）高溫下熱處理1 個(gè)月。

1.2 再生試管苗離體誘導(dǎo)

①外植體消毒滅菌 選取光照箱中催芽熱處理后長2 cm 左右的壯芽，用自來水沖洗30 min 左右，在超凈工作臺(tái)上用75%酒精擦拭或浸泡30 s，再用10%次氯酸鈉（NaClO）滅菌15 min，無菌水沖洗4～5 次后用無菌濾紙吸干水分。

②外植體接種 將消毒滅菌后吸干水分的壯芽，在體視鏡下切取0.1～0.3 mm 的小黃姜莖尖分生組織，接種于以MS 為基本培養(yǎng)基，添加6-BA 2.0 mg/L 和NAA 0.1 mg/L 的培養(yǎng)基中誘導(dǎo)小黃姜再生植株。

③病毒檢測(cè) 將莖尖分生組織誘導(dǎo)的再生植株送至專業(yè)檢測(cè)機(jī)構(gòu)對(duì)黃瓜花葉病毒（TMV）和煙草花葉病毒（CMV）進(jìn)行檢測(cè)。

④脫毒試管苗增殖生根同步培養(yǎng) 將檢測(cè)無黃瓜花葉病毒（TMV）和煙草花葉病毒（CMV）、葉綠、無黃化的壯苗接種于MS+6-BA 2.5～3.0 mg/L+NAA 0.03 mg/L 的培養(yǎng)基中進(jìn)行增殖和生根同步培養(yǎng)，可有效簡化培養(yǎng)程序，減少接種工作量，縮短培養(yǎng)時(shí)間，降低培養(yǎng)成本。此方法與雷開榮[16]的研究一致。

脫毒試管苗培育各階段培養(yǎng)要求均一致。即培養(yǎng)室溫度為25～30℃，光照2 000 lx，12～16 h/d，培養(yǎng)基pH 值5.8～6.0。

圖1 微莖尖分化誘導(dǎo)培養(yǎng)

2 原原種繁育

2.1 脫毒試管苗煉苗

移栽前1 周將生根良好、達(dá)到入土條件的脫毒試管苗放在培養(yǎng)室外、散射光下封瓶煉苗1 d、開瓶煉苗3 d 或封瓶煉苗3 d、開瓶煉苗1 d，使試管苗適應(yīng)外部環(huán)境，提高移栽成活率。

2.2 基質(zhì)選擇與苗床制作

選用自配營養(yǎng)基質(zhì)（無土栽培基質(zhì)∶營養(yǎng)土=2∶1）進(jìn)行移栽。移栽苗床采用廂床栽培，廂面寬1.8 m。移栽前30 d，在廂床底部鋪細(xì)土+1 000 kg/667 m2腐熟兔糞或牛糞，將其混勻后再平鋪40 cm 厚的自配營養(yǎng)基質(zhì)（用1%甲醛、威百畝或棉隆消毒后使用）。

2.3 適期移栽

脫毒試管苗于3月下旬地溫回升后至6月中旬移栽。移栽前1 d 將廂面澆透水，清洗干凈試管苗根部的培養(yǎng)基，按照（12～15）cm×（40～50）cm 的株行距單株栽植于網(wǎng)室大棚中，栽后澆足定根水，加蓋塑料拱棚、遮陽網(wǎng)進(jìn)行保溫、保濕、遮蔭。

2.4 成活期管理

試管苗移栽后15～20 d 新根開始生長，要求白天溫度不高于30℃，夜晚溫度不低于15℃。晴天強(qiáng)光照射或陰天中午時(shí)，應(yīng)及時(shí)揭開網(wǎng)室和拱棚膜兩頭進(jìn)行通風(fēng)透氣，中午溫度過高時(shí)，利用噴灌淋水1 min 左右。移栽后7～10 d 內(nèi)保持拱棚濕度在85%～90%，以后逐漸降低，適時(shí)澆水，經(jīng)常保持基質(zhì)相對(duì)濕度65%左右。30 d 以后根據(jù)試管苗長勢(shì)情況逐漸撤除拱棚膜，晴天強(qiáng)光照天氣加蓋遮陽網(wǎng)遮蔭，避免中午強(qiáng)光直射，分枝開始發(fā)生后即可逐步撤除遮陽網(wǎng)。

2.5 肥水管理

①追肥管理 小黃姜以地下塊莖為產(chǎn)品器官，試管苗根系較弱，忌偏施氮肥，注重氮磷鉀肥配合施用。試管苗新根開始發(fā)生時(shí)，以葉面噴施0.3%～0.5%磷酸二氫鉀+尿素水溶液+2%腐熟油餅對(duì)水淋施為主，7～10 d 1 次，連施3 次；試管苗分枝發(fā)生2個(gè)以上至立秋（8月7日左右）前，分枝發(fā)生較少，根系開始大量發(fā)生，以10%～15%的一桶天下有機(jī)水溶肥（高鉀型）或鉀富貴水溶肥+4%腐熟餅肥+1%腐植酸液肥淋施為主，7～10 d 1 次，連施3 次；立秋后分枝開始大量發(fā)生，姜塊迅速膨大，對(duì)鉀肥需求量增加，以10%氮磷鉀三元復(fù)合肥+5%硫酸鉀水溶液+4%腐熟餅肥+1%腐殖酸液肥淋施為主，連施3次；姜塊膨大后期看苗施肥，以5%硫酸鉀水溶液+4%腐熟餅肥淋施為主，長勢(shì)弱的追施2～3 次，長勢(shì)好的追施1～2 次，7～10 d 1 次。

②水分管理 小黃姜喜溫怕寒怕旱不耐澇，原原種生產(chǎn)中及時(shí)噴水，保證基質(zhì)濕潤，避免長期干旱影響姜塊膨大。雨天須注意網(wǎng)室周圍排水防澇，忌陰雨天濕度過大，引起爛姜現(xiàn)象發(fā)生。

2.6 中耕培土

生姜屬淺根系作物，在封行前須適時(shí)結(jié)合追肥、中耕除草培土2～3 次，保護(hù)塊莖不露出地面，正常膨大。

2.7 病蟲害預(yù)防與防治

圖2 脫毒試管苗分化誘導(dǎo)培養(yǎng)

原原種繁育中，采取“以防為主，綜合防治”原則進(jìn)行病蟲害預(yù)防與防治。脫毒試管苗抗病性強(qiáng)，在原原種繁育過程中無病害產(chǎn)生，在網(wǎng)室紗網(wǎng)被破壞的情況下會(huì)有姜螟蟲、地老虎、斜紋夜蛾等蟲害發(fā)生，可用1.5%精高效氯氟氰菊酯微囊懸浮劑1 000～1 500 倍液、15%辛硫磷乳液800～1 000 倍液等進(jìn)行噴霧防治。

圖3 脫毒試管苗增殖和生根同步培養(yǎng)

2.8 適時(shí)收獲與貯藏

于霜降（10月23日左右）后立冬（11月7日）前選晴天收獲，晾半天后做好標(biāo)記打包運(yùn)輸至地窖貯藏，后熟完成后及時(shí)銷售，或作下一年脫毒原種生產(chǎn)用。

圖4 脫毒原原種繁育