多重免疫層析檢測技術在食品安全快速檢測中的研究進展

劉源，張開惠，王瑩瑩，吳昊芬，崔艷，徐永俊，向怡涵，季艷偉

(西北農林科技大學 食品科學與工程學院，陜西 楊陵，712100)

食品安全傳統檢測大多以色譜法、光譜法、質譜法、聚合酶鏈式反應法等儀器分析方法為主，它們雖然具有靈敏度高、特異性好，結果穩定等優點，但也同時存在樣品處理繁瑣、檢測成本高、檢測時間長等問題，難以滿足“快、準、靈、廉、簡”的現場檢測和市場監督需求[1-4]。此外，由于當今食品組分復雜、干擾雜質繁多，故對食品中特定污染物的現場快速檢測成為分析領域的主要難點之一。

免疫層析檢測技術是一種基于免疫檢測與層析分離相結合的檢測技術，具有檢測快速(10～20 min)、操作簡易、成本低廉、攜帶便捷等特點，在基層大樣本篩查中可實現現場實時檢測[5-6]。然而，傳統免疫層析檢測技術僅能對單一待檢物進行檢測，無法實現多種待檢物的同時檢測，故只能提供有限的樣本信息。隨著對快速檢測靈敏度和檢測效率日益增長的現實需求，多重免疫層析檢測法逐漸成為研究熱點[7-9]。相較于多次單一待檢物的檢測，單次多重檢測既能提高檢測效率，降低成本，又能節約被測樣品，對某些需要進行多個指標聯合檢測的微量樣品具有很大的應用價值，尤其適合在基層實驗室推廣與應用。此外，采用上述方法可以獲得被測樣品更豐富的信息，有助于提高檢測結果的準確性。

近年來，食品安全領域對于多種物質同時檢測的需求越來越大，推進了多重免疫層析檢測法的發展。本文首先對多重免疫層析檢測法中不同信號輸出探針的研究進展進行綜述，闡述了各類探針的增敏作用及其優缺點。然后，系統綜述了多重免疫層析檢測技術在食品安全快速檢測中的應用，最后對該技術在食品安全快速分析檢測中所面臨的挑戰和發展前景進行研討，以期為食品安全多重快速檢測方法的建立提供理論支撐。

1 多重免疫層析檢測技術

多重免疫層析檢測技術因具有低成本、高效率、操作簡單、讀取方便等優點，被廣泛應用于醫療診斷、環境檢測、食品安全檢測等多個領域中，原理如圖1所示。多重免疫層析檢測平臺由樣品墊、結合墊、硝酸纖維素膜(nitrocellulose membrane，NC 膜)和吸水墊在有一定硬度的底板上拼接組合而成，并且在 NC 膜上固化有控制線(control line，C 線)和多條檢測線(test line， T 線)，其中 C 線顯色表示檢測有效，而 T 線顯色則指示陰性或陽性，其檢測結果可通過視覺直接識別或閱讀器進行定性或半定量分析。

圖1 多重免疫層析平臺原理圖Fig.1 Schematic of the multiplex immunochromatography platform

2 不同標記材料在多重免疫層析檢測技術中的應用

多重免疫層析檢測技術其核心是免疫探針，不同標記材料所制備探針的信號表現方式及效果不同，而免疫探針信號的強度及其穩定性是影響檢測靈敏度的最重要因素[6]。隨著材料科學的發展，納米材料因其獨特的尺寸效應、高比表面積、量子效應、宏觀量子隧道效應等特性成為了研究熱點，且納米材料具有較高的光、電、磁敏感性以及較好的表面穩定性，進而相繼涌現出各式各樣的新型納米材料應用于免疫層析檢測中。納米材料的引入為免疫層析檢測技術實現高靈敏度、高特異性、高效率、高速度奠定了較好的基礎。不同的標記材料用于多重免疫層析檢測技術中時，其信號檢測模式不同。目前，研究者們所聚焦的新型納米材料主要包括如以比色信號為讀取信號的金納米粒子、碳基納米材料等標記材料，以熒光信號為讀取信號的量子點、上轉換熒光納米材料等標記材料以及以拉曼信號，化學發光信號等為檢測信號的復合材料等。

2.1 比色型納米材料在多重免疫層析檢測中的應用研究進展

比色信號檢測作為免疫層析檢測技術中最為廣泛應用的信號讀取模式，在多重免疫層析檢測領域中也受到了大量關注，其檢測原理是通過特異性的免疫結合使各種顏色的納米探針在檢測線上產生可供讀取分析的顏色條帶，然后通過肉眼或者借助讀取儀即可對待測物進行定性及半定量分析。目前常用的比色型納米標記材料主要包括納米金、乳膠微球、碳納米材料等。

2.1.1 納米金

納米金(gold nanoparticle，AuNPs，又稱為膠體金，colloidal gold)是由氯金酸通過還原法制備而成的締合膠體，由基礎金核和兩層雙離子層構成，外層離子層在靜電作用下形成懸浮穩定的膠體分散狀態[10]。納米金因具有獨特的尺寸效應、高比表面積、高生物相容性、高穩定性且易于制備、易于功能化修飾、易于裸眼判讀等特點，成為目前免疫層析法中應用最為廣泛的標記材料，具有不可替代的商業地位。WANG等[11]以傳統的球型納米金分別偶聯5種單克隆抗體作為探針，對牛奶中5種金黃色葡萄球菌腸毒素(staphylococcal enterotoxin A、B、C、D、E)進行檢測，其檢測限分別為2.5、2.5、2.5、1和5 ng/mL。XU等[12]基于傳統納米金建立了可同時檢測牛奶中己烯雌酚和雌二醇的免疫層析檢測法，其檢出限分別為25 和65 ng/g。傳統的小粒徑球型納米金發光強度較低，需要大量聚集其信號才能被檢測識別，往往導致檢測靈敏度較低，無法滿足對樣品中目標物的痕量檢測。

近年來，研究者們開始關注異型且粒徑相對較大的納米金顆粒，常見的有棒狀納米金、花狀納米金、錐形納米金等。相較于球形納米金，異型納米金常常具有更大的比表面積使其可承載更多的抗體分子等生物分子，同時由于具有更高的光學亮度和更好的膠體穩定性，以其制備的標記探針往往具有較高的檢測靈敏度。如JI等[13-14]使用花狀納米金作為標記材料制備了超靈敏定量檢測黃曲霉毒素 B1的免疫層析試紙條，花狀納米金的采用使得該方法的抑制濃度比傳統基于球型納米金的免疫層析試紙條檢測法低10倍。HUANG等[15]采用多分支的花狀納米金作為探針構建了能夠同時檢測伏馬菌素 B1(fumonisin B1，FB1)和脫氧雪腐鐮刀菌烯醇(deoxynivalenol，DON)2種真菌毒素的免疫層析檢測法，其檢出限為5 ng/mL，較球型納米金提高了4倍。WU等[16]采用4種不同顏色的異形納米金作為標記材料用于同時檢測玉米樣品中 FB1、玉米赤霉烯酮(zearalenone，ZEN)、赭曲霉毒素A(ochratoxin A，OTA) 和黃曲霉毒素B1(aflatoxin B1，AFB1)4種真菌毒素，其原理如圖2所示，其檢出限分別為3.27、0.70、0.10和0.06 ng/mL。

圖2 基于不同顏色納米金構建同時檢測4種真菌毒素的免疫層析檢測法原理圖(a)；定性檢測結果圖(b、c)[16]Fig.2 Schematic diagram of an immunochromatography assay for simultaneous detection of four mycotoxins based on gold nanoparticles of different colors(a); Qualitative test results(b，c)[16]

2.1.2 乳膠微球

乳膠微球(latex microsphere，LMs)是通過高聚合材料合成的納米標記材料，與膠體金相比，乳膠微球顏色豐富，能夠滿足多種檢測的要求。此外，乳膠微球大小均勻，比表面積大，為偶聯抗體提供了豐富的位點，具有良好的穩定性與較高的靈敏度。CHEN等[17]以紅色、綠色和藍色表面為羧基的聚苯乙烯乳膠微球作為探針，構建了一種與智能手機設備相結合的彩虹“紅綠燈”型免疫層析檢測法，可同時檢測 AFB1、T-2 毒素和 ZEN 三種真菌毒素，原理如圖3所示，其在谷物中檢出限分別為0.04、0.40和1.21 μg/kg。

圖3 基于乳膠微球的多重免疫層析檢測法檢測3種真菌毒素原理圖[17]Fig.3 Schematic diagram of multiplex immunochromatography based on latex microspheres for the detection of three mycotoxins[17]

2.1.3 碳納米材料

碳納米顆粒(carbon nanoparticles，CNPs)具有制備簡單、無毒性、不需要活化以及原材料成本低廉等顯著優勢，已經成為繼膠體金后最重要的標記材料之一，且與傳統金納米顆粒相比，碳納米顆粒還具有優異的導電性和環保性，在許多領域都顯示出了巨大的應用潛力[18]。在檢測靈敏度方面，由于其黑色信號可與白色背景的層析膜形成強烈的對比，從而具有較高的視覺靈敏度，其裸眼可判讀最低檢測靈敏度遠高于膠體金。ZHANG等[19]以無定形碳納米顆粒(amorphous carbon nanoparticles，ACNs)作為探針，建立了可同時檢測 DON，T-2毒素和 ZEN 的免疫層析檢測方法，原理圖如圖4所示，其檢測限分別為20、13和1 μg/kg，與以膠體金和量子點作為探針的免疫層析檢測方法相比，其靈敏度提高了8倍和2倍。為了能夠對牛奶樣品中22種β-內酰胺類抗生素進行同時檢測，ZHANG等[20]采用無定形碳納米顆粒作為探針構建了多重免疫層析檢測法，其對此類抗生素檢測的相應阻斷值均低于歐盟設定的最大殘留量水平。

圖4 基于碳基納米材料的多重免疫層析檢測法檢測3種真菌毒素原理圖[19]Fig.4 Schematic diagram of multiplex immunochromatography assay based on carbon nanoparticles for the detection of three mycotoxins[19]

2.2 熒光型納米材料在多重免疫層析檢測中的應用研究進展

比色信號在檢測過程中易受待測樣品環境本底顏色的干擾，從而導致檢測靈敏度降低、檢測結果不準確等問題，難以用于有色食品中有害物質的檢測。為解決此類問題，熒光信號逐漸成為研究熱點。基于熒光信號的多重免疫層析檢測技術因其具有可視化、穩定性好、抗干擾能力強、靈敏度高等優點，已成為食品安全快速檢測的重要技術。近年來，用于開發多重免疫層析試紙條的熒光型標記材料主要包括量子點、量子點微球、時間分辨熒光微球、上轉換熒光納米材料等。

2.2.1 量子點及量子點微球

量子點(quantum dots，QDs)是一類由 Ⅱ～Ⅵ 族或 Ⅲ～Ⅴ 族元素組成的半導體熒光無機晶體，直徑通常在1～10 nm。由于其具有熒光量子產率高、抗光漂白能力強、熒光壽命長、激發光譜寬、發射光譜窄、顏色可調等優良光學特性，在免疫層析檢測法中獲得了廣泛關注[21]。量子點的多色性常用于同一體系中多種食品污染物的同時檢測[22]。TARANOVA等[23]利用紅色、黃色和綠色3種不同顏色的 QDs 分別標記3種單克隆抗體建立了基于3條檢測線的“交通信號燈”模式的免疫層析方法，用于檢測牛奶樣品中氧氟沙星、氯霉素和鏈霉素3種常見抗生素的殘留，最低檢測限分別為0.3、0.12和0.2 ng/mL，比采用相同抗體的酶聯免疫吸附劑檢測法靈敏度高80～200倍。ZHAO等[24]合成了具有超高熒光亮度的聚合物碳量子點作為信號探針，在最佳條件下，氯氰菊酯、3-苯氧苯甲酸的檢測限分別為0.35和0.04 ng/mL。量子點在多重免疫層析方法中展現了其優越的性能，但 QDs 標記抗體會誘導產生氧自由基，對抗體活性有一定毒性；且 QDs 與抗體等蛋白結合后會導致其熒光減弱或淬滅，使信號減弱或消失；由于量子點粒徑較小，與蛋白偶聯后分離步驟復雜，回收不便，這一系列缺陷限制了其廣泛應用。

量子點微球是通過物理或化學方法將量子點與二氧化硅球、高聚合物球等微納米球體結合起來構建的量子點熒光微球。相比于量子點，量子點微球具有如下優勢：(1)單個量子點微球可包裹數百甚至上萬的量子點，具有更高的熒光強度；(2)通過高聚物材料對量子點的包裹，減少外界對量子點的影響，提高了熒光的穩定性；(3)量子點微球粒徑較大，進行生物偶聯后，低轉速就能實現微球探針的分離純化。REN等[25]采用聚甲基丙烯酸甲酯包裹 QDs 制備量子點熒光微球，其熒光強度比 QDs 提高了約2 863倍，且熒光穩定性也得到了顯著提升，以其作為探針建立 AFB1的免疫層析檢測方法，其半抑制率比以 QDs 作為探針的低39倍，比傳統的膠體金免疫層析試紙條低約100倍。DUAN等[26]以此方法通過調節2種量子點的比例合成黃色、橙色和紅色3種不同顏色的量子點微球，將其作為探針，構建了多色熒光免疫層析試紙條同時檢測玉米中的 ZEN、OTA 和 FB1，其原理如圖5所示，其可視檢測靈敏度為 10、5和 20 ng/mL。

圖5 三色量子點微球合成示意圖(a);免疫層析檢測法原理圖(b)；有關檢測結果示意圖(c)[26]Fig.5 Schematic diagram of the three-color quantum dot microsphere synthesis(a); Schematic diagram of the three-color quantum dot microsphere spherical immunochromatography detection method(b); Schematic diagram of the relevant test results(c)[26]

為了改善量子點的功能特性以及克服其缺陷，科學家們開始將量子點與其他材料復合使用。如XIONG等[27]利用SiO2和量子點制備成新型納米復合材料(SiO2@QDs)作為先進的信號探針，提出了一種多重熒光橫向流動免疫分析法，可同時檢測豬尿液和豬肉樣品中的雷克托巴胺和沙丁胺醇，其檢測限分別為0.007 和0.032 ng/mL，該新型復合材料的靈敏度優于金納米顆粒和熒光微球，同時克服了量子點容易聚集和離心后收集困難的缺點。ZHENG等[28]將具有捕獲/檢測雙功能的磁性量子點納米珠復合材料作為探針，建立了可同時檢測食品中AFB1、OTA和FB1的多重免疫層析檢測法，由于探針具有富集能力可捕獲靶分子從而消除雜質的干擾，且雙層量子點外殼可使信號得到進一步放大，磁珠外的多層羧基化 QDs 不僅大大增加了 QDs 進入納米結構的數量，而且提高了探針在復雜環境中的分散性以及穩定性，原理如圖6所示，其檢測限分別為0.42、11.48和4.21 pg/mL[28]。

圖6 雙功能磁性量子點的制備(a)；不同免疫探針的制備(b)；免疫磁富集靶真菌毒素(c)；基于磁性量子點復合納米材料的多重免疫層析檢測法檢測三種真菌毒素原理圖(d)[28]Fig. 6 Preparation of bifunctional magnetic quantum dots(a); Preparation of different immune probes(b); Immunogagnetic enrichment of target mycotoxins(c); Schematic diagram of three mycotoxins detected by multiplex immunochromatography assay based on magnetic quantum dot composite nanomaterials(d)[28]

2.2.2 時間分辨熒光微球

時間分辨熒光微球(time-resolved fluorescent microspheres，TRFMs)采用高分子聚合物如聚苯乙烯材料或螯合二氧化硅納米粒子包裹鑭系稀土離子(如銪Eu3+、鋱Tb3+、鏑Dy3+和釤Sm3+)而構成。鑭系元素跟普通熒光物質相比，具有 Stocks 位移大，熒光壽命長，寬激發窄發射等特點，因此可較好地避免激發光的干擾，同時解決生物材料自發熒光及熒光染料易淬滅等問題，并進一步提高了檢測的特異性和靈敏度。

TANG等[29]以Eu/Tb 時間分辨熒光微球標記納米抗體作為探針，建立可同時檢測玉米樣品中 AFB1和 ZEN 兩種真菌毒素的免疫層析檢測法，其檢出限分別為0.05和0.07 ng/mL。在相同濃度下，Eu/Tb 熒光微球比不含 Tb 的熒光微球的熒光強度更高，說明以此制備的信號探針能有效提高檢測靈敏度。盧迪莎等[30]采用銪系時間分辨熒光微球分別標記AFB1和OTA的單克隆抗體作為探針，建立了一種可同時檢測AFB1和OTA的免疫層析試紙條。在最佳條件下，其檢測限分別為 3.70 和5.55 μg/kg。JIANG等[31]基于時間熒光分辨微球建立動物性食品中鏈霉素(streptomycin，STR)和雙氫鏈霉素(dihydrostreptomycin，DHSTR)免疫層析檢測法，在牛奶中的檢測限分別為3.62和2.48 μg/kg。

2.2.3 上轉換熒光納米材料

上轉換熒光納米材料(upconversion nanoparticles，UCNPs)是由稀土金屬元素(Er、Yb、Sm 等稀土離子)摻雜在某些惰性材料中構成可上轉換發光的熒光納米材料。由于其長波激發和短波發射的特性，具有良好的組織穿透性，可避免生物樣本中的背景熒光對檢測結果的影響，從而顯著提高檢測信號的信噪比，故適合復雜樣品基質中痕量分析物的檢測。與傳統的有機熒光染料和量子點相比，UCNPs 獨特的反斯托克斯位移發光信號可用于區分食物、環境、生物組織等復雜基質的自發熒光，從而降低背景干擾和提高檢測靈敏度[32]。此外，UCNPs 顯示出更窄的發射光譜，因此可根據吸收和發射光譜進行自由組合，實現多重檢測[33]。XU等[34]開發了一種基于銪納米顆粒(europium nanoparticles，EuNPs)的雙熒光免疫層析法，用于同時檢測玉米樣品中的橘霉素和ZEN，其檢測限分別為0.06和0.11 ng/mL。雖然通過摻雜各種稀土元素或過渡金屬離子，可以制備具有不同顏色的 UCNPs，從而設計具有多檢測線的多重免疫層析檢測方法。然而，摻入稀土元素的 UCNPs 發光光譜寬度最多只能控制在30 nm以內，因此只能合成4、5種顏色的 UCNPs[35]。另外，由于 UCNPs 發光效率偏低、制備復雜且需對表面進行親水性修飾等劣勢限制了該材料的應用。

2.2.4 有機染料熒光微球

有機染料熒光微球指采用聚苯乙烯等將具有熒光特性的有機染料包裹在內而形成的熒光微球。ZHANG等[36]選擇商品化的紅、綠雙色熒光微球與單克隆抗體偶聯作為熒光探針，對魚肉樣品中的微囊藻毒素(microcystin-LR，MC-LR)和岡田酸(okadaic acid，OA)進行同時檢測，原理如圖7所示，其檢出限分別為0.074和2.42 μg/kg。LI等[37]使用熒光微球取代傳統納米金，對牛奶樣品中多肽抗生素黏菌素(colistin，COL)和桿菌肽(bacitracin，Baci)進行同時檢測，其檢測限分別為1.89和7.85 ng/mL。

圖7 熒光探針合成示意圖(a)；免疫層析試紙條示意圖(b)；基于有機染料熒光微球構建可同時檢測食品中微囊藻毒素和岡田酸的免疫層析檢測法原理圖(c)[36]Fig.7 Schematic diagram of fluorescent probe synthesis(a); Schematic diagram of the immunochromatography test strip(b); Schematic diagram of an immunochromatographic assay for simultaneous detection of microcystin and okadic acid in food based on organic dye fluorescent microspheres(c)[36]

2.3 其他信號納米材料在多重免疫層析檢測中的應用研究進展

除了常見的比色信號、熒光信號外，表面增強拉曼散射信號(surface enhanced Raman scattering，SERS)因其極高的靈敏度在多重免疫層析檢測中掀起了研究浪潮。基于SERS的檢測方法不但可以達到單分子水平適合用于食品中對痕量物質的檢測還非常適用于多重檢測。ZHANG等[38]設計合成了帶雙拉曼標簽的Au@Ag芯殼納米顆粒用于制備探針，建立了基于多重表面增強拉曼散射的橫向流動免疫傳感器，同時檢測玉米中的6種主要霉菌毒素，該方法可在20 min內完成，且該免疫傳感器的LOD值低于儀器分析和大多數其他生物傳感器。為了實現高靈敏度的多重免疫層析檢測，研究者們也開始考慮在簡單納米材料的基礎上進行修飾和組合，以期使標記材料同時具有多重功能或多重信號的優點，進一步提高檢測的靈敏度，穩定性，同時還能在一定程度上簡化檢測操作。這些復合納米材料一般集合了2種或2種以上材料的優勢功能，且具備2種及2種以上類型的信號，使得檢測效果得以提升或檢測步驟得以優化。CHAI等[39]設計出一種基于金納米顆粒和辣根過氧化物酶相結合的復合納米材料作為探針標記物，開發了能夠識別雙重信號的側流免疫檢測平臺，可實現樣本中多種抗生素和霉菌毒素的同時定量檢測。基于該方法的硫霉素和 FB1的檢出限分別比以前所報道過的方法低8和40倍。LIU 等建立了一種磁性普魯斯藍納米酶介導的雙信號讀出多重側流免疫分析法，該方法采用納米酶作為信號標簽，將其原始顏色產生的視覺比色信號與納米酶優異的過氧化物酶模擬催化活性產生的催化信號相結合，實現雙讀出策略，得到了更高的精度和更寬的檢測范圍。該檢測方法具有2種定量分析模式，可滿足不同的檢測要求，在實際樣品中具有良好的重現性、準確性和實用性[40]。該團隊還制備了一種可再生生物資源衍生的高親和力鐵基納米酶，并將其作為多重橫向流動免疫分析中的多功能高親和信號標簽，對模擬樣本(豬、豬肝)進行檢測，結果表明，樣品中的鹽酸萊克多巴胺和克侖特羅(獸藥殘留)的檢測線性范圍分別為0～12和0～20 μg/kg，與其他方法相比擴大了檢測范圍，有利于滿足現場雙半定量判斷[41]。

3 多重免疫層析檢測技術在食品安全快速檢測中的應用

3.1 在真菌毒素檢測方面的應用

真菌毒素(mycotoxins)是絲狀真菌在適宜條件下產生的一類具有較強毒性的小分子次級代謝產物，其污染范圍較大，且種類繁多。其中最為常見的真菌毒素有黃曲霉毒素(aflatoxins，AFs)、赭曲霉毒素(ochratoxins，OTs)、ZEN、FB1、DON 和T-2、桔霉素(citrinin，CIT)等。在當今實際生產中，由于加工途徑繁多，同一農產品往往同時被多種真菌毒素污染，不但威脅到人類健康，且還會使產品失去經濟價值，造成經濟損失。因此，建立快速高效的真菌毒素多重檢測技術迫在眉睫。近年來，有關真菌毒素多重免疫層析法檢測的研究進展如表1所示。

表1 基于免疫層析技術同時檢測多種真菌毒素研究進展Table 1 Research progress on simultaneous detection of multiple fungal toxins based on immunochromatographyassay

3.2 在食源性致病菌快速檢測中的應用

食源性致病菌是引發食源性疾病的重要因素，常見于各種食品環境與飲用水源中，此類污染已成為食品安全領域的重要問題之一。常見的引起人和動物發病的食源性致病菌有大腸桿菌O157∶H7(EscherichiacoliO157:H7)、金黃色葡萄球菌(Staphylococcusaureus)、副溶血性弧菌(Vibrioparahaemolyticus)、單核增生李斯特菌(Listeriamonocytogenes)、腸炎沙門氏菌(Salmonellaenteritidi)、鼠傷寒沙門氏菌(Salmonellatyphimurium)等細菌。在實際生活中，一種食物存在同時被多種食源性致病菌污染的可能，所以同時快速準確地檢測食品是否被多種致病菌污染對保障消費者權益是十分重要的。關于食品中的食源性致病菌的多重免疫層析檢測部分研究進展如表2所示。

表2 同時檢測多種食源性致病菌研究進展Table 2 Research progress in simultaneous detection of multiple foodorne pathogens

3.3 在農獸藥殘留檢測方面的應用

面對食物中多種農獸藥殘留帶來的檢測挑戰，開發出靈敏、便捷和廉價的多重檢測方法是輔助監管農獸藥使用及保障人民食品安全的關鍵。近年來關于農獸藥殘留的多重免疫層析檢測法的研究進展如表3所示。

表3 基于免疫層析技術同時檢測多種農獸藥殘留研究進展Table 3 Research progress on simultaneous detection of various agricultural and veterinary drug residues based on immunochromatography

4 結論與展望

本文綜述了多重免疫層析檢測技術不同標記探針的特性以及多重免疫層析檢測技術在快速檢測食品樣品多重污染中的應用，與傳統食品安全檢測技術相比，多重免疫層析檢測技術具有“更快、更準、更靈、更廉、更簡”的優勢，且多重免疫層析檢測技術能夠實現多種目標分析物的同時檢測，獲取的樣本信息更為全面。盡管該多重檢測技術的實驗室研究取得了較快的進展，但在實際食品安全快速分析檢測應用中仍存在挑戰：復雜的食品基質造成的干擾問題、檢測探針合成的復雜性及探針穩定性問題、多種目標物間存在的交叉反應導致的準確性問題等。對于探針標記物而言，復合納米材料因其具有多結構，多功能，多信號的優勢必將會成為未來的研究熱點，是提高檢測靈敏度及檢測性能的關鍵，但如何簡化復合納米材料的制備方法及如何解決材料批次間合成質量差異大的問題也是非常重要的。其次，檢測中部分類別信號需要采用專業儀器進行讀取處理，且由于讀取儀器價格昂貴使檢測成本大大增加，而基于智能手機的便捷檢測讀取平臺由于其攜帶方便、成本低廉、可聯網進行數據處理及數據上傳，提高了檢測的效率及實效性，是未來多重快速檢測設備發展的趨勢，同時可開發智能化的檢測軟件配合使用，以簡化操作，做到人人可檢測，人人會檢測，從而提升檢測速度和降低檢測成本。總而言之，未來的研究將朝著更快速、更準確、更靈敏、更廉價、更高效、更智能、更自動化、操作更簡單的多重免疫層析檢測法發展，只有這樣才能解決食品安全的部分問題，從而保證食品行業健康發展。