SLC16A11、SLC16A13基因多態性與乙型肝炎相關性肝癌的關聯性分析

王瑩瑩，張賢培，劉震陽，閆麗娜，高 霞*

(1.河北省石家莊市疾病預防控制中心性病艾滋病防治所，河北 石家莊050011 ；2.河北醫科大學研究生學院，河北 石家莊 050017；3.河北醫科大學公共衛生學院流行病與衛生統計學教研室、河北省環境與人群健康重點實驗室，河北 石家莊 050017)

肝癌是臨床上常見的消化系統惡性腫瘤，全球每年約有84.1萬新發病例和78.2萬病死病例[1]，其中超過50%的肝癌新發病例發生在中國。2018年，在我國常見惡性腫瘤發病率、腫瘤致死病因中，肝癌分別位列第4位和第2位。慢性乙型肝炎病毒(hepatitis B virus，HBV)感染目前是我國肝癌發病的重要誘因，肝炎變成肝纖維化、肝硬化，進而演變成肝癌[2-4]。最新研究發現腫瘤細胞膜上的單羧酸轉運蛋白(monocarboxylate transporter，MCT)與腫瘤細胞的非控制性增長有關，而SLC16A11和SLC16A13編碼的蛋白質MCT11、MCT13就屬于MCT家族，但是SLC16A11和SLC16A13是否與肝癌發生發展有關尚不明確[5-7]。本研究將探討SLC16A11 rs13342692與SLC16A13 rs4796576基因多態性與乙型肝炎相關性肝癌的關聯性。

1 資 料 與 方 法

1.1一般資料 選取2010年1月-2014年3月于河北醫科大學附屬第一醫院、第二醫院、第四醫院和河北省石家莊市第五醫院的住院患者和體檢人群1 039例，其中健康體檢者370例和HBV自然清除(natural clearance，NC)者248例分別為對照組，乙型肝炎相關性肝癌(HBV相關肝癌)患者421例為病例組。其中病例診斷標準符合由中華醫學會感染病學分會和中華醫學會肝病學分會聯合制定的2010版《慢性乙型肝炎防治指南》。

本研究經河北醫科大學醫學倫理委員會批準通過。所有研究對象均知情同意且簽署知情同意書。

1.2樣本含量 采用PASS 2005軟件計算樣本含量，取雙側α=0.05，檢驗效能1-β=0.85，罕見等位基因頻率(minor allele frequency，MAF)取15%，比值比OR=2，對照組與病例組人數比值為1∶1，經計算每組所需最少樣本含量為237。本研究各組樣本含量均達到237例以上，其檢驗效能將大于85%。

1.3資料收集和錄入 本研究在獲取研究對象的知情同意后，收集了患者的基本信息(性別、年齡、吸煙、飲酒等)，抽取其5 mL外周靜脈乙二胺四乙酸抗凝血，提取基因組DNA，運用Sequenom實驗平臺進行SLC16A11 rs13342692與SLC16A13 rs4796576的基因分型。

1.4統計學方法 應用IBM SPSS 22.0統計軟件分析數據。計量資料比較采用K-WH秩和檢驗；計數資料比較采用χ2檢驗和χ2分割法。基因多態性與乙型肝炎相關性肝癌的關聯性分析采用二分類Logistic回歸分析。P<0.05為差異有統計學意義。

2 結 果

2.13組一般情況比較 3組性別、年齡、吸煙與飲酒比較差異有統計學意義(P<0.05)，見表1。

表1 3組一般情況比較Table 1 Comparison of general conditions of three groups

2.2哈-溫平衡檢驗(H-W平衡) 健康對照組和病例組的SLC16A11 rs13342692與SLC16A13 rs4796576兩個位點基因型進行了哈-溫平衡檢驗，均符合H-W平衡(P>0.05)，見表2。

表2 哈-溫平衡檢驗Table 2 Hardy-Weinberg test (例數)

2.3SLC16A11和SLC16A13基因型分布情況分析 SLC16A13 rs4796576的基因型分布在共顯性模型中差異有統計學意義(P<0.05)，但該基因位點在其顯性和隱形模型比較差異無統計學意義(P>0.05)，SLC16A11 rs13342692的基因型分布在其共顯性、顯性和隱性模型中差異有統計學意義(P>0.05)，見表3。

表3 SLC16A11和SLC16A13基因型分布情況Table 3 Genotype distribution of SLC16A11 and SLC16A13 (例數)

2.4SLC16A11和SLC16A13基因多態性與HBV相關肝癌的關系 以年齡、性別、吸煙、飲酒及各基因多態性為自變量，以HBV相關性肝癌與否為因變量，進行二分類Logistic回歸分析，變量賦值情況見表4。結果顯示，控制年齡、性別、吸煙和飲酒的影響后，SLC16A11 rs13342692與SLC16A13 rs4796576基因多態性與HBV相關肝癌的關聯性分析結果見表5。與健康人群相比，SLC16A11 rs13342692與SLC16A13 rs4796576基因某一基因型與HBV相關肝癌不相關(P>0.05)。以HBV自然清除人群為對照，與AA基因型相比，攜帶SLC16A13 rs4796576位點AG基因型與HBV相關肝癌相關(P=0.019)；在該基因顯性模型中，攜帶G等位基因位點相對攜帶C等位基因位點與HBV相關肝癌相關(P=0.017)。SLC16A11rs13342692與SLC16A13 rs4796576位點其他基因型與HBV相關肝癌不相關(P>0.05)。

表4 變量賦值表Table 4 Information of variable assignment table

表5 基因位點與HBV相關肝癌的關聯性分析Table 5 Analysis of association between gene loci and HBV-related LC

表5 (續)

3 討 論

本研究采用病例對照研究的方法，通過健康對照、HBV自然清除者以及乙型肝炎相關性肝癌患者，分析了SLC16A11基因的rs1334269位點和SLC16A13基因的rs4796576位點的基因型在不同人群中的分布情況及分布特點。研究結果顯示病例組與對照組在年齡、性別、吸煙與飲酒等方面比較差異有統計學意義(P<0.05)。HBV相關肝癌組年齡顯著高于正常組與自然清除組，HBV相關肝癌組中男性占比也顯著高于其他組別，同時吸煙飲酒者在HBV相關肝癌組中也占有更高的比例。

SLC16A13 rs4796576基因的GA基因型相較于HBV自然清除組，在HBV相關肝癌患者中更為多見；同時當基因以共顯性模型表達時，與HBV自然清除人群作對照 AG基因型與AA型相比，可以顯著增加患癌風險(OR=1.544，95%CI:1.073～2.224)；當基因以顯性模型表達時，攜帶G等位基因位點也同樣顯著增加患癌的風險(OR=1.530，95%CI:1.079～2.170)。顯示SLC16A11 rs1334269基因位點在試驗組與對照組差異無統計學意義(P>0.05)。

SLC16A家族成員在腫瘤發生和腫瘤進展中起關鍵作用。SLC16A11和SLC16A13編碼的蛋白質MCT11、MCT13屬于MCT家族。MCTs在腫瘤過程中乳酸的轉運、pH的調節、腫瘤細胞的高糖酵解表型和酸抵抗表型的維持環節中發揮了主要作用[8-10]。此外，MCTs 介導的乳酸轉運還能在腫瘤細胞其他惡性表型，比如免疫逃逸和生成腫瘤血管等過程中起到促進作用[11-15]。本研究顯示，SLC16A13基因rs4796576位點與乙型肝炎相關性肝癌可能有關，攜帶G等位基因可能是患癌的危險因素。但本研究結果僅針對乙型肝炎相關性肝癌患者和乙型肝炎自然清除人群，作共顯性模型分析時，顯示SLC16A13基因rs4796576的AG基因型與AA型相比高。此研究結果的得出目前尚缺乏具體的機制研究來進行支持，存在一定的局限性，尚待進一步研究和探討。