重慶地區11284例患者生殖道沙眼衣原體與解脲脲原體檢出情況分析

劉孟涓 李秋紅 李春莉

(重慶市婦幼保健院·重慶醫科大學附屬婦女兒童醫院檢驗科，重慶 401147)

性傳播疾病(Sexually transmitted diseases，STD)是指主要通過性接觸傳播的一組傳染性疾病，近年來我國發病人數呈逐年上升的趨勢[1]。其中沙眼衣原體(Chlamydia trachomatis，CT)和解脲脲原體(Ureaplasma urealyticum, UU)是引起 STD 的常見病原體，并與男性尿道炎、前列腺炎、附睪炎、精囊炎等，女性陰道炎、宮頸炎、盆腔炎等密切相關，甚至還可導致流產、不孕不育等嚴重后果。由于部分患者感染后可無明顯癥狀，很多病例因無典型癥狀或癥狀較輕而漏診[2]，從而造成病情進一步加重或病原體的隱匿傳播。因此通過實驗室PCR技術檢測患者標本中CT、UU DNA，對于STD的早期發現和診治極為重要。因不同地區的檢測人群、檢測方式和流行特征的差異， 此前各地的研究結果均存在一定偏差。本研究對2017年1月～2021年12月在我院就診的11284例患者的檢測結果進行了回顧性分析，以了解重慶地區近年來CT、UU的感染情況，旨在為臨床篩查、疾病診治和控制病原體傳播提供參考依據。

1 資料與方法

1.1 一般資料 將2017年1月～2021年12月于重慶市婦幼保健院進行CT、UU檢測的按以下去重標準排除后剩下的11284例成年患者納入研究。其中男性7533例，女性3751例。年齡18～78歲，平均(30.97±5.40)歲。男性患者的臨床診斷主要為附睪炎、前列腺炎、龜頭炎、尿道炎等泌尿生殖道相關感染，男性不育癥，健康查體等。女性患者的臨床診斷主要為陰道炎、宮頸炎、盆腔炎、尿道炎等泌尿生殖道相關感染，女性不孕癥，健康查體等。去重標準：①如同一患者多次送檢均為陰性，只計算一次陰性。②如首次檢查結果為陽性，治療后結果為陰性，則按首次陽性結果統計。排除標準：①患者采樣前一周使用過抗菌藥物。②使用陰道栓劑等外用藥物或沖洗劑。

1.2 儀器與試劑 核酸擴增儀采用美國PE公司的ABI7500型實時熒光定量PCR儀。CT、UU DNA檢測試劑盒購自湖南圣湘公司。

1.3 方法

1.3.1 樣本采集與保存

1.3.1.1 生殖道拭子 取無菌棉拭子插入男性尿道口(尿道拭子)或女性宮頸口(宮頸拭子)1～2 cm，旋轉拭子2～3周并停留10 s后取出，將拭子置于無菌管中，立即送檢。

1.3.1.2 精液 按照無菌操作的原則，男性禁欲3～5d后通過手淫法將精液樣本收集到無菌容器中立即送檢。

1.3.1.3 前列腺液 按照無菌操作的原則，經肛門直腸按壓前列腺，前列腺液通過尿道滴到無菌容器中立即送檢。所有標本4℃保存不超過24 h。

1.3.2 檢測方法 生殖道拭子加入約1 mL無菌生理鹽水充分震蕩混勻，將洗脫液轉入1.5 mL 的離心管中。12000 r/min 離心5 min，棄上清液。沉淀中加入50 μLDNA提取液后充分混勻。精液和前列腺液標本先加入約1 mL無菌生理鹽水充分震蕩混勻，12000 r/min 離心1 min后吸取100 μL上清液于1.5 mL的離心管中。12000 r/min 離心5 min，棄上清液，沉淀中加入50 μL DNA 提取液后充分混勻。在室溫下靜置10 min以上取上清液5 μL加入PCR 擴增體系，同時做陰陽性對照各一管，同標本一起置入PCR 儀中進行擴增。所有實驗操作嚴格按照試劑盒說明書進行。按說明書要求進行結果判讀：Ct≤39且擴增曲線呈明顯S型判定為陽性。同時每批次陰、陽性對照和內標曲線的結果需符合相應要求。

1.4 統計學分析 采用SPSS 17.0軟件進行統計學處理，檢出率以(%)表示，檢出率的比較采用2檢驗。以P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 五年總體檢出情況 2017～2021年共檢測了11284例標本，見表1。CT、UU及CT+UU混合感染的總體檢出率分別為4.51%(509/11284)、43.31%(4887/11284)、2.75%(310/11284)。UU的總體檢出率顯著高于CT(2=4668.225，P<0.001)。各項檢出率在2019年略有下降，但五年間總體呈增長趨勢，均在2021年達到最高，且顯著高于2017年(2=21.230, 12.553, 19.758，均P<0.001)。

表1 2017～2021年CT、UU及CT+UU混合感染檢出情況[n(×10-2)]Table 1 Overall detections of CT, UU and CT+UU mixed infection from 2017 to 2021

2.2 檢出率的性別分布 女性CT、UU、CT+UU混合感染的檢出率均顯著高于男性(均P<0.001)，見表2。相同性別患者中，UU的檢出率也顯著高于CT(2=1983.025、 3085.125, 均P<0.001)。

表2 不同性別患者檢出情況比較[n(×10-2)]Table 2 Comparison of detections of patients of different genders

2.3 檢出率的年齡分布 根據成年人群育齡段劃分方式[3]，將11284例患者共分為3個年齡組。各項檢出率在3個年齡組間總體上均有統計學差異(均P<0.001)，其中18～<30歲低育齡組患者的各項檢出率均顯著高于30～45歲高育齡組患者(2=15.891, 36.962、17.401，均P<0.001)。而45歲以上組與前兩組間差異均無統計學意義(均P>0.05)。見表3。

表3 不同年齡段患者檢出情況比較[n(×10-2)]Table 3 Comparison of detections of patients of different ages

2.4 不同季節檢出情況比較 根據季節劃分及重慶地區氣候特點，按照標本采樣時間分為春(3～5月)、夏(6～8月)、秋(9～11月)、冬(12～2月)四季。UU檢出率在四季間總體上有統計學差異(P<0.05)，其中冬季檢出率顯著高于夏季(2=10.812，P=0.001)。而CT的檢出率在四季間總體上比較差異無統計學意義(P>0.05)，但秋季檢出率顯著高于夏季(2=4.624，P=0.032)，見表4。

表4 不同季節檢出情況比較[n(×10-2)]Table 4 Comparison of detections in different seasons

2.5 男性不同類型標本檢出情況比較 男性三種不同類型標本CT、UU的檢出率總體上均有統計學差異(均P<0.001)，其中尿道分泌物CT、UU的檢出率顯著高于精液標本(2=117.627、31.957，均P<0.001)，但這兩類標本與前列腺液相比差異均無統計學意義(均P>0.05)，見表5。

表5 男性不同類型標本檢出情況比較[n(×10-2)]Table 5 Comparison of detections in different types of male specimens

2.6 不同診斷患者檢出情況比較 不同診斷患者的檢出情況見表6。健康查體女性CT、UU的檢出率均顯著高于健康查體男性(2=12.315, 857.605, 均P<0.001)。女性不孕癥患者CT、UU檢出率也顯著高于男性不育癥(2=4.564、158.365，均P<0.05)。泌尿生殖道感染患者中，女性UU檢出率顯著高于男性(2=113.146，P<0.001)，但兩組CT檢出率比較差異無統計學意義(2=0.282，P=0.595)。男性泌尿生殖道感染患者CT、UU檢出率均顯著高于健康查體者男性(2=126.167、5.983，均P<0.05)。男性不育癥患者UU的檢出率顯著高于健康查體者男性(2=5.311，P=0.021)，但兩組CT的檢出率比較差異無統計學意義(2=3.109，P=0.078)。女性不孕癥患者CT、UU檢出率均顯著高于健康查體者女性(2=8.113、10.277,P=0.004、 0.001)。女性泌尿生殖道感染患者CT的檢出率顯著高于健康查體者女性(2=59.261，P<0.001)，但兩者UU的檢出率比較差異無統計學意義(2=0.506，P=0.477)。

表6 不同診斷患者檢出情況比較[n(×10-2)]Table 6 Comparison of detections in patients with different diagnoses

3 討論

成年人群是STD的易感人群，對該人群進行CT、UU的流行病學分析對于STD的防治具有重要意義。本次研究結果顯示，重慶地區近五年CT、UU及CT+UU混合感染的總體檢出率分別為4.51%、43.31%、2.75%。據文獻報道北京地區CT、UU及CT+UU檢出率分別為8.43%，42.88%、4.13%[4]，柳州地區CT、UU檢出率分別為10.90%、61.5%[5]。提示CT、UU的檢出率存在一定的地區差異，可能與各地氣候、醫療、教育、風俗等因素以及當地就診人群差異有關。本次研究發現近5年來重慶地區檢出率呈總體上升的趨勢，表明本地區成年人群生殖道感染情況正逐年加重，且顯著高于2000～2002年本地區女性UU的檢出率5.74%[6]。這可能也與二十年來臨床采樣經驗不斷積累、相關檢測技術不斷提升有關。

CT、UU檢出率在不同性別和年齡的患者中也存在一定差異。本次研究發現女性的各項檢出率均顯著高于男性 (P<0.001)，這與王敬仁等[5]的研究結果一致。原因可能與女性泌尿生殖道的解剖結構有關。女性生殖道的微環境(如溫度、濕度等)可能更適合UU生存。而CT對人體柱狀上皮的侵入率高于鱗狀上皮，最常見的入侵部位是女性宮頸管，因而女性CT感染率通常高于男性[7]。但北京、深圳地區的研究結果均是男性CT檢出率顯著高于女性[4,8]。原因除地區差異外，可能還與婦幼保健院和綜合性醫院就診的男性患者群體差異、送檢的男性標本類型和標本數量等因素有關。本次研究發現，重慶地區18～<30歲低育齡段患者的檢出率顯著高于30～45歲高育齡段患者，這與陳京[3]報道的中山地區的檢測結果一致。因30歲以下成年人群處于性活躍期和生育高峰期。該年齡段患者性行為頻繁、不潔性生活和避孕措施不當等均是誘發生殖道病原體感染的危險因素。育齡期生殖道感染不僅會增加胎膜早破、不良妊娠結局的發生概率，還會增加新生兒母嬰傳播的風險。同時還有研究顯示CT+UU混合感染的孕產婦胎膜早破的發生率進一步增高[9]。因此提示臨床需加強對本地區30歲以下人群的生殖道病原體常規篩查和重點防治。本次研究還發現，45歲以上患者各項檢出率較30～45歲年齡段有所增高，雖差異無統計學意義，但提示重慶地區45歲以上人群中可能具有較高的CT、UU感染風險。有文獻表明該年齡段人群性活躍度增高，高危行為可能普遍存在[10]。也需引起重視。

WHO指出，CT、UU感染者中無癥狀患者比例可高達60%～70%[11]。本次研究的健康查體患者中，男性CT、UU檢出率分別為2.56%、29.55%，女性分別為4.15%、67.99%。因健康查體患者大多無明顯癥狀和體征，這表明重慶地區成年男女均存在CT、UU隱匿感染，且女性的隱匿感染率顯著高于男性(均P<0.001)。因此臨床上需加強對無明顯癥狀的患者，尤其是女性患者生殖道病原體的常規篩查。

診斷明確的男性患者中，泌尿生殖道感染患者CT、UU檢出率均顯著高于健康查體者(均P<0.05)，這與文獻報道的結論一致[12]。而男性不育癥UU的檢出率顯著高于健康查體患者(P<0.05)。這提示CT與男性泌尿生殖道感染存在相關性，而UU對男性不育和泌尿生殖道感染均有相關性。此前的研究表明，CT感染是男性非淋菌性尿道炎最常見的病因，未經及時有效治療者多數轉變成慢性，并出現周期性加重，常可合并附睪炎、前列腺炎等感染性疾病。而UU多寄生在男性尿道、陰莖包皮中，上行感染可引起前列腺炎、附睪炎等，還對精子濃度、前向運動等有一定影響，可導致男性精母細胞空泡化而影響精子正常發育而引起不育[13]。提示臨床對于男性不育癥患者需加強UU常規篩查，而泌尿生殖道感染患者需同時進行CT、UU篩查。此外本次研究還發現，男性患者不同類型樣本之間的檢出率有顯著差異。尿道分泌物標本的檢出率顯著高于精液(P<0.001)。這與許媛等[14]的研究結果一致。因尿道拭子采樣在黏膜表面擦拭能夠獲取更多病原體，而精液標本中包含的脫落細胞含病原體較少而檢出率較低[3]。這提示臨床盡量優先選擇尿道分泌物標本送檢，以提高檢出率避免漏診。

診斷明確的女性患者中，泌尿生殖道感染患者CT檢出率均顯著高于健康查體者(P<0.05)。而女性不孕癥CT、UU的檢出率均顯著高于健康查體者(均P<0.05)。這提示UU與女性不孕存在相關性，而CT對女性不孕和泌尿生殖道感染均有相關性。此前的研究表明，CT侵入女性機體后主要累及宮頸磷柱交界部以上的柱狀上皮引發生殖道感染[15]。炎癥可引發生殖道粘連進而堵塞輸卵管阻礙精子上行，并消耗宮頸黏液葡萄糖含量降低精子活力[16]。UU定植于女性生殖道對精子有黏附、阻礙其運動的作用，產生的神經氨酸酶樣物質還可干擾精子和卵子的正常結合而影響受孕[17]。但有研究顯示UU在女性中定植率可高達80%左右。正常情況下感染后可不致病[18]，即處于一種攜帶狀態，但當機體免疫力低下時，UU可大量繁殖引起生殖道炎癥等不良后果[19]。本次研究發現女性健康查體者和泌尿生殖道感染患者之間的UU檢出率比較差異無統計學意義(P>0.05)，這也表明重慶地區成年女性中普遍存在較高的UU無癥狀攜帶率，因而有必要加強對本地區成年女性生殖道UU的常規篩查。但單純從患者標本中檢出UU DNA并不能確定其是否致病，臨床醫師應結合患者接觸史、癥狀和體征等方面綜合分析。并嚴格把握治療指征，既不能盲目濫用抗生素，同時也要考慮可能引起的感染后果，以免延誤治療。

此前的研究對CT、UU的季節檢出率差異分析較少。文獻報道柳州地區CT檢出率在夏季最高(P<0.05)，UU無顯著的季節差異[5]。而南寧地區UU夏季檢出率最高(P<0.05)，CT無顯著的季節差異[20]。本研究首次發現重慶地區UU的冬季檢出率顯著高于夏季(P<0.05)，而CT在秋季檢出率也顯著高于夏季(P<0.05)。這可能與重慶地區的氣候特點和就診人群特點有關，提示臨床可做一些季節性的預防措施，但仍有待進一步研究。

4 結論

本研究發現本地區CT、UU感染現狀不容樂觀，不同性別、年齡、標本類型、診斷和季節的檢出率均存在一定差異；臨床需加強對重點人群的常規篩查和健康引導，重視無癥狀人群的隱匿感染，積極防治，減少STD 的感染和傳播。