貉冠狀病毒性腸炎的防治

●王德山（山東省安丘市農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全管理服務中心 山東 安丘 262100）

1 流行特點

貉冠狀病毒性腸炎主要特征為病貉劇烈腹瀉、下痢，是一種急性接觸性傳染病。病貉是主要的傳染源，可通過直接或間接接觸由消化道傳染，也可經(jīng)病貉的糞便、尿液、唾液散播，污染飼料、飲水、養(yǎng)殖器具和環(huán)境。該病多發(fā)生于6～8月，未接種水貂犬瘟熱活疫苗（CDV3-CL株）和水貂細小病毒性腸炎滅活疫苗（MEVB 株）的幼貉發(fā)病率高，幼貉發(fā)病率為50%～60%，致死率高達90%。如果不采取有效治療措施，會造成區(qū)域性暴發(fā)流行，繼而導致翌年分窩前后的幼貉再次發(fā)病。

2 臨床癥狀

貉冠狀病毒性腸炎潛伏期一般為5～6 d，發(fā)病初期病貉精神沉郁，食欲減退甚至廢絕，飲欲增強，體溫升高至40℃以上，不愛活動，有時出現(xiàn)嘔吐。隨后出現(xiàn)腹瀉，糞便先軟后稀，含有由腸黏膜上皮、纖維蛋白和腸黏液組成的灰白管柱狀物，后期出現(xiàn)嚴重的水樣腹瀉，糞便中含有大量黏膜、黏液和血液，并有腥臭味。病貉嚴重脫水，極度消瘦，虛弱，眼窩下陷，皮膚彈性消失，被毛逆立、缺乏光澤，大小便失禁，有的伸展四肢呈平臥狀，最后因衰弱造成機體酸堿不平衡或引發(fā)心肌炎導致死亡。

3 病理變化

死亡病貉胃內(nèi)空、無食物，可視黏膜蒼白，腹腔積液，漿膜面有纖維素性覆蓋物。小腸中段和后段腸腔擴張，漿膜充血，腸內(nèi)容物呈水樣并混有血液，腸黏膜嚴重脫落，呈暗紅色。腸系膜淋巴結(jié)腫大、充血、出血。有的病貉整個小腸表現(xiàn)充血或明顯出血，黏膜上皮壞死和脫落，絨毛萎縮。空腸及回腸腸腺消失，殘存的腺體擴張，并含有壞死的細胞碎屑，腸腺上皮可發(fā)生變形，腸上皮細胞內(nèi)可見嗜酸性核內(nèi)包涵體，直腸內(nèi)壁有條狀出血，淋巴結(jié)和胸腺的淋巴組織壞死，部分病貉脾臟腫大，膽囊膨脹、膽汁充盈，肝臟呈土黃色或褐色，質(zhì)地脆弱。見圖1～圖6。

圖1 病死貉機體嚴重消瘦

圖2 剖檢見貉腹腔積液

圖3 剖檢見貉腸道嚴重出血

圖4 剖檢見貉腸黏膜嚴重脫落

圖5 剖檢見貉脾臟萎縮

圖6 剖檢見貉直腸呈條狀出血

4 診斷

4.1 膠體金法試紙檢測

使用冠狀病毒（ccv）快速檢測試紙，對發(fā)病貉進行腸道內(nèi)容物取樣，用取樣棉棒連續(xù)3 次多點取樣，放在稀釋液中稀釋1～2 min，再用塑料滴管吸取檢測液，滴入試紙檢測S 孔1～2 滴，待液體由S 檢測孔流動過T 線至C 線，如果試紙只顯示T 線，判定為陰性；試紙同時顯示T 線和C線，判定為陽性，說明貉感染冠狀病毒；若試紙只顯示C 線，說明檢測試紙失效，無任何判定意義（圖7和圖8）。

圖7 貉冠狀病毒檢測陰性結(jié)果

圖8 貉冠狀病毒檢測陽性結(jié)果

4.2 血凝抑制試驗

4.2.1 病料研磨采集病死貉的腸道、脾臟、肝臟等組織，放置在研缽中，加入5 mL 生理鹽水，研磨5～10 min，待研缽中的組織完全形成混懸液，倒入5 mL 一次性塑料離心管中，待檢。

4.2.2 血液離心采取健康豬的全血2～5 mL，放入帶有抗凝劑的離心管中，2000 r/min 離心5 min，吸取離心管中的上清液棄掉，再加入生理鹽水至5 mL 離心管的刻度線，輕輕搖晃離心管，使沉積的紅細胞與生理鹽水混合均勻，繼續(xù)離心5 min，反復操作3 次后吸取離心管中的上清液棄掉，備用。

4.2.3 配制5%的紅細胞混懸液一次性離心管中加入5 mL 生理鹽水，吸取50 μL 離心好的紅細胞注入到5 mL 生理鹽水中，反復沖洗，直到移液器槍頭中的紅細胞洗凈為止。

4.2.4 待檢樣品懸混液稀釋使用一次性塑料96 微孔板，使用微量移液器在1～12 孔中加入50 μL 生理鹽水，共加入3 排。吸取待檢樣品混懸液50 μL，加入每排的第一孔中進行5 次吹吸，混合均勻，不得產(chǎn)生氣泡，依次進行稀釋到第11 孔時，棄掉微量移液器中的液體，第12 孔為空白參照。第2 排和第3 排依次操作。全部稀釋完畢后，自右向左依次向每個孔中加入50 μL 的5%紅細胞混懸液，將96 微孔板置于微量振蕩器上振蕩1 min，放置在37℃恒溫培養(yǎng)箱中靜置30 min。

4.2.5 結(jié)果判定在紅細胞對照出現(xiàn)完全沉淀、病毒對照出現(xiàn)完全凝集的情況下，將96 微孔板作45°傾斜，從反應板背側(cè)觀察。以完全抑制紅細胞凝集的最大稀釋倍數(shù)判為該血清的血凝抑制滴度（圖9）。

圖9 血凝抑制試驗結(jié)果

5 治療

5.1 對發(fā)病的貉單獨隔離飼喂

每只病貉肌肉注射干擾素3 mL，急救先鋒2 mL，止血敏2 mL，皮下注射10～20 mL 能量合劑（5%葡萄糖40 mL、配合維生素C 5 mL、配合三磷酸腺苷5 mL），每日1 次，連用3 d。病初1～2 d 應減少飼料投喂量，給予充足的加有電解多維的溫水。

5.2 大群投藥治療

5.2.1 早服可使用白頭翁散1000 g/袋（1000只貉子用量），可配合50%卡巴匹林鈣100 g/袋（1000 只貉子用量），也可配合10%硫酸粘菌可溶性粉100 g/袋（200 只貉子用量）。

5.2.2 晚服可使用四黃止痢顆粒100 g/袋（200 只貉子用量），可配合硫酸新霉素可溶性粉100 g/袋（200 只貉子用量），也可配合10%恩諾沙星可溶性粉100 g/袋（200 貉子用量）。

5.3 補充鹽分

根據(jù)發(fā)病數(shù)量和機體脫水情況，可在飲水中添加口服補液鹽500 g 或碳酸氫鈉500 g，可供1000 只貉使用。

5.4 緊急免疫

對未感染發(fā)病的健康幼貉及時接種水貂細小病毒性腸炎滅活疫苗（MEVB 株），過1 周后再接種水貂犬瘟熱活疫苗（CDV3-CL 株），提高幼貉的機體免疫力，從而達到抵抗冠狀病毒侵害的目的。

6 預防措施

6.1 加強飼養(yǎng)管理，做好疫病防控

嚴禁從疫區(qū)引進種貉，從非疫區(qū)引入的種貉需要單獨隔離飼養(yǎng)觀察30 d，并進行水貂犬瘟熱活疫苗（CDV3-CL 株）接種后，才能混入種群飼養(yǎng)。

6.2 妥善處理病死尸及其糞便

對病死貉的尸體進行深埋或焚燒處理，及時清理糞便，堆積生物熱發(fā)酵，地面及場地可用5%氫氧化鈉進行消毒，籠舍用火焰消毒，養(yǎng)殖器具用聚維酮碘溶液消毒，每天1 次，連續(xù)進行7 d。

6.3 幼貉分批接種疫苗

因貉的發(fā)情期不集中，母貉產(chǎn)仔日期無法統(tǒng)一，前后可相差15～20 d，在疫苗接種時養(yǎng)殖戶為了方便操作，要等到最后一批新生幼貉達到35～40日齡后再進行全群疫苗接種，這樣最早發(fā)生的幼貉因超過40日齡，機體的免疫空白期增長，會加大疾病的感染風險，建議分批接種疫苗，保證早產(chǎn)的幼貉及時產(chǎn)生抗體，有效避免疾病的傳播感染。

6.4 預防接種疫苗

接種水貂細小病毒性腸炎滅活疫苗（MEVB株）和水貂犬瘟熱活疫苗（CDV3-CL 株），幼貉應在每年6～7月進行接種，成年貉應在每年的12月至翌年1月中旬和6～7月進行2 次接種免疫，免疫期6 個月。

6.5 禁止混養(yǎng)

養(yǎng)殖場區(qū)禁止飼養(yǎng)犬、貓、雞、鴨、鵝等其他動物，防止共患疾病的交叉?zhèn)鞑ジ腥尽?/p>

6.6 幼貉的科學管理

幼貉從斷乳到開口吃料，胃腸道生理性變化較大，腸道中的菌群數(shù)量較少時，需要額外在飼料中添加益生菌或益生元，幫助腸道建立穩(wěn)定菌群，從而起到保護腸道健康、減少腸道疾病的發(fā)生的作用。因幼貉的胃腸道生長尚不健全，不要過量飼喂，否則會引起幼貉的胃腸消化不良，出現(xiàn)腹瀉等癥狀，嚴重的會造成胃腸道黏膜脫落，從而導致病原微生物的感染。此外還應保證維生素、微量元素和礦物質(zhì)的足量添加。