水果蔬菜中多種農藥殘留基質效應探討

何沖，孫亞南，王彬，邊文文

陜西省產品質量監督檢驗研究院（西安 710048）

傳統的農藥殘留的檢測分析前處理步驟繁瑣，樣品制備成本大，提取溶劑使用量多，危害性大。自QuEChERS方法問世以來[1]，經過十多年的探索，已經逐步成熟，在農藥殘留分析中得到廣泛的應用。液相色譜-質譜聯用技術是將液相色譜的高分離能力和質譜的高鑒別能力相結合的一項分離分析技術，它有效地克服氣質聯用在農藥殘留檢測上的一些問題，但同時仍存在普遍的基質效應[2]。基質效應根據基質對檢測信號的影響程度不同分為基質增強和基質抑制效應，其影響因素可能有許多方面[3-9]。雖然國內外眾多研究工作者致力于消除和補償基質效應[10-13]，但其仍不可能完全被消除，因此在日常檢測中對基質效應的補償和校準對于提高農藥殘留分析結果的準確性有著至關重要的作用。

用0.1%甲酸-乙腈，QuEChERS法對不同水果、蔬菜基質中的農藥殘留進行提取，通過UPLC-MS/MS對多種農藥殘留進行檢測，考察不同基質對不同農藥殘留的影響。

1 試驗部分

1.1 儀器與設備

Altis超高效液質聯用儀（Thermo Fisher）；BSA224S電子天平[賽多利斯科學儀器（北京）有限公司]；漩渦混合器（VOrtex）；TDZ5-WS離心機（湖南湘儀實驗室儀器開發有限公司）；FV64氮吹儀（得泰儀器科技有限公司）。

1.2 試劑和耗材

甲醇、乙腈、甲酸均為色譜純（試劑生產廠家：默克）；所用水為超純水；滅蠅胺、多菌靈、噻蟲嗪、吡蟲啉、噻蟲胺、啶蟲脒、氯吡脲、烯酰嗎啉、甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽、多效唑、苯醚甲環唑、唑蟲酰胺標準溶液（標準品生產廠家TMRM）；水果蔬菜提取鹽包（COQ050010P-J；4 g無水硫酸鎂、1 g氯化鈉、1 g檸檬酸鈉二水合物、0.5 g檸檬酸二鈉鹽倍半水合物）；樣品凈化管（COQ015020P-J；每毫升提取液-150 mg無水硫酸鎂、25 mg PSA、2.5 mg GCB；QuEChER前處理包生產廠家：逗點生物）。

1.3 標準曲線的配制

用乙腈分別將標準物質配制成質量濃度為1 μg/mL的標準混合溶液儲備液；分別精確吸取一定量的儲備液，用乙腈稀釋成質量濃度為10，30，50，100和200 ng/mL的標準工作溶液；選擇不同基質的空白樣品按照樣品前處理得到空白基質溶液，精準吸取一定量的混合標準溶液，用空白基質溶液稀釋成質量濃度為10，30，50，100和200 ng/mL的基質標準工作溶液。

1.4 樣品前處理

稱取10 g試樣（精確至0.01 g）于50 mL塑料離心管中，加入10 mL乙腈，劇烈振蕩1 min，加入水果蔬菜提取鹽包，劇烈振蕩1 min后以4 000 r/min離心5 min。吸取上清液至樣品凈化管，渦旋混勻1 min。按4 000 r/min離心5 min，吸取上清液，過0.22 μm微孔濾膜，待測定。同時做空白試驗。

加標回收試驗同上述樣品前處理。

1.5 液相色譜-串聯質譜檢測

1.5.1 液相色譜條件

色譜柱：VDX C18，2.6 μm，2.1 mm×100 mm；流動相：A為含0.1%甲酸水溶液，B為甲醇。梯度洗脫程序見表1；流速：300 μL/min；柱溫：40 ℃；進樣量：2 μL。

表1 梯度洗脫程序

1.5.2 質譜條件

離子源：電噴霧離子源（ESI+）；檢測方式：多反應監測（MRM）；噴霧電壓：3.5 kV（ESI+）；離子傳輸管溫度：350 ℃；霧化器溫度：300 ℃；鞘氣壓力：30 Arb；輔助器壓力：10 Arb；掃氣壓力：0 Arb。

2 結果與討論

基于QuEChERS法，選取了18種水果蔬菜對12種農藥殘留的基質效應進行了研究探討，通過分析發現基質效應主要表現為3種形式。第一類以滅蠅胺為例，與乙腈相比，不同的基質對目標物在液質上的表現均為基質抑制，滅蠅胺的基質抑制效應可達75%左右；第二類主要為不同的基質在此類農藥殘留上影響并不相同，即可產生基質，也有基質抑制的情況，以甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽為例，通過圖1可以看出大部分蔬菜基質對于其起到了基質增強的作用，而在多數水果為基質的條件下，其表現為基質抑制；還有一類農藥殘留基質效應表現并不明顯，如吡蟲啉等。

圖1 滅蠅胺、甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽和吡蟲啉三種農藥殘留的基質效應

對比了50 ng/mL下不同基質對農藥殘留的影響，從圖2可以看到：以生姜、韭菜和柑橘等一類物質為基質時，試驗中所檢測的農藥殘留均表現為較強基質抑制作用，這可能和其中含有較多色素或者糖分有關；以黃瓜為基質時，大部分農藥殘留基質效應并不明顯，可能是其基質較為簡單，含水較多，當前處理去除水分后就會產生較小的基質影響。

圖2 多種農藥殘留的不同基質效應

同時考察了0.01 mg/kg添加水平下不同基質多種農藥殘留的回收率情況，以基質標曲進行數據計算，結果表明，當以基質標曲進行校正時各種農藥殘留的回收率為81.2%～105.4%。

3 結論

試驗中分別對18種基質條件下12種農藥殘留的基質效應進行了探討。試驗結果表明，不同的基質對于不同的農藥殘留表現各有不同，基質增強和基質抑制都有存在，同時也有部分農藥殘留對基質并不敏感，其基質效應并不明顯。在基質干擾較大（基質增強或基質抑制均有可能）的情況下，應當采用相應的基質配制基質標準曲線對樣品中的農藥殘留進行校正計算，其回收率可達81.2%～105.4%。